北大营示范场黑麦草引种与品比试验研究

利用1998年2－11月在云南省北大营示范场引种的10个黑麦草品种的观测资料，统计分析了在高、中、低3种施肥水平下黑麦草的累计产量、月平均产量及其生长速度的变化规律，研究了影响产量的主导因子及其监测模型。结果表明，在10个品种中，伯生（Bison Intermdiate）及安巴瑟（Embassy）具有良好的生产性能。黑麦草产量主要受气候、土壤肥力及品种等因素的影响，其中测草盘高度、降水量、蒸发量、日照时数和牧草生长天数等5个因子，可以较好地模拟、评估黑麦草产量的变化动态。     

高寒地区野生垂穗披碱草农艺性状及生产性能评价

对采自青海省不同海拔和不同地区的7份野生垂穗披碱草(Elymus nutans Griseb.)在西宁地区对其农艺性状及生产性能进行评价,为青藏高原地区筛选育种材料提供理论依据.结果表明:7份材料中采自海南州同德县高寒草甸海拔3201m的4号材料产草量最高,可作为饲草型牧草进行选育;采白果洛州玛多县高寒草原海拔4385m的1号材料表现出较好的综合生产性能和适应性,可作为饲草兼产籽型牧草进行选育.     

鸡RNF165蛋白多克隆抗体制备及其生物信息学分析

【目的】制备鸡环指蛋白165(RNF165)多克隆抗体并对RNF165蛋白进行生物信息学分析,以期为研究鸡RNF165的生物学功能提供参考。【方法】以鸡胚成纤维细胞(DF-1)为试验材料,提取总RNA,反转录获得cDNA,通过PCR扩增RNF165基因,将其连接至pET-28a(+)质粒构建重组表达质粒pET-28a-RNF165。将测序正确的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达,将表达的融合蛋白纯化后按照制定的免疫程序免疫7周龄BALB/c雌鼠。第3次免疫7 d后,分离小鼠血清,用Western blotting检测鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体的特异性,间接ELISA法测定其效价。使用在线生物信息学软件对RNF165蛋白理化性质、信号肽、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜结构、二级结构和保守结构域进行分析。【结果】成功扩增得到大小为1 068 bp的RNF165基因。成功构建原核表达载体pET-28a-RNF165,并诱导表达出约43 ku的RNF165蛋白。Western blotting结果显示,制备的鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体能特异性识别DF-1细胞中过表达的...     

转基因牛多重PCR检测方法的建立

为建立一种快速检测转基因牛的多重PCR方法,针对牛线粒体16 S rRNA基因(BOS mtD-NA16 S rRNA,BOS)、转基因动物常用标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPT Ⅱ)、人乳铁蛋白编码基因(human laetoferrin gene,hLF)、人-α-乳清蛋白编码基因(human α-lactalb...     

新疆昌吉32个紫花苜蓿品种的田间抗病性评价北大核心CSCD

为筛选出适宜当地条件的高产抗病品种,连续2年2次调查了2018年建植于新疆昌吉市呼图壁县的32个紫花苜蓿品种上各种病害的发病率和病情指数,并测定了各品种次年的越冬率和5次刈割期的草产量,评价了不同品种的抗病性,采用灰色关联度法分析了各品种的综合特性。结果表明,试验地发生了苜蓿茎点霉叶斑与黑茎病、白粉病、黄斑病、匍柄霉叶斑病和尾孢叶斑病5种病害,且以前3种为主,前3种病害的发病率最高分别达到了97.08%、100.00%及57.14%。供试品种仅有茎点霉叶斑与黑茎病的病情指数存在显著差异(P<0.05),表现为旱地与WL343HQ的病情指数显著高于皇冠、WL168HQ与阿迪娜等品种,而其他病害品种间未表现出差异(P>0.05)。根据抗性级别的频率分布,对于苜蓿茎点霉叶斑与黑茎病,53.13%的苜蓿品种为高抗品种,25.00%的苜蓿品种为抗性品种,12.50%的苜蓿品种为中抗品种,3.13%的苜蓿品种为低抗品种,6.25%的苜蓿品种为感病品种;对于苜蓿白粉病,32个品种的抗性分布频率为抗性品种占3.13%,中抗品种占25.00%,低抗品种占15.63%,感病品种占56.25%,无高抗品种;供试品种对苜蓿黄斑病抗性分布频率为高抗品种29个,占90.63%,抗性品种占9.38%,无中抗、低抗及感病品种。32个品种的5次草产量总和为22.48~29.52 t·hm^(-2),其中,5茬总产量最高的苜蓿品种为龙威3010,总产量最低的苜蓿品种为陇东苜蓿。供试的所有品种未出现明显冻害,越冬良好,越冬率均在80%以上,其中有22个品种大于90%。综合特性较好的5个品种为皇冠、WL363HQ、中苜3号、敖汉苜蓿和旱地(综合得分0.850~0.942),较差的品种为耐盐之星、WL343HQ、冲击波、雷霆与陇东苜蓿(综合得分0.650~0.721)。     

中药常山中常山碱超声提取工艺研究

采用稀盐酸溶剂和超声提取的组合方法从中药常山中分离常山碱,用紫外-可见分光光度计测定常山碱含量;以浸膏重量和常山碱含量作为评价指标,应用正交设计法考察提取温度、料液比和提取时间三个因素对常山碱提取率的影响。结果表明,常山碱超声提取最佳工艺：提取温度50℃,料液比1"5,提取时间1 h;在此条件下,浸膏重量为0．513 g,其中常山碱含量为0．453％,同比常山饮片中常山碱含量提高了40倍以上;三个因素对常山碱提取率的影响：提取温度＞料液比＞提取时间。说明常山碱采用超声提取工艺切实可行,具有省时、操作简便和提取率高等优点。     

猪源大肠埃希菌氯霉素类抗生素主要耐药基因的检测与分析

为查明辽宁地区猪源大肠埃希菌氯霉素类耐药菌株主要耐药基因的流行及分布情况,为猪大肠埃希菌病的防控提供科学依据,采用聚合酶链反应(PCR)对25株氯霉素类耐药菌株进行cat1、cmlA基因检测,并对cat1和cmlA基因进行序列分析。通过对耐药基因的检测发现,cat1、cmlA基因的检出率分别为32%和84%,8株同时检出cat1和cmlA基因。因此,在辽宁地区cmlA基因在猪源大肠埃希菌耐药菌株中普遍存在,cmlA介导的泵出机制是辽宁地区氯霉素类抗生素产生耐药性的主要原因;其次为cat1基因,与氯霉素乙酰转移酶的灭活有关。     

J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165 μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。     

猪鸡致病菌β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶检测与药敏试验

 对分离的猪鸡致病菌，分别进行了?－内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测，并用试管二倍稀释法测定了β－内酰胺环类抗生素或β－内酰胺环类抗生素与抑制剂舒巴坦联用对非产酶菌、产?－内酰胺酶菌、产ESBLs菌的抗菌活性。结果表明，43株分离菌的大多数可产生?－内酰胺酶，3株鸡志贺氏菌为ESBLs阳性菌株。30株分离产酶菌均对阿莫西林、氨苄西林耐药（MIC≥32 ?g/ml），16株非产酶菌（标准菌株及分离株）中的15株对阿莫西林、氨苄西林敏感，只有一株非产酶分离菌耐药。氨苄西林与舒巴坦以2∶1、4∶1配比联用时，其对分离产酶菌的MIC值分别降低10~40倍、10~20倍。临床致病菌对三代头孢均敏感，与舒巴坦以2∶1、4∶1配比联用时，三代头孢的MIC值不变。当头孢噻呋、头孢曲松与舒巴坦以2∶1配比联用时，其对产ESBLs菌的MIC值降低2～4倍。     

水体镉暴露对南方鲇仔鱼存活率的影响

以南方鲇Silurus meridionalis Chen初孵仔鱼、10日龄仔鱼为对象,采用水体染毒法进行急性镉暴露实验,研究了南方鲇仔鱼对镉暴露的耐受程度.初孵仔鱼实验设置一个对照组和5个镉处理组(0.04 mg/L,0.08 mg/L,0.16mg/L,0.32mg/L,0.64mg/L);10日龄仔鱼实验设置一个对照组和5个镉处理组(0.075mg/L,0.15mg/L,0.3mg/L,0.6mg/L,1.2mg/L).结果表明:随镉暴露质量浓度升高,初孵仔鱼存活率在暴露24h各组间差异不具有统计学意义(p0.05);暴露48h存活率仅在0.64mg/L组显著低于其余各组(p0.05);暴露72h,96h存活率在0.16mg/L,0.32mg/L和0.64mg/L组显著低于其余各组(p0.05).初孵仔鱼96hLC50为0.104mg/L,10日龄仔鱼96hLC50为0.039mg/L.镉暴露对10日龄仔鱼存活率的影响呈剂量依赖效应和时间依赖效应.与文献报道的多数鱼类相比,南方鲇仔鱼对镉暴露相对较敏感;而10日龄仔鱼对镉暴露的敏感程度高于初孵仔鱼.10日龄可能是南方鲇仔鱼发育受水体镉污染影响的瓶颈期,因此南方鲇生境水质保护工作应重点考虑到10日龄仔鱼的发育.