出血性大肠杆菌O157eae-stx1/2B融合基因的构建和表达

构建表达eae和stx1／2B的融合基因，克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分，以正确地阅读框定向插入到含有stx1／2B融合基因的质粒，构建重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明：目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50．67％。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成，可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

牛初乳sIgA等电点的测定

采用等电聚焦电泳法测定牛初乳sIgA的等电点。牛初乳sIgA的pI为5．02—5．67,比相关报道更加精确。回归方程：y=0．7543x＋3．1635,相关系数r=0．9989,表明线性关系良好,为牛初乳sIgA的离子交换层析制备条件的选择提供了可靠的理论依据。     

规模化屠宰场官方兽医及协检员的设置与职责

@@进入新世纪以来,伴随SARS、禽流感和猪链球菌病等疫情在全球范围内的传播,对世界各国人民的身体健康构成极大威胁。因此,国家逐步加大对动物疫病的防控,相继颁布了《中华人民共和国动物防疫法》《动物检疫管理办法》等法律法规,使我国动物防疫和检疫工作走上了有法可依、有章可循的规范化、法制化轨道。屠宰检疫是动物检疫工作的重要组成部分,是保证人民群众食肉安全的重要手段。猪肉及猪产品是广大群众餐桌上不可或缺的食品,国家为保证生猪产品质量安全,保障人民身体健康对生猪屠宰实行定点屠宰、集中检疫,从而使重大疫病的发生和流行得到有效控制。     

荧光实时定量PCR方法检测猪链球菌2型

以猪链球菌2型的荚膜多糖抗原编码基因cps2J为靶基因设计引物,利用SYBR GreenⅠ能特异地与双链DNA结合发出荧光的特性,以ABI7000为平台,建立荧光实时定量PCR检测猪链球菌2型的方法。该方法检测猪链球菌2型参考株和猪链球菌2型国内分离株都呈阳性,具有良好的特异性。整个检测过程于2h内完成,检测限度为24CFU,标准曲线的相关系数为0.997。对5份采集于猪链球菌2型病猪的病料进行检测,结果表明肝脏和脾脏最适于检测。     

亚急性铜、镉暴露对鲤肝脏Hsp60表达的影响

试验通过实时定量PCR和Western blot技术,检测重金属铜、镉单一及联合急性暴露后鲤肝脏中Hsp60基因和蛋白水平。鲤随机分为7组,两个Cu2+处理组(0.05 mg/l和0.1 mg/l),两个镉处理组(0.63 mg/l和1.26 mg/l),两个混合处理组(0.045 mg/l和0.09 mg/l)和对照组。结果表明铜、镉单一及联合急性暴露对鲤有毒性作用,经过96 h的暴露,除混合低浓度组之外,其余各组肝脏中Hsp60基因表达水平显著提高(P0.05)。受重金属暴露的影响,初期鲤肝脏中Hsp60蛋白水平下降,随着时间推移,蛋白水平逐渐上升,混合低浓度组显著高于对照组水平(P0.05)。     

甲鱼暴发性传染病的病原分离及治疗试验

从１５例表现为“红底板”、“红脖子”、“烂甲”的患病甲鱼肝脏分离到９株无荚膜、无芽胞、革兰氏阴性、β溶血的短杆菌,经理化特性鉴定均为气单胞菌属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）嗜温有动力菌群,其中温和气单胞菌（Ａ．ｓｏｂｒｉａ）７株,豚鼠气单胞菌（Ａ．ｃａｖｉａｅ）２株。从Ａ．ｓｏｂｒｉａ和Ａ．ｃａｖｉａｅ各选一代表菌株（ＪＡ－１和ＪＡ－２）分别感染健康鲫鱼均引起发病和死亡,其ＬＤ５０分别为４．３×１０５、５．５×１０７,并回收到该２种菌。在该２种菌培养上清中存在１种具有溶血活性的毒素。以ＪＡ－１和ＪＡ－２为菌种制成混合菌苗,在应用由黄芪、有机锗制成的免疫增效剂后,再用混合菌苗免疫家兔,制得的多价高免血清（效价达１∶５１２）与庆大霉素、恩诺沙星进行了治疗对比试验。结果,高免血清治疗自然病甲鱼１０９只,全部治愈;庆大霉素、恩诺沙星分别治疗自然病甲鱼７２只和８４只,平均治愈率分别为８８％和８４％。     

Virulence traits of avian pathogenic (APEC) and fecal (AFEC) <Emphasis Type="Italic">E. coli</Emphasis> isolated from broiler chickens in Algeria

Avian pathogenic E. coli (APEC) is the etiologic agent of avian colibacillosis, the most common disease responsible for chicken morbidity in the world. Although multiple virulence-associated factors were identified, their prevalence in Algeria is still poorly known. In the present research, 92 avian pathogenic E. coli (APEC) isolates were recovered from broilers with clinical signs and lesions of colibacillosis. In addition, 32 E. coli isolates collected from feces of healthy birds (AFEC) were included for comparison. All isolates were investigated by PCR for the presence of a total of 11 virulence-associated genes described for avian pathogenic (iroN, ompT, hlyF, iss, iutA, and fimC) and diarrheagenic E. coli (eae, stx, elt/est, ipaH, and aggR). The sensitivity of 39 APEC isolates to 16 antibiotics was also determined using antimicrobial pretreated microplates. Here, we report that 98% of the examined isolates host at least one of the tested virulence factors. The most prevalent genes in APEC were iutA (90.6%), ompT (86.9%), and iss (85.8%); whereas, iutA (78.1%), fimC (78.1%), and iroN (68.7%) were the highest prevalent genes in AFEC. Our data showed that none of the AFEC isolates harbor any of the tested diarrheagenic genes. Moreover, only elt/est (5.4%), stx (2.1%), and ipaH (2.1%) genes were carried by APEC isolates. We further established that ceftazodime, ceftiofur, mequindox, amoxicillin/clavulanic acid, and meropenem were the most efficient antibiotics against the analyzed APEC isolates. Overall, our findings provide more insights about APEC and AFEC virulence potential in Algeria which could participate in the fight against colibacillosis.     

甘肃省民勤治沙综合试验站区域生态经济型优化模式的设计

以甘肃省民勤治沙综合试验站区域为系统，应用线性规划的方法，建立区域生态经济型系统的优化模式。结果表明，区域系统在现有的生产条件及生产力水平下，要达到最大经济效益，并保证区域系统的生态趋于良性特环 ，其农林牧三业用最优比例为１：９．５：９．５，此时区域系统的经济纯收入最大，为１１３．７２万元，年人均纯收入达５６８６元。     

野生动物种群格局分析方法

本文综述了几种种群格局分析方法，以苍鹭营巢的分布格局为例，探讨了这些方法在野生动物种群生态学上的应用，为研究野生动物种群的数量动态及其行为规律提供了理论基础。     

羊布鲁氏菌病直接经济损失与防控成本效益分析方法构建及实证研究

为了解我国布鲁氏菌病（以下简称“布病”）一类地区羊布病造成的直接经济损失及防控投入合理性,构建了羊布病直接经济损失指标体系和防控成本效益评估方法,并对我国羊主产区4省份17市县的防疫部门和319个养羊场户进行实地走访与问卷调查。共回收防疫部门问卷21份,场户有效问卷301份,涉及124个布病羊场和177个无布病羊场。运用Excel、SPSS等软件,对问卷数据进行统计分析。结果显示：2020年单只布病羊直接经济损失平均为4 557元（不含奶羊）,各省份羊布病损失为 1.8亿~20.4 亿元,其中养羊场户损失占比较高,占总损失的 73.0%~81.0%;各省份政府的布病防控效益成本比为5:1~38:1。结果表明,羊布病导致的经济损失严重,对其防控可取得显著经济效益。建议养殖户及政府进一步加大布病防控投入,而且政府应提高预防性投入比重。本研究为优化布病防控政策提供了技术支撑。