Prokaryotic Expression of Brucella BAB Gene and Establishment of iELISA

In this study,the genome of Brucella Rev.1 strain was used as a template to amplify the BAB gene sequence,clone it into the prokaryotic expression vector pET-30a(+),obtain the recombinant plasmid pET-30a-BAB,and perform prokaryotic expression on the recombinant plasmid.The indirect ELISA method was constructed by using the expression products detected by Western blotting.The results showed that the BAB gene was successfully cloned and expressed in this experiment,and the purified expression product was analyzed by SDS-PAGE.This study obtained a relatively pure recombinant BAB protein;Western blotting test showed that the expressed protein could react specifically with Brucella sheep positive serum and had good reactogenicity;Using the recombinant BAB protein as the coating antigen,an indirect ELISA method for detecting BAB antibodies was established and optimized.The best determined coating conditions were as follows BAB protein coating amount was 0.25 μg/mL,serum dilution was 1:400;blocking solution was 3% pig-derived gelatin;secondary antibody dilution was 1:6 000;color development time was 10 min.The established method was used to detect 40 clinical sheep serums,and the cut-off value was calculated to be 0.607.That was,when the serum tested had P/N ≥ 1.5 and D_{450 nm} ≥ 0.607,it was judged as positive,when D_{450 nm} ≤ 0.561,it was judged as negative,and when 0.607<D_{450 nm}<0.561,it was judged as a suspect value,and retest was required.Compared with the Huhong plate test and the test tube agglutination test,the positive coincidence rate was 100%,the negative coincidence rate was 71.88%,and the total coincidence rate was 77.5%.     

提高农民信息网络意识推动农业信息化建设

本文通过对农村信息网络建设及现状的认识和分析,提出了加速农村信息网络建设的一些措施和方法,并着重就农民利用网络信息的心理提出了很多个人见解。     

大棚草莓优质鲜食新品种引进比较初报

为解决长江中下游地区大棚草莓鲜食的主栽品种“丰香”易感白粉病,“明宝”果实软、不耐贮运的问题,镇江农科所近几年先后从日本引进了6个优质鲜食草莓新品种和从日本实生种子中自选了“益香”新品系,并对其繁育苗能力、生育特性、产量和品质性状、抗病虫能力进行了调查,结果表明：“枥木少女”、“金三姬”、“章姬”早熟性最好,适于大棚促早熟栽培,且均抗白粉病,为11月上市的优选品种;“枥木少女”适于远销,“金三姬”、“章姬”适于近距离销售,但必须避雨和防高温遮荫育苗,在高水平栽培下发展潜力大;“鬼恕甘”长势强而旺,产量高,果形优美,适于大棚促成,但果实也偏软;“益香”、“静岗11号”、“幸香”,采收期均比“丰香”、“明宝迟”,“益香”、“静岗11号”较抗白粉病,且比“明宝”耐贮,有一定应用前景,“幸香”在8个品种(系)中果皮最硬、摘叶省工,最适于远途销售,但仍较感白粉病,需注意防治。     

聚赖氨酸抑菌性能的研究

利用圆滤纸片抑菌试验法研究了聚赖氨酸单独作用及其与醋酸混合使用时 ,对 G( +)菌、G ( - )菌、真菌的抑制效果 ,并探讨了高温对聚赖氨酸抑菌活性的影响。结果表明 ,聚赖氨酸对革兰氏阳性的微球菌 ,保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌 ,革兰氏阴性的大肠杆菌、沙门氏菌以及酵母菌的生长有明显抑制效果 ;聚赖氨酸与醋酸复合试剂对枯草芽胞杆菌有明显抑制作用 ;经高温处理后的聚赖氨酸对微球菌仍有抑菌活性 ,表明聚赖氨酸具有较好的热稳定性能。     

紫珠属2种植物的花粉生活力及柱头可授性研究

采用培养基法和联苯胺--过氧化氢法对紫珠属植物白棠子和老鸦糊的开花过程、花粉生活力和柱头可授性进行了研究。结果表明:白棠子和老鸦糊的单花花期均较短暂,开花24h后即完全凋落。在含200mg/LH3BO3+100g/L蔗糖的液体培养基上培养24h后,白棠子和老鸦糊的新鲜花粉萌发率分别可达90.03%和91.68%;开花前48h至开花后8h,白棠子和老鸦糊的柱头均具有不同程度的可授性,以开花后3～8h可授性强。杂交授粉结果表明,花后3h进行授粉,座果率介于50%～100%之间,证实了上述体外可授性试验结果的可靠性。授粉操作的熟练性是影响座果与否的关键因素之一。白棠子和老鸦糊的新鲜花粉散粉时期与柱头可授期具有同步性,为两者之间开展杂交育种并获得杂种提供了可靠的保障。     

河北省夏播玉米品种主要农艺性状演变规律的研究

通过对河北省1975—2002年审(认)定夏播玉米杂交种主要农艺性状的分析,认为河北省夏播玉米杂交种主要农艺性状的演变规律是:株高和穗位有增高的趋势;果穗由细长形向短粗形(筒形)演变,穗粒数增多,千粒重则趋于稳定;株型由平展型逐渐向紧凑、半紧凑型演变;半硬粒型和硬粒型品种增多,马齿型品种的比例降低;产量水平稳步提高,递增幅度逐渐减少。品种的生育期有延长的趋势,适宜种植密度则在经历了由低到高的变化过程以后,近年又呈现逐渐回落的趋势。     

啶酰菌胺对草莓灰霉病菌的毒力测定及田间防效

采用菌丝生长速率法和果实活体接菌法分别测定了啶酰菌胺(Boscalid)对草莓灰霉病菌(Botrytis cinereaPers.)的室内毒力和对草莓保护作用。结果表明,啶酰菌胺对草莓灰霉病菌有较强的抑制作用,其EC50值为3.9803μg/mL,对草莓灰有较好的保护作用。50%啶酰菌胺水分散颗粒剂1200倍液药后60 d对草莓灰霉病的防效达91.84%。     

贵州野生半夏资源遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR标记对来自贵州省及周边省区的60份野生半夏(Pinellia ternate(Thunb.)Breit.)遗传多样性进行分析.从100条引物中筛选出16条多态性丰富,条带清晰的引物,共扩增出150条谱带,其中119条显示多态性,总多态百分率为79.33%,平均每个引物能扩增出9.4条;贵州省不同样品间的遗传差异性较大,多态百分率为38.0%～60.3%.高于55%的样品占全部贵州省样品的2/5,分布于全省各个地州市;样品间相似系数分布在0.63～0.93之间.UPGMA法将60份样品分为6类,样品的聚类存在一定的地域性.     

北京市东南郊再生水灌区地下水多环芳烃污染风险评估

为研究污染物随再生水进入地下环境后其迁移衰减情况及对地下水的潜在危害性,以Multi-cell模型为基础,结合污染物质量守恒、在水土中吸附再分配、生物降解等机理,针对地下水污染风险评估构建了计算污染物随水在土壤剖面的垂向迁移衰减一维模型,并以北京通州大兴再生水灌区为研究区域,以再生水中持久性有机污染物多环芳烃萘和菲为研究对象,根据当地钻孔资料及灌溉水水质、地下水水质资料,应用该模型进行试算。结果表明,经过多年连续灌溉后,通州大兴大部分地区进入潜水含水层的萘、菲浓度较低,整体污染风险较低,仅在通州区潞城镇等个别地区萘、菲浓度较高,应引起重视;由于大兴区整体包气带较厚,其污染风险低于通州区。土壤粘土层是萘、菲积累的主要层位,其吸附容量远大于细砂等粗颗粒介质,在土壤表层低环多环芳烃迁移性更强。应用这一模型,能够较为宏观地掌握通州大兴再生水灌区不同区域地下水中多环芳烃萘和菲的污染风险差异。     

实验田4年生转基因毛白杨嫁接苗和自根苗安全性研究

目的

对种植于天津滨海的自根苗转AhDREB1基因毛白杨（（Populus tomentosa × P. bolleana） × P. tomentosa）以及种植于沧州盐山的嫁接苗转基因株系进行安全性研究,评估转基因毛白杨对环境可能造成的影响。

方法

利用PCR扩增以及电泳技术,对种植在天津滨海和沧州盐山实验田的4年生转基因毛白杨基因组DNA、土壤DNA、沧州嫁接苗砧木DNA以及抗性微生物基因组DNA进行PCR特异性检测。对天津实验田土壤中根际微生物数量进行连续动态监测（3月、4月、5月）。分别在天津滨海和沧州盐山实验田模拟自然条件下转基因毛白杨植株枯落物掉落,检测不同生长阶段的不同器官（新生嫩芽、多年生枝条、新生根尖、多年生侧根、新生嫩叶、当年生老叶）的降解时间。通过化感实验,检测天津滨海和沧州盐山实验田转基因毛白杨植株叶片对白菜（Brassica pekinensis）种子的生长是否造成影响。

结果

电泳结果显示：外源基因稳定存在于转基因毛白杨基因组中,实验田土壤DNA、抗性微生物DNA样品以及沧州嫁接苗砧木DNA中均未出现目的基因片段;天津非转基因植株和转基因植株的根际土壤中可培养微生物数量没有显著差异;转基因毛白杨的枯落物,无论是飘落在杂草表面、土壤表面还是埋入土壤,2个月后外源基因均被降解。化感实验结果显示：非转基因植株以及转基因植株对白菜种子的胚轴和胚根生长的影响没有显著差异。

结论

未发现实验田种植4 a的转基因毛白杨对周围的环境造成影响。