不同甜菜单胚细胞质雄性不育系与保持系的遗传多样性分析

利用35对SSR引物分析40对不同的甜菜单胚细胞质雄性不育系与保持系的遗传多样性。结果表明：每对引物扩增得到的条带数在2～12之间,有效等位基因数(Ne)、Shannon’s信息指数(I)、Nei’s基因多样性指数(H)的平均值分别为2.306、0.891和0.519。采用类平均法(UPGMA)进行聚类分析并计算遗传距离。聚类结果显示,除供试材料22与其他材料的遗传距离较大,亲缘关系较远,单独为一类群;其余的供试甜菜品系可分为4个类群;共有14对甜菜单胚细胞质雄性不育系与保持系完全聚合在一起,说明经过回交后,不育系和保持系的细胞核基因组之间几乎达到一致,纯度较高,今后可以直接应用于甜菜育种中;另有26对纯度较低,遗传距离较大,还需要继续进行回交至纯合。80份供试材料的遗传距离最大为0.462,最小为0.120。14对聚合在一起的原配组中的不育系之间遗传距离各不相同,今后可选择14对中遗传距离较大的不育系和其异型保持系配制二元不育系,用于杂交种中的母本。加大培育出甜菜新品种的可能性,同时减少了育种工作中的盲目性,有效的提高了甜菜育种效率。     

霍山石斛类原球茎诱导及其发育过程研究

 以霍山石斛试管苗带节茎段为材料, 诱导产生类原球茎, 并研究类原球茎发育过程。结果表 明, 霍山石斛类原球茎诱导的适宜培养基为Knudson + 2, 4-D 0.1 mg·L ^{- 1} + KT 0.05 mg·L ^{- 1} , 诱导率为25.50%。以固体静置、固液双层静置、液体静置、液体振荡4种不同培养方式进行增殖培养, 其中液体振荡培养方式更适于类原球茎快速增殖。类原球茎通过胚状体发生途径形成, 类似于合子胚的发育, 即经历原胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶胚, 最后发育为成熟胚。类原球茎发育进程大致可分为类原球茎形成期、类原球茎肥大期、茎叶分化期、茎叶形成期以及茎叶伸长期等阶段。     

Impact of serial activation of embryonic pax2 and WT1 genes on transdifferentiation of renal tubular epithelial cells

AIM: To investigate the mechanisms of transdifferentiation of renal tubular epithelial cells by the observation of serial activation of embryonic pax2 and WT1 genes in chronic renal failure model of 5/6 nephrectomized injury. METHODS: Embryo of mice, cultured renal tubule cells and chronic renal failure rat model of 5/6 nephrectomized injury were established. The expressions of paired Box gene (pax2) and Willm’s tumor gene (WT1), as well as α-smooth muscle actin (α-SMA), a phenotype of mesenchymal cells, were detected by RT-PCR and immunohistochemistry techniques. RESULTS: (1) Expressions of pax2 and WT1 mRNA began at 11.5 d and 14 d of embryo and increased gradually, and expression in trace quantity at 2 weeks after birth. Immunohistochemistry analysis revealed that WT1 only expressed in the glomerular podocytes and expressions of pax2 and WT1 in adult renal tubular cells were negative. (2) Deno-expression of pax2 and WT1 in some tubular cells appeared at week 2 and peaked at week 4 in 5/6 nephrectomized rats, both showing a same trend of expression. However, pax2 showed another peak at week 10 afterwards. (3) Re-expressions of pax2 and WT1 in TEC at 0.5 and 24 h after treated with IL-1α (10 μg/L) or AngII (10-9 mol/L) were observed respectively, followed by upregulation of α-SMA expression, and mesenchymal cells characters were shown. The effects were inhibited by Ang II receptor 2 antagonist and WT1 antibody, respectively. CONCLUSION: Adult renal tubule cells acquire re-activation of embryonic pax2 and WT1 genes and phenotypes of mesenchymes when challenge with certain injuries. Deno-expression of pax2 and WT1 genes closely relates with high concentration of bioactive facors, such as AngII and IL-1, which are involved in the mechanisms of renal tubule cells transdifferentiation.     

南繁区稻瘟病菌遗传多样性和群体遗传结构的AFLP分析

【目的】为了明确南繁区稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的遗传分化情况,【方法】采用AFLP分子标记技术对南繁核心区(三亚、乐东和保亭)和非核心区(琼中、屯昌和定安)共60个稻瘟病菌菌株的遗传多样性和群体遗传结构进行了比较分析。【结果】聚类分析表明,几乎所有菌株都聚在同一个谱系里,并且该谱系没有明显的亚群;群体遗传结构分析表明,核心区群体的多态性位点百分率、Shannon信息指数和基因流分别为87.89%、0.2738和4.2897,高于非核心区群体的81.37%、0.2703和3.5892;然而,核心区群体的Nei基因多样性指数和基因分化系数分别为0.1657和0.1044,低于非核心区群体的0.1662和0.1223。【结论】这些结果表明核心区和非核心区菌株都存在丰富的遗传多样性,不同群体间均存在较多的基因交流,但遗传变异均主要来自群体内;相比之下,核心区菌株的遗传多样性和遗传分化程度较高。     

EDTA对土壤渗滤液中TOC和重金属动态变化的影响

通过盆栽试验研究了EDTA对土壤渗滤液中总有机碳(TOC)和重金属动态变化的影响.结果表明,施用EDTA极显著地增加了土壤渗滤液中TOC含量,土壤渗滤液中TOC含量随淋洗量呈指数曲线下降.在加入EDTA 48天后,土壤渗滤液中TOC含量仍然高于对照处理.施用EDTA大幅度地增加了土壤渗滤液中Cd、Ni的浓度,其浓度在1个月内迅速下降,以后趋于稳定.用EDTA强化重金属污染土壤的修复存在淋溶迁移的环境风险.防止因EDTA施用而引起地下水污染的关键时期在EDTA施入后的2周内.     

碱性脂肪酶高产菌株产酶条件的优化研究

研究了酵母菌yz-145液体发酵生产碱性脂肪酶的培养条件.采用了Plackett-Burman方法对相关影响因素的效应进行评价,筛选出对产酶有重要影响的3个因素(K2HPO4、橄榄油、发酵温度),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化,优化后液体发酵液中碱性脂肪酶浓度从1 421 U/ml提高到1 776 U/ml.     

大千生果胶质提取工艺研究

本试验以果胶质作为考察指标,采用超声提取法,通过单因素试验和正交试验,研究对大千 生种子中果胶质提取的影响。实验结果表明:大千生种子中果胶质最佳提取工艺为提取功率200w, 料液比1:20,提取时间20min,提取温度60℃ 。在此最佳工艺下果胶质成分的含量最高为4.51％。     

蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达

【目的】构建蜡梅花cDNA文库，分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达，为探索蜡梅冬季开花分子机理，分离克隆特色基因奠定基础。【方法】以蜡梅花器官为材料，用SMART cDNA Library Construction Kit 构建文库，RT-PCR分析基因表达。【结果】经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml，扩增总文库滴度约为1010pfu/ml，重组率达到96%，插入片段在0.5 kb 以上，平均约1.1 kb，通过PCR 检测，从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段，说明所构建的文库覆盖度高、代表性强，LTP基因具有内含子，而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子，说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染， LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平，与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符，证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。【结论】已获得高质量的蜡梅花cDNA文库，可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析，这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能，为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。