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161.
根据文库载体序列与原组织蛋白酶表达序列标签(EST)设计引物,以大片吸虫cDNA文库为模板,进行Touchdown PCR与梯度PCR相结合的扩增反应,扩增产物克隆人pMD18-T载体。经鉴定后测序,并采用生物信息学技术对序列进行开放阅读框(ORF)、编码氨基酸序列、蛋白质同源性比较、二级、三级结构等分析;结果所获序列全长990bp,编码330个氨基酸,分子量36771.2u,等电点5.44;具有较明显的螺旋、片层和无规卷曲等二级结构,α螺旋占17.3%,β折叠占27.0%,无规卷曲占55.8%;具有2个较明显的跨膜区和2个疏水区,未发现明显的信号肽和糖基化位点;氨基酸序列同源性比对显示其属于半胱氨酸家族;三级结构同源建模预测显示其与组织蛋白酶K(PDB number 2f7dA)有49%的一致性。 相似文献
162.
RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆人pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15d血清抗体即为阳性,30d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。 相似文献
163.
回顾了光照、温度、土壤水分和CO2浓度对高寒草甸植物水分利用效率的影响等方面的研究进展.由于高寒地区太阳辐射强,高寒草甸植物光合作用时间长,光饱和点高,植物光合作用明显表现出对低温的适应性;而适度地提高温度,植物水分利用效率增大;水分胁迫对光合作用的影响可以分为气孔限制和非气孔限制,同时水分胁迫对不同植物水分利用效率的影响不同;高寒草甸植物比低海拔地区植物利用CO2更有效,提高CO2浓度,植物水分利用效率增大.高寒草甸植物水分利用效率研究对于合理构建和恢复高寒草甸生态系统具有重要意义. 相似文献
164.
165.
复方中草药添加剂对热应激下奶牛生产性能、生理和生化指标的影响研究 总被引:1,自引:0,他引:1
试验按产奶量、胎次、泌乳时间和体况评分相近的原则选取40头健康荷斯坦奶牛,随机分为对照组、试验Ⅰ组(中草药)、试验Ⅱ组(中草药+缓冲剂)、试验Ⅲ组(中草药+益生菌)和试验Ⅳ组(中草药+γ-氨基丁酸),测定热应激期生产性能、生理和血液生化指标的变化,探讨复方中草药添加剂对奶牛热应激的影响及其机理。试验结果显示:(1)平均产奶量,Ⅳ组〉Ⅲ组〉Ⅰ组〉Ⅱ组〉对照组,其中Ⅳ组和Ⅲ组分别比对照组提高1.28kg/d和1.25kg/d(P〈0.05);(2)各组间乳成分无明显变化;(3)生理指标方面,试验各组直肠温度和呼吸频率均略低于对照组(P〉0.05);(4)试验各组三碘甲腺原氨酸(T3)浓度均高于对照组,其中试验Ⅱ组比对照组高37.33%(P〈0.05);甲状腺素(T4)浓度,除试验Ⅲ组有所降低外,Ⅱ组和Ⅰ组均比对照组高(P〉0.05);试验组皮质醇(Cot)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和白细胞介素-2(IL-2)均略低于对照组;血清中肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)和谷草转氨酶(AST)含量均低于对照组,其中试验Ⅲ组AST含量比对照组低21.34%(P〈0.05);谷丙转氨酶(ALT)含量均高于对照组。由此可见,复方中草药添加剂具有缓解奶牛热应激症状、改善机体代谢、调节内分泌和免疫水平的作用;就提高生产性能而言,以中草药+益生菌和中草药+γ-氨基丁酸两组配方的效果最佳。 相似文献
166.
利用花粉管通道法将盐生植物红树总DNA导入紫花苜蓿,共导入1 391朵花,获得894粒T0代转化种子。T0代种子种植在含有225 mmol/L NaCl的MS培养基上,获得12株耐盐性强的植株。以供体和受体为对照,对12株耐盐植株进行RAPD分析,在55条随机引物中有8条扩增出稳定、清晰的条带,条带的差异性表现为新增条带、供体特异条带和受体条带丢失。以上结果初步证实外源DNA已经整合到受体的基因组中,而且T0代植株耐盐能力提高可能与外源基因的导入有关。 相似文献
167.
选取18月龄的健康五龙鹅24只,随机分为4个组,每组6个重复.各试验组日粮添加的羊草粉含量分别为12.70%、16.70%、21.00%、25.80%,采用全收粪法进行消化代谢试验,检测饲料和粪便中的多种营养成分,确定其消化率.结果表明:在代谢能(ME)和粗蛋白(CP)等摄入量一致的条件下,随着羊草粉添加水平的提高,CF的消化率为13.00%~18.40%,中性洗涤纤维(NDF)14.10%~21.47%,酸性洗涤纤维(ADF)15.40%~22.29%;组间净蛋白利用率(NPU)及氮(N)的沉积量差异不显著(P>0.05),粪中氨态氮(N<,3>-N)浓度显著下降(P<0.05),各种氨基酸表观消化率(AAAD)较高(77.30%~91.78%);P的表观消化率各组间差异不显著(P>0.05),而Ca的表观消化率呈递减趋势(P<0.05);AKP活性与CF、NDF和ADF的消化率呈显著负相关(P<0.05),与Ca、蛋氨酸(Met)、胱氨酸(Cys)消化率呈显著正相关(P<0.05)ACP活性与Ca、P表现消化率呈显著正相关(P<0.05);其它四种酶的活性与CF、NDF、ADF消化率,Ca、P、Met、Cys表观消化率相关不显著. 相似文献
168.
169.
170.