退化草地土壤生化活性研究

通过对三种不同退化程度的退化草地土壤生化活性进行测定和相关性分析，结果表明草地退化后其土壤生化活性受到不同程度的影响，表现为土壤生化活性随着退化程度增高而减小，但差异并非都达到统计学上的显著性，而土壤生化活性间的相关性则显著地与草地退化程度有关，说明退化草地土壤微生物间的协调作用受到显著影响，从而影响土壤氮素和碳素代谢途径。     

厄贝沙坦及其复方制剂中痕量杂质N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸残留方法学研究

采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)建立厄贝沙坦及其复方制剂中N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)的测定方法。采用Waters ACQUITY UPLC○RHSS T3色谱柱进行分离,以0.005 mol/L甲酸铵(用甲酸调pH值至3.0)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,质谱检测器,流速为0.3 mL/min。结果显示NMBA的线性范围为0.156 6~3.132 6 ng/mL,相关系数r>0.99,方法检出限浓度为0.047 0 ng/mL(相当于样品浓度0.01μg/g),定量限浓度为0.156 6 ng/mL(相当于样品浓度0.03μg/g),样品加标回收率在80%~130%。说明该方法可以快速、简便、灵敏、准确地测定厄贝沙坦及其复方制剂中NMBA含量。     

猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型信号标签诱导突变体库的构建

本研究以自杀性质粒pUT携带含有信号标签的Mini-Tn5转座子对猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌进行转座诱变,构建了带有12对特异性信号标签的Mini-Tn5转座子的pUT自杀质粒,转化到供体菌E.coliβ2155后,利用双亲本滤膜杂交法与受体猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌(APP1)进行接合转移,构建并优化了接合转移体系.利用抗性和营养缺陷培养平板筛选得到接合突变体,通过抗性通用引物与12个特异标签引物和胸膜肺炎放线杆菌毒素IV(ApxIV)鉴定引物分别对这些突变体进行了PCR鉴定和测序验证.结果表明,经过加入标签的MinI-Tn5转座子可以通过接合转移的方式从供体菌E.COliβ2155中插入到APP1基因组当中,并成功构建了12个含有特异信号标签的重组质粒,获得了APP1的12个转座突变体库,经筛选鉴定后得到561个突变株.这为研究APP1的功能基因和筛选特定突变株提供了必要的基础.     

猪细小病毒CG-05株在ST细胞上的增殖规律研究

通过将猪细小病毒CG-05株同步接种于ST细胞,测定不同时间收获的病毒液的TCID50和HA,研究了CG-05株病毒在ST细胞上的增殖规律。病毒接种后镜检观察接毒细胞,在接种病毒后24 h,即可在细胞较少的区域看到非常轻微的病变。测定病毒TCID50,检测到接毒后培养17h病毒已经明显增殖;当培养到40h左右,其TCID50即接近高峰,达到10-7.2/0.1mL以上,并进入平台期;继续培养,TCID50最高可达到10-8.5/0.1mL,且直到122 h也不见明显降低。病毒HA价也出现同样的平台期,但比TCID50的平台期出现得晚,到50 h才进入平台期。结果表明,用ST细胞培养CG-05株病毒,接种病毒培养56～96 h后,如病变达到80%以上,且细胞脱落已形成20%以上空斑,此时收获病毒可获得高效价的病毒液。该研究可为制备高效价的PPV病毒抗原提供数据资料。     

添加缬氨酸和异亮氨酸对哺乳母猪及其仔猪生产性能的影响

本试验旨在探讨在哺乳母猪日粮中添加缬氨酸和异亮氨酸对母猪及其仔猪生产性能、母猪采食量和乳成分的影响.试验选用健康、体况、预产期相近的第2胎法系JALAX母猪144头,分成3个处理组,即对照组、试验A组和试验B组,每个处理48头母猪.对照组饲喂基础日粮,试验A组饲喂添加低水平支链氨基酸日粮(基础日粮 缬氨酸0.26% 异亮氨酸0.06%),试验B组饲喂添加高水平支链氨基酸日粮(基础日粮 缬氨酸0.36% 异亮氨酸0.14%).试验从母猪妊娠108 d进产房开始,到仔猪21日龄断奶时结束.试验结果表明:(1)添加缬氨酸和异亮氨酸提高了仔猪的断奶窝重、断奶窝增重、平均日增重和21日龄仔猪成活率,但以试验A组的效果较好,和对照组比,上述指标分别提高了23.10%(P<0.01)、30.45%(P<0.01)、19.26%(P<0.05)和7.16%(P<0.05);(2)添加缬氨酸和异亮氨酸提高了哺乳母猪哺乳11～15 d,16～21 d以及哺乳全期的采食量,试验A组比对照组分别提高了35.61%(P<0.01)、27.72%(P<0.01)和24.21%(P<0.01),试验B组虽然与对照组之间差异不显著(P>0.05),但有提高的趋势;(3)添加缬氨酸和异亮氨酸极显著提高了泌乳第1天、第7天和第15天乳中乳脂、乳蛋白、总固形物、非乳脂固体的含量(P<0.01),极显著降低了乳糖的含量(P<0.01),但以试验A组的效果最好;(4)添加缬氨酸和异亮氨酸极显著提高了初乳(泌乳第1天)的总必需氨基酸、总非必需氨基酸以及总氨基酸的含量(P<0.01),但对第7天和第15天乳中氨基酸含量影响不显著.因此,日粮中添加缬氨酸和异亮氨酸可以提高哺乳母猪的日采食量和改善母猪乳品质,从而提高哺乳仔猪的生长性能.     

Characterization of porcine circovirus type 2 (PCV2) infection in swine lymphocytes using mitogen-stimulated peripheral blood lymphocytes from healthy PCV2-carrier pigs

Information regarding the susceptibility of swine lymphocytes to PCV2 is rather limited. To further explore and characterize the PCV2 infection in swine lymphocytes, an in vitro model using concanavalin A (Con A)-stimulated peripheral blood lymphocytes (PBLs) obtained from clinically healthy PCV2-carrier pigs was introduced. It was found that the PCV2 antigen-containing rate was below 2% in PBLs from healthy PCV2-free pigs following treated simultaneously with Con A and PCV2. However, significantly higher PCV2 antigen- and nucleic acid-containing rates could be seen in Con A-stimulated PBLs from clinically healthy PCV2-carrier pigs. Prior to Con A treatment, both of the PCV2 antigen- and nucleic acid-containing rates in PBLs from healthy PCV2-carrier pigs were less than 1%; however, they reached 22.1+/-5.7% by flow cytometry and 27.1+/-6.5% by in situ hybridization, respectively, at 4-day post-incubation with Con A. Phenotyping of PCV2 antigen-containing cells revealed that PCV2-positive cells could be detected in both T and B lymphocyte populations within which IgM-positive B lymphocytes appeared to have a relatively higher positive rate. The Con A-stimulated PBLs also displayed a significantly higher viral load by the measurement of either PCV2 DNA copy number or viral titer when compared with the non-treated PBLs from healthy PCV2-carrier pigs. The results indicate that PBLs, especially IgM-bearing B lymphocytes, are indeed susceptible to PCV2 infection and PCV2 is capable of replicating in dividing lymphocytes. This activation-induced replication may explain in part the pathogenesis of lymphoid depletion in PMWS-affected pigs.     

中华蜜蜂越冬阶段维生素和氨基酸的营养需要量

本试验旨在研究中华蜜蜂越冬阶段对维生素和氨基酸的需要量.根据中华蜜蜂天然饲料——蜂蜜中的维生素和氨基酸含量设计试验饲料[中剂量(67.28 mg/kg)维生素+中剂量( 127.85 mg/kg)氨基酸组、中剂量维生素+高剂量(256.70 mg/kg)氨基酸组、高剂量(134.56 mg/kg)维生素+中剂量氨基酸组...     

散养湘黄鸡常见病的临床表现特点及其防制

湘黄鸡进行专业户(场)散养时，由于生产方式不同于舍饲群养，其生产环境、食物结构和易感病种类都必然发生变化。对此，笔者结合临床所遇病例进行了研究总结，对散养湘黄鸡的几种常发病的病因、病理、临床表现及防治特点等方面进行了介绍。     

增蛋散对蛋鸡内分泌及消化作用的影响

将768只421日龄海兰白蛋鸡随机均分为2组,分别饲喂添加0和1.5%中药增蛋散的2种饲料,于饲养30、60d时采血和屠宰,测定血样中卵泡刺激素(FSH)、促黄体素(LH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)、甲状旁腺素(PTH)、环磷酸腺苷(cAMP)等的含量及饲料中粗蛋白和钙的消化率,探讨该散剂促产蛋的作用机制.结果显示,当日粮中添加增蛋散饲喂30、60 d时,蛋鸡血清中FSH、LH、T3、T4、E2、P4、PTH的含量,下丘脑和腺垂体中cAMP含量及饲料中粗蛋白和钙的消化率均有显著提高(P＜0.05或P＜0.01).本试验结果为该散剂提高产蛋后期鸡的产蛋率,推迟其淘汰期的药理作用提供了实验依据.     

Use of monoclonal antibodies for analyses of Coxiella burnetii major antigens

Monoclonal antibodies (MAbs) to major antigens of Coxiella burnetii were produced. Some of the MAbs to a 62-kDa protein antigen, peptidoglycan protein complex and lipopolysaccharide (LPS) O-chains reacted with other bacteria whereas none of the MAbs to outer membrane proteins and LPS outer-core did. The LPS outer-core and OMPs may be useful antigens for specifically detecting antibodies to C. burnetii.