猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析

根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物,对我们分离鉴定的2005四川分离株进行毒力因子检测,并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板,获得了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)的2个片段,以及SLY的长度为1502bp目的片段(外引物)和1443bp的目的片段(内引物)。说明分离株SSsc0501为MRP+EF+SLY+,属于具有3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析,结果其与P1/7株的核苷酸序列完全一致,与1933株的同源性达99.7%,仅在128位、217位、744位、1380位、1386位的5个核苷酸发生突变。在氨基酸水平上SSsc0501株与1933株的同源性达99.6%,有2个氨基酸发生替代。     

碱茅耐盐性的研究

对碱茅不同生育期的耐盐性试验表明：碱茅成株的耐盐性强，种子和苗期的耐盐性低。种子对硫酸盐土混合盐、碳酸钠单盐和氯化钠单盐室内萌发的耐盐度分别是（溶液浓度）３．４７％、１．０８％、１．５８％。种子出苗期适宜的土壤盐渍度为１．７１２％，临界盐渍度为３．１０％。苗期以后耐盐性逐渐提高，可在２．４７～２．７９％的土壤盐渍度下生长发育正常。成株的耐盐度高达４．２４８％。田间播种碱茅草在０～１０ｃｍ土壤含盐量１．６５％以下时，可以正常出苗。盐分达到１．８５％时，需要加大实际播量，以便全苗。     

马eCG/LHβ亚基基因多态性研究

马绒毛膜促性腺激素(equine chorionic gonadotropin,eCG)是由妊娠期母马胎儿尿膜—绒毛膜细胞分泌的一种由α、β两个亚基组成的异源二聚体糖蛋白,具有FSH、LH的双重活性。采用PCR-SSCP和测序方法对28匹蒙古马和25匹纯血马的eCG/LHβ亚基基因的多态性进行研究,结果发现,在蒙古马eCG/LHβ亚基基因5′调控区存在一突变位点:G-415A分为AA、BB、AB 3种基因型,AA、BB、AB基因型频率分别为0.89、0.07、0.04;纯血马此基因中未检测到多态性。     

疑核在下丘脑外侧区微量注射IL-6调节机体细胞免疫过程中的作用

为探索外源性ＩＬ－６可否通过反馈作用调节机体的免疫反应,选用３～４月龄、体重１．５～２．５ｋｇ的健康青紫蓝家兔,麻醉后固定于脑立体定位仪上。试验组Ⅰ动物（ｎ＝８）在下丘脑外侧区注射２．５ｐｍｏｌ／ＬＩＬ－６２μＬ;试验组Ⅱ动物（ｎ＝５）在疑核处注入２％盐酸利多卡因０．５μＬ后,再在下丘脑外侧区注射２．５ｐｍｏｌ／ＬＩＬ－６２μＬ;对照组动物（ｎ＝４）在下丘脑外侧区注射人工脑脊液２μＬ。分别在注射前及注射后不同时间无菌采血作细胞免疫指标测定。结果：试验组Ⅰ动物的Ｔ细胞百分率和ＰＨＡ诱导的淋巴细胞转化率,在注射ＩＬ－６后６０ｍｉｎ显著升高;试验组Ⅱ动物的Ｔ细胞百分率和ＰＨＡ诱导的淋巴细胞转化率,在注射ＩＬ－６后１２０ｍｉｎ出现显著升高;对照组动物在注射前后无明显变化;由此证明,下丘脑外侧区一定量的ＩＬ－６具有增强机体细胞免疫功能的作用,而这种细胞免疫的调节作用至少有一部分是通过疑核到达免疫系统的。疑核是下丘脑外侧区ＩＬ－６调节机体细胞免疫的通路之一。     

牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达

为了研究牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶基因(Lip)的生物学特性及其功能,试验构建了Lip-pEGFP融合基因的真核表达载体,利用脂质体(lipofectamine2000)将其转染到Hela细胞中,用荧光显微镜检测GFP在细胞中的表达情况。结果显示,重组Lip-pEGFP载体在Hela细胞中获得了高效表达,且能够稳定传代,为进一步研究Lip的生物学功能及其在牛结核分枝杆菌中的作用奠定了基础。     

牛超数排卵技术的研究

用ＦＳＨ＋ＰＧＦ１。超排处理７２头次供体牛,采卵３６１枚,可用胚２３５枚,黄牛胚胎可用率高于奶牛、肉牛,育成牛胚胎可用用率高于经产牛,秋冬季超排效果明显好于春季。     

cDNA文库构建方法的研究进展

cDNA文库的构建是一种重要的基因克隆的手段,主要用于新基因的发现及基因功能的研究。作者主要介绍cDNA文库的构建方法及cDNA文库的一些实际应用,为研究cDNA文库的构建提供一些有价值参考意见。     

均匀有效抗体是构建新型生物安全体系的核心

<正>中国现行饲养环境条件下,除了一些大型的养禽场外,大多数家禽是一家一户分散饲养。小型饲养户由于禽舍简陋,设备陈旧,技术和管理相对落后等原因,疾病控制难度较大。另外,近年来兴起的集约化养殖场和     

猪、鸡间空肠弯曲杆菌感染分布状况的调查研究

目的:对入沪28个产地(河南开封、山东青岛、江苏南通、浙江金华、上海奉贤等地)的鸡、猪进行了空肠弯曲杆菌流行分布调查,了解空肠弯曲杆菌在不同动物种间的分布状况。方法:以空肠弯曲杆菌特异性的VS1基因为扩增目标片段,对2005～2007年间在上海市三家家禽市场和五家生猪屠宰场采集的2234(鸡1015份、猪1219份)盲肠内容物样品进行PCR检测。结果:鸡盲肠内容物检出空肠弯曲杆菌阳性的样品288份,平均阳性率为28.4%,猪盲肠内容物检出空肠弯曲杆菌阳性的样品420份,平均阳性率为34.4%。结论:28个产地的鸡、猪均有空肠弯曲杆菌感染,不同产地、种属其感染率和发病情况不同,经统计学分析显示,猪的感染阳性率显著高于鸡,上海市内(奉贤等地)来源的畜禽感染阳性率显著低于浙江金华、江苏海门、江苏张家港和江苏大丰等外省市地区。     

抗猪附红细胞体单克隆抗体的制备

以纯化的猪附红细胞体免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并用间接ELISA方法进行筛选,经过间接ELISA方法、免疫印迹和间接免疫荧光试验进行鉴定,共获得5株分泌抗猪附红细胞体单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1H1、1H2、3A5、5B1和7E11,其单抗亚类鉴定分别属于IgG2b、IgG1、IgG2b、IgG2b和IgG2b。这5株McAb均能与猪附红细胞体全菌蛋白发生特异性反应,而不与猪肺炎支原体、猪链球菌、大肠杆菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒发生反应,并且1H1、3A5和5B1能识别同一抗原位点,1H2和7E11识别另一抗原位点。