石榴皮多酚组成分析及其抗氧化活性

 【目的】分析和研究石榴皮多酚的组成及其抗氧化活性。【方法】采用HPLC法分析石榴皮多酚提取物的组成及含量;采用体外抗氧化活性法测定多酚的还原能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力、DPPH?自由基清除能力和抗脂质过氧化能力;利用灌胃法研究石榴皮多酚提取物对小白鼠的血液、肝脏和脑组织中抗氧化指标的影响,评价其体内抗氧化活性。【结果】从石榴皮多酚提取物中鉴定出了9种多酚类成分,其中主要成分为安石榴苷,其含量占石榴皮总酚含量的65.75%。体外抗氧化活性试验表明,石榴皮多酚具有较强的还原能力、自由基清除能力和抗脂质过氧化能力。体内试验表明,石榴皮多酚能提高小鼠血液、肝脏及脑组织中 SOD活性和小鼠血液、肝脏中CAT、GSH-Px活性,降低小鼠血液、肝脏及脑组织中MDA含量,表明石榴皮多酚具有提高体内抗氧化酶系统的活性,从而增强机体抗氧化能力。【结论】石榴皮多酚含量丰富,其主要成分为安石榴苷,具有较强的抗氧化生物活性,是具有良好开发前景的天然抗氧化剂和保健食品及生物药品基料。     

王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）工蜂幼虫发育期蛋白质组分析

 【目的】20世纪90年代中国成功培育出的王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）是当今世界最优良的蜂种,使中国的王浆年产量高达2 600多吨,占世界总产量的90%以上,稳居世界第一,通过对该蜂种不同发育日龄工蜂幼虫的蛋白质组进行研究,以探明其发育机理。【方法】采用双向电泳法对王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）不同发育期的工蜂幼虫进行蛋白质组研究。【结果】在幼虫期6 d的发育过程中,2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别检测到了262、418、194个蛋白点。这些蛋白的分子量在12.2～88.2 kD的较大范围之间,等电点在pH 4.00～9.24之间。有84个蛋白在幼虫期整个发育过程中均有表达,其中33%呈上调趋势,21%呈下调趋势,46%蛋白的表达没有规律。2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别有88、209、63个特异表达的蛋白。除此之外,有84个蛋白在幼虫发育的6日龄表达关闭,而在2日龄和4日龄幼虫中表达;有41个蛋白在2日龄表达关闭,而在4日龄和6日龄中表达;仅有6个蛋白在4龄日表达关闭,而在2日龄和6日龄表达。【结论】幼虫的发育过程有大量基因参与表达和调控,是一个复杂而动态有序的过程,且发育到4日龄的幼虫蛋白表达最为活跃。幼虫整个发育过程中的共有蛋白是发育必需的保守蛋白。幼虫不同的发育阶段由不同的特异蛋白进行调控。     

王浆高产蜜蜂(A.m.ligustica)与喀尼鄂拉蜂(A.m.carnica)幼虫期蛋白质组比较

【目的】对王浆高产蜜蜂(A. m. ligustica,浆蜂）与喀尼鄂拉蜂(A. m. carnica,喀蜂）工蜂幼虫期进行蛋白质组比较,以探明两蜂种幼虫期不同日龄蛋白质表达调控方面的异同。【方法】采用双向电泳对浆蜂与喀蜂工蜂幼虫期蛋白质组进行研究。【结果】在幼虫期2日龄,浆蜂的蛋白表达谱为283个蛋白,喀蜂为152个蛋白,两蜂种共有蛋白点为110个,其中24个点浆蜂表达量显著大于喀蜂,15个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为173个,而喀蜂特异蛋白为42个;幼虫4日龄时,浆蜂总蛋白点数为290个,喀蜂总蛋白点数为240个蛋白,两蜂种共有蛋白点为163个,其中24个点浆蜂表达量显著大于喀蜂,15个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为126个,喀蜂特异蛋白为77个;到达幼虫6日龄时,浆蜂蛋白组含236个蛋白,喀蜂蛋白质组含180个蛋白,两蜂种共有蛋白点为132个,其中22个点显示浆蜂表达量显著大于喀蜂,11个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为104个,喀蜂特异蛋白为48个。【结论】在蜜蜂幼虫期浆蜂较喀蜂表达的蛋白总数和特有蛋白多,说明浆蜂较喀蜂幼虫的基因表达和代谢更加旺盛。在2蜂种幼虫期表达的共有蛋白中,其中一些蛋白的表达量存在差异,而2蜂种在3个日龄所表达的特有蛋白的数和量也存在一定差异,这些说明幼虫发育需要管家蛋白和不同发育阶段相应的特定蛋白来调控,但管家蛋白和特有蛋白在2蜂种的表达模式存在差异。     

基质固相分散-气相色谱法测定苹果中的多种农药残留

 【目的】研究适合苹果中35种有机磷、有机氯及拟除虫菊酯类农药的多残留快速检测方法。【方法】通过对35种农药的色谱条件试验、基质固相分散（MSPD）材料的选择及其与样品的比例试验、洗脱条件试验以及加标回收率试验,建立和优化35种农药的MSPD-GC多残留分析方法。【结果】MSPD-GC-FPD法对苹果样品中16种有机磷农药回收率为79.67%～104.68%,变异系数≤4.15%,方法的最低检出限为0.0032～0.010 mg•kg-1;MSPD-GC-ECD法对苹果中19种有机氯和菊酯类农药的回收率为78.6%～103.4%,变异系数≤4.06%,方法的最低检出限为0.000098～0.007 mg•kg-1。对苹果中上述35种农药的最低检出限均低于国内及国际上对苹果中农药残留的MRL值。【结论】基质固相分散-气相色谱方法简便、快速、准确、灵敏、节省样品和有机溶剂,可满足苹果中多种常见农药残留同时检测的实际需要。     

温度赤霉素对晚香玉的花期调控

在温室通过不同温度,赤霉素对种球的处理和分批栽植来调控晚香玉发芽和开花。结果表明：10月份的低温处理使晚香玉种球发芽率达60%以上,低温和赤霉素处理均能提高晚香玉单瓣品种的开花率;40mg/L赤霉素处理也可显著提高重瓣品种的发芽率,11月和12月栽种的种球以低温 高温和低温 高温 GA3（2）处理组合的发牙率高,达82%以上,但赤霉素处理无影响;开花率以低温 高温、GA3处理组合最高,综合分析认为;重瓣品种种球的早期赤霉素处理可有效提高种球发芽率,但降低开花率;低温和高温处理则可有效地提高其种球发芽率和开花率。     

草木樨愈伤组织的诱导和芽的再生

为了建立草木樨的高效再生体系和基因转化体系,以黑龙江草木樨为材料,用MS、1/2MS为基本培养基,添加不同种类和浓度的植物激素,对草木樨的愈伤组织培养和绿色芽点培养进行了研究。结果表明,诱导其愈伤组织的培养基以MS 2,4-D 1.0 mg.L-1 KT 0.3 mg.L-1为最好,愈伤组织的形成率可达90%;诱导绿色芽点的培养基以MS 2,4-D 0.2 mg.L-1 6-BA 1.0～1.5 mg.L-1为最好,芽点形成率可达45%。最后,将再生芽转入生根培养基1/2 MS IAA 0.5 mg.L-1上,生根率可达100%。     

王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.)卵期发育蛋白质组分析

 【目的】对中国特有王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.)工蜂的3 d卵期进行蛋白质组研究，以探明该蜂种卵期不同发育阶段蛋白质表达调控方面的一些特点。【方法】采用双向电泳法对王浆高产蜜蜂工蜂卵期蛋白质组进行研究。【结果】卵期发育的3 d中，按顺序分别检测到160个、195个、176个蛋白，这些蛋白的分子量在17～80 kD之间，等电点范围在4.00～8.40之间。其中44个蛋白在３ d的卵期中均有表达，36%的共有蛋白随卵期发育呈上调趋势，而14%的共有蛋白随卵期发育呈下调趋势，另有39%的共有蛋白表达量在2日龄达到顶峰。结果还显示每天分别有89个、77个和80个特异的蛋白表达。除共有及特有蛋白外，还有24个蛋白在1日龄和2日龄表达而在3日龄关闭；49个蛋白在2日龄和3日龄表达而在1日龄关闭；仅有3个蛋白斑点是在2日龄关闭，而在1日龄和3日龄表达。【结论】卵期发育是一个动态有序的基因调控与表达过程，且发育第2天的卵蛋白表达最活跃；卵期3 d中共有的表达显示这些蛋白是调控王浆高产蜜蜂卵期发育必需的保守蛋白；不同阶段表达的特异性蛋白说明不同发育阶段的卵需要特异的蛋白来调控。     

含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建

采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMD18-T载体,分别得到重组载体pUC119-P1-2A和pMD18-T-3C;将重组载体pUC119-P1-2A用HindⅢ、BamHⅠ酶切,重组载体pMD18-T-3C用BamHⅠ、NheⅠ酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamHⅠ酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMD18-T-P1-2A-3C.将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C.     

用于农药残留检测的大豆酯酶的纯化分离

以大豆种子为原料探索农药残留检测用酯酶的新酶原.采用差素离心、硫酸铵盐析、DEAE-32离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析等方法对大豆酯酶进行了纯化分离,并研究了纯化酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性.最终得到3种电泳纯的大豆酯酶,记为E1,E2和E3.但3种大豆酯酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性不同,E1对农药没有敏感性,E2的敏感性比E3好.因此,大豆酯酶E2可作为农药残留检测的新酶原.     

天然化合物防治茄科青枯劳尔氏菌研究进展

由青枯劳尔氏菌引起的茄科植物萎调病严重危害了农业生产,造成了巨大的经济损失。利用环境友好型天然化合物抑制青枯劳尔氏菌增殖,受到了科研工作者的广泛关注。本文围绕近年来有关天然化合物抑制青枯劳尔氏菌增殖的最新研究,从来源角度出发,探究了植物、动物来源的抑菌天然化合物对青枯劳尔氏菌的抑制机理及现状,以期为青枯劳尔氏菌的防治提供新思路,具有广泛的社会和经济价值。