伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

青藏高原东缘中国沙棘的克隆多样性及克隆结构

应用随机扩增多态性DNA标记(RAPD markers)对青藏高原东缘中国沙棘的克隆结构、克隆多样性进行了初步的探讨。结果表明,1) 14条RAPD引物在8个中国沙棘居群共184个样本中平均形成55.75种条带,平均有15.13种条带在居群内表现出多态性,平均多态条带百分率为27.64%;鉴别出26种基因型,平均每基株形成3.4个分株;2)与应用DNA分子标记研究的其他克隆繁殖能力较强的植物相比,中国沙棘的克隆多样性水平偏低,Simpson’s多样性指数(D)平均值为0.85;Fager’s均匀度指数(E)平均值为0.87;3)克隆结构分析表明,中国沙棘每克隆内分株间的平均距离为1.75 m,克隆繁殖的生长型主要为游击型,并且在居群内存在以某一优势基株为主的克隆分布方式;4) 居群的定居时间、生境及群落结构等对中国沙棘的克隆多样性有一定影响。     

小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列的克隆及序列分析

本研究对军事兽医研究所病毒二室分离驯化后的小熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)基因组进行全序列测定,并对其基因组特征及H基因遗传稳定性进行比较分析。根据GenBank公布的犬瘟热病毒全长基因组序列设计合成17对特异性引物,以小熊猫源犬瘟热病毒总RNA为模板,RT-PCR进行分段扩增,并克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经测序、拼接获得全长cDNA序列。结果显示,小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列与GenBank登录号分别为AF014953、AY445077、AY542312、AY466011、AY386316、AF164967、EU716337、EU726268、AY443350、AB474397、GU138403和AY649446的12个不同毒株全基因序列的同源性分别为86.6%、92.4%、92.5%、92.5%、94.3%、96.3%、95.9%、87.1%、94.5%、92.3%、87.4%和94.6%,与标准强毒株A75/17株(AF164967)的亲缘关系最近,全基因同源性达96.3%,但与疫苗株Onderstepoort(AF014953)亲缘关系相对较远,同源性为86.6%。小熊猫源犬瘟热病毒H基因与其他不同地区具有代表性的30株CDV进化树分析显示,小熊猫源犬瘟热病毒属于Asia Ⅰ型,H蛋白中309－311位氨基酸残基所形成的潜在糖基化位点,为疫苗株没有而野毒株所共有的,并且可能与病毒的免疫原性有关。因此,致弱的小熊猫源CDV在预防免疫的针对性上可能强于已有的疫苗株。     

对3个桑品种生理生态特征的比较研究

研究了湖桑32号、农桑14号和丰田2号等3个桑树品种的光合特征及叶绿素的部分参数。3个品种的光补偿点为3.58～50.10μmol/(m2.s),表观量子效率为0.022～0.051,湖桑32号>农桑14号>丰田2号;光饱和点为1 436.78～1 571.43μmol/(m2.s),丰田2号>农桑14号>湖桑32号;CO2补偿点为62.87～103.40μmol/mol,CO2饱和点为921.88～1 055.56μmol/mol,其中,湖桑32号的CO2补偿点和饱和点、羧化效率及二磷酸核酮糖羧化酶的最大再生速率(Pmax)均较显著高于其它两个品种;叶绿素相对含量丰田2号>农桑14号>湖桑32号,表明丰田2号单位叶面叶绿体数量较多,具有相对较大的光合潜力;光化学效率和光合电子传递效率分别为0.746 2～0.801 8、1.58～3.43,其中丰田2号的叶绿素荧光参数值显著高于其它2个品种,具有一定光适应和抗逆性能力。     

禽流感H9亚型病毒WD株毒种的纯化研究

采用鸡胚终点稀释法并结合ND抗血清中和法对禽流感H9亚型病毒WD株毒种进行了纯化。将纯化的WD株毒种在SPF鸡胚连续传12代，对各代次毒种进行了毒价测定，选择一定代次的毒种进行了免疫原性试验及外源病毒检验。结果表明，WD株在鸡胚中连续传12代，其HA价稳定在1：512—1：1024，毒价在10^7.0-10^8.3 EID50／0．1mL；不同代次毒种不含外源病毒，免疫原性均符合要求。由此可见，毒种的纯化方法是有效的，将WD株毒种限制在12代内是可行的，并建立了该毒种的种子批。     

新生仔猪赖氨酸的需要量研究

本试验旨在研究不同日粮赖氨酸水平对新生仔猪生长性能、氮利用及体沉积的影响,探讨新生仔猪赖氨酸的需要量.选取4日龄、平均体重为(1-90±0.05)kg的杜×长×大三元杂新生仔猪46头,其中40头按窝别和体重分成5组,每组4个重复,每个重复2头猪,另外6头在试验开始时屠宰,测定体成分;各组日粮赖氨酸水平分别为1.27%(对照组)、1.37%、1.47%、1.57%及1.67%,饲养至21日龄.结果表明:1)1.47%～1.67%组仔猪21日龄体重、15～21日龄及4～21日龄平均日增重显著高于对照组(P<0.05),以1.57%组平均日增重最大.1.57%组和1.67%组在15～21日龄及4～21日龄的平均日采食量显著高于对照组(P<0.05).1.37%～1.67%组的仔猪料重比均显著低于对照组(P<0.05).2)1.47%～1.67%组仔猪氮的生物学价值显著高于1.27%～1.37%组(P<0.05).3)日粮赖氨酸水平未显著影响能量和脂肪沉积(P>0.05);随日粮赖氨酸水平的提高,蛋白质的每日沉积量增加,147%~1.67%组显著高于1.27%～1.37%组(P<0.05),以1.67%组最大.综合各项测定指标得出,4～21日龄仔猪日粮赖氨酸适宜水平为1.57%,即赖氨酸含量为73.1 g/kg CP或0.85 g/MJ DE;仔猪每日赖氨酸需要量为2.43 g/d.     

贵州喀斯特地区牧草引种试验评价

对国内外引进的6个禾本科牧草品种,9个豆科牧草品种以及喀斯特地区的4个对照品种,在贵州独山地区进行引种试验。结果表明：各参试品种生长良好,能安全越冬、越夏,一年可刈割5～6次,鲜草产量达36558．2～66450．0kg／hm2,干草产量10771．0～19869．0kg／hm2。综合性状表现较好的依次为鸭茅Totter,Wana,Tuoa;多年生黑麦草Nui,Bronsys;白三叶Alice,C6151,Prop,Pitua,Sustain;百脉根Mareb,Lel。     

Epidemiological Cut-off Values (ECOFFs) of Salmonella from Chicken Intestinal Tract for Three Animal-specific Antibiotics

In order to establish epidemiological cut-off values (ECOFFs) of Salmonella for three animal-specific antibiotics (florfenicol,apramycin and danofloxacin) in Guangdong province.A total of 166 strains of Salmonella isolates from chicken intestinal tract from veterinary clinics and farms in Guangdong province in 2017 were recruited in this study,the minimum inhibitory concentrations (MIC) of florfenicol,apramycin and danofloxacin were determined in triplicate for each bacterial strain using the agar dilution method on Mueller-Hinton agar plates according to the CLSI reference method (CLSI-M100-S26).ECOFFs were calculated for the MIC data sets by application of nonlinear regression analysis,NRI(normalized resistance interpretation) and ECOFFinder software.MIC distribution of florfenicol,apramycin and danofloxacin against Salmonella from 2 to >512,4 to >512 and 0.015 to 64 μg/mL,respectively.MIC₅₀ and MIC₉₀ for apramycin,florfenicol and danofloxacin were 256 and >512,16 and >512,0.5 and 16 μg/mL,respectively.MIC distribution of apramycin and florfenicol presented obvious unimodal shape,while that of danofloxacin was a discontinuous multi-peak.The ECOFFs of florfenicol,apramycin and danofloxacin were recommended to be 16,16 and 0.125 μg/mL,respectively.In present study,the ECOFFs of Salmonella from chicken intestinal tract for apramycin,florfenicol and danofloxacin were determined,which provided scientific basis for resistance surveillance.     

法国番鸭与普通家鸭肉用性能对比测定

本试验就法国番鸭CR51、樱桃谷系大型肉鸭和成都麻鸭，分别进行屠宰测定、肉质氨基酸测定和胸肌营养物质测定。结果表明：法国番鸭活体重、屠宰率、胸肌率及胸肌氨基酸含量普遍高于大型肉鸭和成都麻鸭，营养价值较高。     

湟源县青海半细毛羊四项血清钙指标的测定

对湟源县78只青海半细毛羊的四项血清钙指标进行了测定.结果为,血清总钙2.79 mmoL/L±0.18 mmoL/L;血清游离钙1.08 mmoL/L±0.11 mmoL/L;血清结合钙1.71 mmoL/L±0.11 mmoL/L;游离钙百分率38.82%±6.22%.公(羯)、母羊血清钙指标之间差异不显著.