西番莲多糖提取物对猪圆环病毒2型感染RAW264.7细胞氧化应激的影响

为研究西番莲多糖提取物（Passiflora edulis polysaccharide extract,PEPE）对猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）感染RAW264.7细胞氧化应激相关因子的影响,本试验探讨了PEPE对氧化应激的调节作用。在96孔细胞培养板中每孔加入100 μL浓度为1×10⁶个/mL的RAW264.7细胞,分别设细胞对照组、PEPE组（25、50、100、200、400、800和1 600 μg/mL）,分别于培养箱培养24和48 h,用MTT法检测细胞活性,筛选PEPE的药物安全浓度范围。试验分为以下6个组：细胞对照组、病毒组、PEPE高（400 μg/mL）、中（200 μg/mL）、低（100 μg/mL）剂量组及维生素C组,其中细胞对照组加入含10% FBS的DMEM培养液,其余组加入PCV2病毒液,孵育2 h后在PEPE组加入对应浓度的PEPE溶液,VC组加入配制好的VC溶液,细胞对照组和病毒组加入含10% FBS的DMEM培养液,培养48 h,同样用MTT法检测细胞活性,以研究PEPE对PCV2感染RAW264.7细胞活性的影响。按照上述6个试验组分组,处理同上,将细胞培养12 h,收集样品用于检测氧化应激相关因子水平。用Griess法和DCFH-DA荧光探针分别检测RAW264.7细胞上清中NO含量和细胞内活性氧（ROS）水平、OPT荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量,化学发光法检测细胞内黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力。结果显示,PEPE对RAW264.7细胞的安全浓度范围为25~400 μg/mL。PCV2感染RAW264.7细胞后,细胞活性显著降低（P<0.05）,而不同浓度PEPE处理组均能提高细胞活性。RAW264.7细胞被PCV2感染后,细胞分泌NO、ROS水平,GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性显著升高（P<0.05）,感染细胞GSH含量显著降低（P<0.05）;PEPE作用于PCV2感染的RAW264.7细胞,显著降低感染细胞NO、ROS水平、GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性（P<0.05）,100 μg/mL PEPE处理组细胞GSH水平显著升高（P<0.05）。本试验结果表明,PEPE能提高PCV2感染RAW264.7细胞的抗氧化能力,有利于缓解病毒感染所致氧化应激。     

白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。     

林芝地区林下凋落物作无土育苗基质初步研究

以北农1号番茄为试材,以土壤为对照,研究了菇渣、高效腐殖土、往年凋落物、当年凋落物4种基质对番茄幼苗生长状况的影响。结果表明:在出苗率、株高、茎粗、根长、单株干鲜质量、根冠比、茎叶比、鲜干比和真叶抽生数等方面,高效腐殖土、菇渣和往年凋落物均明显优于当年凋落物和对照土壤;土壤在株高、茎粗和真叶抽生数方面显著优于当年凋落物;往年凋落物具备作为优质育苗基质的特性。     

高光强化木地板的生产质量控制

强化木地板自1994年进入中国市场以来,以其价廉物美、产品规格丰富、品种花色多样、安装简单方便、铺装效果好、易清洁、易打理、环保耐磨、抗冲击能力强、不易变形等优点,越来越受到消费者的青睐.而近几年出现的高光泽度强化木地板(以下简称高光强化木地板),更因其光泽度高(一般在60～80度),对光线具有很强的反射效果,视觉冲击力强,铺装效果好,而成为消费者选择地板的首选.     

小麦淀粉合酶基因Ⅱ克隆及反义和RNAi载体构建

采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的籽粒中克隆出淀粉合酶Ⅱ基因(Starch synthaseⅡ,SSⅡ)部分cDNA片段(600bp)(GenBank No.EF221761),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的SSⅡ基因有高度同源性。以pCMBIA1301质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SSⅡ基因的反义表达载体pCMBIA1301SSIIA;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了SSⅡ基因的RNAi载体pFGC5941SSIIsa,这些载体的构建为研究此基因的功能奠定了基础。     

Metformin sensitizes human breast cancer MDA-MB-231 cells to tamo-xifen through down-regulation of c-Myc

AIM: To investigate whether metformin enhances the sensitivity of human breast cancer MDA-MB-231 cells to tamoxifen by down-regulating c-Myc. METHODS: The cell viability, colony formation, apoptosis, and migration and invasion abilities of MDA-MB-231 cells were detected by CCK-8 assay, colony formation experiment, flow cytometry and Transwell assay. The expression level of c-Myc was quantified by Western blot and immunohistochemical analysis. The antitumor effects of metformin and tamoxifen were investigated in vivo in a MDA-MB-231 triple-negative breast cancer xenograft model in the SCID mice. RESULTS: Metformin in combination with tamoxifen exerted synergistic effects on inhibition of the viability, colony formation, migration and invasion, and induced the apoptosis compared with the controls and either agent treatment alone in the MDA-MB-231 cells. The levels of c-Myc was down-regulated in vitro by treatment with metformin and/or tamoxifen (P<0.01). Moreover, metformin or in combination with tamoxifen also reduced the growth of MDA-MB-231 breast cancer tumors in the SCID mice by down-regulation of c-Myc in vivo. CONCLUSION: Metformin in combination with tamoxifen exerts synergistic effects on inhibition of the proliferation, migration, invasion and tumor growth of human triple-negative breast cancer MDA-MB-231 cells by down-regulating c-Myc expression, suggesting that metformin in combination with tamoxifen merits further evaluation as a target.     

塑料地膜环保型替代品的研究进展

在环保型地膜研究的基础上,综述了当前国内外环保型地膜的研究进展,同时提出了环保型地膜目前存在的问题,并指出了今后的发展方向.     

北海道黄杨叶片应答低温胁迫的蛋白质组分析

 采用双向电泳的蛋白质组学方法分析了北海道黄杨叶片蛋白质对低温胁迫的应答反应。北海道黄杨植株在室外种植,从2008年10月—2009年2月每月提取叶片总蛋白。在考马斯亮蓝染色的2-DE胶上发现36个表达量显著差异蛋白点,其中通过质谱鉴定出19个蛋白质,包括已知的和新鉴定的低温胁迫相关蛋白质。这些鉴定出的蛋白质涉及多个生理过程,如能量与代谢、调控、防御应答等,同时这些蛋白质的表达模式与生理生化变化模式相一致。     

刍议特色蔬菜荠菜的价值及其研究意义

为了促进产业融合、实现加工增值、加快技术研发、达成跨季销售、推动冷链发展、增加劳动就业,对荠菜产业化相关研究进行总结。在此,有必要对荠菜的价值、研究意义及研究现状进行介绍,发现荠菜是一种具有较高营养价值和药用价值的野生叶菜,深受消费者青睐,市场前景广阔,具有重要的研究意义;另外,涉及荠菜的研究很多,但主要集中在栽培方面,品种与加工涉猎较少,特别是产业化更是鲜有涉足。通过对荠菜产业关键技术与装备的进一步研发,助力实现产业链的延伸,加快新品种、新技术、新模式、新工艺、新装备的应用。