Determination of Feeder Cell‐Based Cellular Niches Supporting the Colonization and Maintenance of Spermatogonial Stem Cells from Prepubertal Domestic Cat Testes

Recently, isolation and in vitro culture of putative spermatogonial stem cells (SSCs) in the domestic cat have been conducted. However, the cellular niche conditions that facilitate the establishment and long‐term maintenance of feline SSCs (FSSCs) have not been described. Therefore, we investigated the type of feeder cells used to stimulate colony formation and growth of FSSCs among the various factors in the FSSC niche. Spermatogonial stem cells isolated from feline testes were cultured on mitotically inactivated testicular stromal cells (TSCs) derived from cats, dogs and mice, and mouse embryonic fibroblasts (MEFs). The formation and growth of colonies derived from SSCs cultured on each type of feeder cell were identified at passage 0, and the morphology, alkaline phosphatase (AP) activity and expression of SSC‐specific genes in surviving colonies were investigated at passage 4. Among these diverse feeder cells, TSCs from cat showed the greatest colony formation, growth and maintenance of FSSCs, and SSC colonies cultured by passage 4 showed a typical dome‐shaped morphology, AP activity and expression of SSC‐specific genes (NANOG, OCT4, SOX2 and CD9). Accordingly, these results demonstrate that feline TSCs could be used as feeder cells to support the establishment and maintenance of SSCs from domestic cats.     

塔拉滩草地荒漠化成因分析及防治措施探讨

塔拉滩地处共和盆地,20世纪80年代以来,该地区草地退化、沙漠化加剧。通过研究1987和1996年TM卫星遥感影像解译以及1994和1999年沙漠化普查与监测结果,分析了塔拉滩草地荒漠化的原因主要有气候变化、生物因素、人为因素3个方面,针对这些原因提出了相应的防治措施：（1）封育禁牧;（2）人工促进退化草地恢复;（3）铺设沙障,沙障内种草植苗;（4）实施生态移民;（5）开发空中水资源;（6）以生态建设工程带动草地治沙事业。     

骨骼肌电穿孔转基因技术研究进展

目前,在大动物模型试验中,骨骼肌电穿孔转基因技术已被广泛用于转染一些功能基因,并能显著提高非病毒载体基因的转染效率。笔者就电穿孔促进基因通过细胞膜的可能机理及影响骨骼肌电穿孔转基因效率的关键因素（如物种、细胞直径、场强、脉冲参数、电极和电脉冲仪等）进行了综述。     

雀稗草产草量、营养价值及饲喂效果的研究

连续二年测定雀稗草鲜草、干草、干物质、粗蛋白质和可消化干物质产量,分析各生长阶段常规营养成分;进行饲养肉牛效果试验,同时测定干物质消化率。结果表明,雀稗草具有产草量较高、幼嫩时期营养成分含量丰富、干物质消化率高等优点,但后期老化快,抽穗开花后营养价值急剧下降;相关分析结果表明,粗纤维含量与生长天数呈显著正相关(P<0.05),而粗蛋白质含量则呈显著负相关(P<0.05);刈割高度60cm优于50cm;用雀稗草饲喂肉牛有必要补充一定量的精料(5g/kgLW/d)或较多量的豆科牧草。     

仙居鸡染色体G带和Ag-NORs的研究

运用改进的鸡外周血淋巴细胞培养——空气干燥法，分析了仙居鸡染色体G带和Ag—NORs。G带研究结果表明：前10对大型染色体可分为30个区，144条带，同时对G带带型特征进行了具体描述，并绘制了G带模式图。Ag—NORs处理发现：仙居鸡的Ag—NORs常分布于1p、3p、4p、Zp、2q上，均数为3．26，众数为3。不同个体间以及同一个体的不同细胞间。Ag—NORs数目存在多态性；此外研究还发现Ag—NORs联合现象。     

鸭疫里氏杆菌形态特征的电镜观察

自鸭传染性浆膜炎的病死鸭中分离鉴定的鸭疫里氏杆菌(RA)Ⅰ、Ⅱ型两个菌株，用负染法和超薄切片法制备样品，于透射电镜下进行观察。结果观察到约占1／3的RA具有特殊的形态结构：在细菌的顶端或侧面有1～2个与菌体相连的芽状赘生物，有的也能从菌体上脱落下来。它在超薄切片中的大小约为菌体的1／3～1／5，能观察到其内部也具有类似菌体内部的结构。且具有类似菌体的“细胞壁”，类似于核体部分的结构位于“细胞壁”的一侧。而用相同的方法制作的鸭大肠杆菌(E．cozi)对照样品，却见不到这种特殊的形态结构。说明这种形态特征可能是RA特有的。     

猪瘟病毒E2(gp55)基因在昆虫细胞中的表达

将除去3'端跨膜区的猪瘟病毒E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,获得重组质粒pFBHT-E2,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,发生转座作用,经抗性及蓝白斑筛选得到含E2基因的重组载体质粒rBacmid-E2,以脂质体介导的方法将此重组载体质粒转染sf9昆虫细胞,获得重组病毒,命名为rvBac-E2.经SDS-PAGE和Western-blot及ELISA等方法检测,结果表明,此E2基因在昆虫细胞中正确表达,表达的蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应.     

微量元素硒的类胰岛素作用研究进展

近年来随着硒与糖尿病关系研究的不断深入,人们发现硒在促进细胞对葡萄糖的摄入、糖代谢以及信号传导等方面都具有类胰岛素作用,但其有效剂量接近于毒性剂量,故出于安全性的考虑并不适用于人体。作者在对硒的类胰岛素作用研究进行综述的基础上,深入探讨了硒在糖代谢中的调控机制,为利用硒调控畜禽应激状态下的糖代谢紊乱提供参考。     

鸡CSRP3基因编码区SNPs及其与肌纤维性状的相关分析

CSRP3基因是肌细胞分化所必需的正向调节因子,在肌肉生长发育过程中发挥重要作用。研究以220只63日龄(上市日龄)"花山麻鸡"为研究素材,应用PCR扩增与测序首次扫描了鸡CSRP3基因编码区SNPs,并将其与腓肠肌外侧头肌纤维平均面积、直径和密度等肌纤维性状进行关联分析。结果显示:在鸡CSRP3基因编码区共发现G180A、C240T、G246A、C252T、C546T、A633G 6个SNPs,均为同义突变;相关分析表明,A633G位点的多态性与花山麻鸡腓肠肌外侧头肌纤维平均面积存在极显著的基因型效应(P<0.01),与肌纤维平均直径、肌纤维平均密度存在显著的基因型效应(P<0.05)。结果表明,CSRP3基因可作为影响鸡骨骼肌生长发育的候选基因,可选择CSRP3基因编码区的633位点作为鸡骨骼肌肌纤维性状的分子标记辅助选择的候选标记。     

达乌尔黄鼠线粒体Cyt b基因序列特征及其系统进化分析

在甘肃省天祝藏族自治县采集12只达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus),PCR产物直接测序获得Cyt b基因1140bp序列,采用Clustal X 1.84、MEGA 6.0、Dna SP 5.0等生物信息学软件进行了序列特征和系统地位分析。结果显示,达乌尔黄鼠Cyt b基因含116个多态信息位点,群体中多态位点类型有转换、颠换,Cyt b基因T,C,A,G碱基含量分别为33.7%,25.9%,27.6%,12.9%。基于Kimura双参数的遗传距离显示,属内种间大黄鼠(Spermophilus major)与新疆黄鼠(Spermophilus fulvus)间遗传距离最小(0.034),高加索黄鼠(Spermophilus musicus)与达乌尔黄鼠最大(0.172),达乌尔黄鼠群体内遗传距离为0.140,种群分化较大,基于NJ法构建的系统进化树符合传统分类标准,研究为达乌尔黄鼠Cyt b基因标记的种群遗传学应用提供了参考。