猪圆环病毒2型Rep蛋白ELISA抗体检测方法的建立

为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化.采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法.结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1h和30 min.该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4％,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测.     

Kiss-1基因功能的研究进展

Kiss-1基因编码的Kisspeptins可通过其受体GPR54的介导来调控哺乳动物生殖内分泌。近年来的研究表明,Kiss-1基因具有抑制肿瘤转移、影响滋养细胞浸润、启动动物青春发育、调控能量平衡以及生物节律的功能。因此,本文就Kiss-1基因功能的研究进展做一综述。     

新疆绵羊致病株李斯特杆菌分离与鉴定

本研究采用生化反应，溶血试验，致病力试验，PCR方法对分离的新疆5株绵羊致病株李斯特杆菌90SB1，90SB2，90SB5，90SS1，125SL进行了种型的鉴别测定，并用RAPD技术对这5株李斯特杆菌及标准株李斯特杆菌进行分型。试验结果，五株绵羊致病株（野毒株），在生化反应，培养特性，溶血性，致病性及溶血素基因特异性等方面表现高度的一致性，属于同一种LM。RAPD实验表明此5株LM指纹图谱相同，属于同一个型。此5株致病性LM与标准LM对照株（从食品中分离到）指纹图谱差异显著，属于不同型。     

我国南方猪高热病的研究(Ⅰ)——大肠杆菌的分离、鉴定和致病性测定

从湖南3个高热病发病猪场11头病死猪的病料组织中均分离出了大肠杆菌,经血清学鉴定,鞭毛抗原(K88、K99、987P和F41)全为阴性反应。经过157种菌体抗原血清学检测,血清型为5、6、15、22、32和83型。药物敏感试验结果表明,分离的大肠杆菌对大多数常用药物耐药,对氟喹诺酮和头孢类药物敏感。将其中4头猪原代分离的大肠菌培养物以原倍(2×107个/mL)、104和108稀释的菌液分别感染18~22 g小白鼠,原倍菌液感染的小白鼠12/30在感染后24 h内出现死亡,而104和108稀释菌液感染的小白鼠均健活;将未经除菌的病死猪组织悬液、过滤除菌的组织悬液、大肠杆菌、过滤除菌的组织悬液及大肠杆菌分别感染30日龄左右的健康小猪,除未经除菌的组织悬液感染猪3/3发病,2/3死亡外,其余所有感染猪只出现体温升高,升幅达1~2℃,减食,精神萎靡,但没有死亡;将死亡猪再次分离到的大肠杆菌感染小白鼠和猪,小白鼠12/15出现死亡,感染猪只出现体温升高(超过1℃),没有出现死亡。结果证明:大肠杆菌在高热病的发病过程中只起协同诱发作用,引起猪发病死亡的真正原因可能是病毒感染。     

秋蚕五龄期条桑斜面育技术及应用前景

5龄蚕饲养花工多且用工集中．约占整个蚕期的85％以上,传统多层片叶平面育,5龄蚕期间每个劳力一般只能承担1张种,还得起早带晚,费工费力。为了解决这一难题,根据蚕生理发育特点,海安县在改进提高春蚕5龄期新梢斜面育的基础上,着力试验研究秋蚕5龄期条桑斜面育技术。经过不断的探索和改进,形成了较为配套的操作技术规范,实现了秋蚕5龄期不采片叶,直接剪伐条桑,利用条桑搭成斜面养蚕,简称秋蚕5龄期条桑斜面育。     

牛消化道Ⅰ型肽载体克隆测序及编码蛋白结构分析

从牛瓣胃上皮提取RNA,根据已知的人、鼠、兔、羊PepT1序列设计引物,PCR扩增目的片段cDNA,扩增产物经纯化、克隆后测序.克隆测序片段为1566 bp(DQ309694),与其它动物已知PepT1序列比对,发现该片段位于第3～10跨膜结构域之间.牛测定序列与人、鼠、兔、羊、狗、鸡和猪PepT1相应片段核苷酸序列同源性分别为82.89%、80.14%、78.93%、96.04%、83.08%、63.90%和85.66%,相应片段氨基酸序列同源性分别为81.45%,79.62%、76.25%、94.06%、81.49%、61.41%和83.56%.对8种动物(牛、人、鼠、兔、羊、狗、鸡、猪)测序片段内氨基酸序列同源性分析表明,PepT1是高度保守的蛋白,其中跨膜结构域的氨基酸序列保守性高于膜外环.8种动物PepTl测序片段内各跨膜结构域的氨基酸序列同源性均在90%以上,第3、4、 5 6、7,8,9和10跨膜结构域的氨基酸序列同源性分别为90.97%、91.07%、97.62%、93.45%、94.05%、91.67%、91.45%和95.83%.8种动物测序片段内膜外环的氨基酸序列同源性在70%～99%之间,以第4-5跨膜结构域之间膜外环的同源性最高,9-10跨膜结构域之间膜外环的同源性最低,3-4、4-5、5-6,6-7、7-8、8-9、9-10跨膜结构域之间膜外环的氨基酸序列同源性分别为77.63%、98.86%、86.72%、90.13%、91.25%、88.33%和71.74%.9-10结构域之间是1个位于细胞外的大膜外环,可能对底物的识别有重要作用,牛在此区域与鸡相同区域的氨基酸序列同源性仅为29.3%,与大鼠,狗、人、兔、猪和羊相应序列的同源性依次为65.17%、71.64%、67.16%、60.20%、73.13%和88.56%.对测序BPepT1片段编码蛋白的糖基化和磷酸化位点分析表明,测序片段编码蛋白共有6个N-糖基化位点和3个蛋白激酶C依赖性(PKC)磷酸化位点.     

根据药代动力学模型估计在猪饲料中添加三聚氰胺后停药时间

实验通过建立鼠的三聚氰胺动力学模型(PBPK),拓展出猪的PBPK模型,从而确定适当的停药时间。结果表明:鼠模型低估了血浆中三聚氰胺的浓度,但更有效地估计了组织残留,而猪模型在早期测量时间点也有预测不足,但在后面的时间点上有很高的准确性。这些时间点直接关系到停药时间的预测。猪模型中,一次口服三聚氰胺浓度为3.0mg/kg和5.12mg/kg饲料后,依据肾残留量估计其停药时间分别为19.2h和20.9h;用慢性口服实验(饲料中三聚氰胺的浓度为3.0mg/kg和5.12mg/kg,2次/d,持续7d)估计停药时间分别为20h和21.3。h这种PBPK模型可以拓展到不同物种和多种饲喂模式,并为解决在偶然情况下动物饲料中出现少量污染问题而提供依据,确保食物的供给安全。     

紫花苜蓿花粉活力和柱头可授性的研究

紫花苜蓿Medicago sativa是世界农牧业发展中极为重要的一种豆科牧草。以昆明地区引进3个苜蓿品种和德钦野生苜蓿为研究材料,对其不同部位的花粉活力、花粉数量和柱头可授性进行了研究。结果表明：不同品种和同品种不同部位的花粉活力差异较大,但基本表现为Acrora高于其他苜蓿品种,同品种苜蓿基本表现为中部和下部显著高于上部（P＜0.05）;花粉数量变化差异也较大,基本表现为CW1351苜蓿高于其他苜蓿品种;柱头可授性变化差异也较大,基本表现为德钦苜蓿显著高于其他苜蓿品种（P＜0.05）。     

五台山高山、亚高山草甸植物种分布的环境梯度分析和种组划分

通过野外植被调查,结合景观尺度生境因子的测定与模拟,运用CCA排序分析研究区内高山、亚高山草甸地段植物物种分布与环境因子之间的定量关系,综合TWINSPAN分类结果对五台山高寒草甸植物种进行了生态种组划分。结果表明：1)五台山的高山、亚高山草甸分布地段,温度和太阳辐射是控制着草甸植物种分布的关键因子;2)依据草甸物种在CCA排序图上的分布位置,划分出高山冷干型、高山冷湿型、亚高山典型种、亚高山凉干型、亚高山凉湿型、山地暖干型和山地暖湿型几类物种,可以较好地指示研究区的生境特征;3)TWINSPAN划分结果与CCA 划分的生态种组比较吻合。     

JX生物调理剂饲喂肉猪试验

供试肉猪78头,随机分为三组,对照组(空白)、试验1组(新霉素115mg/kg、喹乙醇100mg/kg、阿散酸100mg/kg)、试验2组(JX调理剂0.2%),试验结果表明:第一阶段:试验1、2期末重,分别比对照组高1.34kg、1.07kg(P<0.05),试验组间差异不显著(P>0.05);第二阶段:试验1组期末重,比对照组高2.65kg(P>0.05),试验2组期未重比对照组高3.23kg(P<0.05),试验组间差异不显著(P>0.05);试验组料肉比均低于对照组,试验2组最低,比对照组降低0.2,饲料转化效率提高8.97%;试验2组比对照组每头猪多盈利48.8元,比试验1组多盈利10.28元;粪便中氮、磷含量试验2组明显下降,药物残留试验2组、对照组没有检出,试验1组猪肝阳性3个加、肉中阳性1个加。