H5N1亚型禽流感病毒A/Guangxi/1/2005株抗药机制的研究

为研究H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的抗药机制,本研究选取Clade2.3.4亚群中一株对金刚烷胺敏感的人源AIV A/Guangxi/1/2005(H5N1)(S-GX05),用抗流感病毒药物金刚烷胺对其进行定向诱导,筛选出一株抗药性病毒株,命名为R-A/Guangxi/1/2005(R-GX05)。通过全基因测序并与S-GX05全基因序列进行对比,结果显示S-GX05只在其M2蛋白中有一个氨基酸位点发生突变,即A30P;抗药性鉴定这两株病毒的半数药物抑制浓度(IC50)分别为0.9μM和48.9μM,表明R-GX05对金刚烷胺表现出一定程度的抗性。动物实验证实,这两株病毒对BALB/c小鼠的致病性基本一致,均表现出高致病性,其MLD50分别为4.7 log10 EID50和5.0 log10 EID50,两株病毒在小鼠体内各组织脏器中的分布及增殖能力也基本相同。这些结果表明,S-GX05在药物压力下产生抗药性后,并未引起其它生物学特性的改变。A30P的发现为进一步从分子水平上研究H5N1亚型AIV的抗药机制及新型抗流感新药的研发奠定了基础。     

无氮日粮法与绝食法测定肉仔鸡内源氨基酸损失量的研究

本试验分别用无氮日粮法和绝食法测定肉仔鸡内源氨基酸损失量,并比较两种方法得到的结果之间的差异.选用49日龄健康的AA肉仔鸡公鸡20只,随机分成2组,每组10只,采用48 h空腹+48 h全收粪法进行试验.结果表明,无氮日粮法和绝食法测定的肉仔鸡内源氨基酸中,精氨酸、苏氨酸、胱氨酸、酪氨酸内源损失量之间无显著性差异(P＞0.05);无氮日粮法测定的其他氨基酸内源损失量极显著(P＜0.01)或显著(P＜0.05)高于绝食法;无氮日粮法测定的总氨基酸内源损失量极显著(P＜0.01)高于绝食法.     

甘肃中部地区秋播小黑麦套作式复种甜高粱的效应及品质研究

为探索适宜于甘肃省中部地区的秋播小黑麦复种甜高粱技术,于2017-2018年在甘肃省兰州市开展了以前茬作物秋播小黑麦(甘农2号小黑麦)的种植方式为主区,小黑麦→甜高粱跨年复种方式为副区,甜高粱品种(大奖1000、大奖505)为副副区的3因素裂区试验.试验中测定秋播小黑麦株高、枝条数、草产量及营养指标,甜高粱的株高、叶片数、叶长、叶宽、茎粗、草产量及营养等相关指标,并进行分析.结果表明:甘肃中部地区小黑麦复种甜高粱最佳复种方式为秋季甘农2号小黑麦种植3行留30 cm,翌年夏季空行间套作式复种1行甜高粱大奖1000,小黑麦和甜高粱分别于开花期和抽穗期收获,全年总鲜、干草产量分别可达136.52、38.52 t·hm-2.     

柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建

在无RNase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA,采用Oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用Phage Maker extract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆E. tenella3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了E. tenella孢子化卵囊子孢子的cDNA文库,文库原始库容量约为4×106pfu/mL,插入片段约100~3000 bp,扩增得到特定的E. tenella3-1E基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效的工具。     

鹅副粘病毒病油乳剂灭活苗的研究

鹅副粘病毒病是1997年本组王永坤等首先发现的一种新的鹅烈性传染病，发病率和死亡率分别达27.7%和18.2%。为了控制该病的流行传播，本课题组在研究该病的病原特性和防制方法的基础上，尽快研制了油乳灭活疫苗。从该疫苗的免疫结果观察，疫苗在免疫后第七天即可产生抗体（平均为2^3.9)，15天达到2^6.7，30天可达到2^8.8；从免疫保护试验看，免疫后15天，用强毒攻击，免疫组全部保护，而对照组5只鹅全部发病，3只死亡。从区域性中试调查结果来看，该苗安全、有效，能较好地控制该病的流行。     

适应无血清培养的HEK293细胞系的培育

为培育适合腺病毒增殖的无血清培养细胞系,本研究采用培养液渐进替换的方法获得了一株适应无血清培养的HEK293细胞(293SF),经检测293SF细胞具有稳定的支持腺病毒增殖与表达外源蛋白的能力;平均病变时间为97 h,比HEK293细胞缩短12.9%;毒价达到107.48TCID50/mL,比HEK293细胞提高43.3%;并且稳定性良好,连续传16代后293SF细胞状态与易感性未发生变化。该细胞系为腺病毒的无血清培养奠定基础。     

用RAPD标记分析高羊茅的遗传多样性

采用RAPD分子标记技术对从国外引进的15个高羊茅品种的遗传多样性进行了研究。从60个随机引物中筛选出12个有效引物,它们共扩增出85条DNA带,其中59条为多态性带,占69.41%,平均每个引物扩增出多态性带4.92条;利用NTSYS-PC软件计算出的不同品种间Jaccard遗传相似系数(GS)变化范围较大,为0.373~0.932;根据得到的遗传相似性矩阵进行非加权组法(UPGMA)聚类分析,建立高羊茅品种的分子系统树状图;以相似系数0.68为标准,可将所有品种分为3类,品种翠丽和贝克各自聚为一类,其余13个品种聚成一类。     

黄淮海高蛋白夏大豆新品种适宜种植密度研究

为明确黄淮海地区高蛋白夏大豆新品种最佳种植密度,为其推广利用提供理论依据,本研究以高蛋白夏大豆新品种圣豆18、圣豆24、菏豆37和菏豆38为供试材料,分析单株和群体农艺性状、籽粒品质、产量及产量构成因素对不同种植密度的响应.结果 表明:4个高蛋白夏大豆新品种株高、底荚高随密度增大均逐渐增大,单株有效荚数、单株粒数、根干...     

外泌体中miRNA与糖尿病发生发展关系研究进展

糖尿病是一种血糖异常升高的慢性代谢性疾病。各器官之间的沟通协调是维持葡萄糖稳态的核心,了解器官之间的相互沟通协调方式能够更好地了解糖尿病发生机制,并找到更精确的防治靶点。最近研究表明,外泌体(Exos)中的miRNA可以在基因水平上实现细胞间的信息交流,从而调节不同组织中的基因表达,参与糖尿病的发生发展。还可为糖尿病患者的早期诊断提供新的生物标志物,从而有助于采取及时有效的治疗措施,并将有助于更加深入地了解糖尿病的疾病发生机制。论文对近几年有关糖尿病与外泌体中相关miRNA的研究进行总结,以帮助更好地了解外泌体中的miRNA在糖尿病发生发展中的确切作用。