鸭疫里氏杆菌吉林分离株camp基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立

为建立鸭疫里氏杆菌(RA)的血清学快速检测方法,本研究根据GenBank中登录的camp基因序列设计引物,以吉林RA分离株JL-1的基因组DNA为模板,通过PCR扩增camp基因,并构建pET-camp重组表达质粒,转化至E.coli BL21 (DE3)中诱导表达出分子量约为37 ku重组蛋白,westemblot分析结果表明该蛋白能够与血清1、2、10、11和17型RA全菌体阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组蛋白为包被抗原建立间接ELISA方法,结果显示其具有良好的特异性和重复性,与RA超声裂解抗原ELISA方法的符合率达到77.5％.研究结果进一步验证了Camp蛋白具有良好免疫原性,并且为RA多种血清型共同抗原,在RA的检测及亚单位疫苗开发中具有良好的应用价值.     

内蒙古包头地区玉米秸秆黄贮调制技术及典对育肥羊饲喂效果的研究

旨在研究适合内蒙古包头地区玉米秸秆黄贮发酵的最佳条件,并评价玉米黄贮秸秆配方日粮对育肥羊的饲喂效果。采用三因素三水平正交试验,对黄贮发酵菌剂、发酵周期和发酵辅料等进行实验室研究,筛选最佳发酵组合;依据GB/T 20807—2006《绵羊用精饲料》标准,配制含不同比例秸秆黄贮的配方日粮,开展育肥羊饲喂试验,比较传统育肥羊饲料和玉米黄贮秸秆配方饲料对小尾寒羊的育肥效果。结果表明,3个因素对秸秆黄贮pH值影响的顺序为：发酵辅料〉发酵菌剂〉发酵周期,黄贮发酵条件最佳的组合为EM如金菌液秸秆发酵剂＋发酵25 d＋食盐。饲喂基础日粮中添加不同比例玉米秸秆黄贮的2个试验组羊只,其活体重、胴体重、单块眼肌面积显著大于饲喂传统育肥饲料的对照组羊只（P〈0.05）;饲喂基础日粮中黄贮添加比例为40%的试验组羊只,其饲料转化率显著高于对照组羊只（P〈0.05）;饲喂基础日粮中黄贮添加比例为20%的试验组羊只,其屠宰率显著高于对照组羊只（P〈0.05）;2个试验组羊只的日增重、大腿肌肉厚度、腰部肌肉厚度、系水力与对照组相比差异均不显著（P〉0.05）。综合考虑饲喂效果以及饲喂成本因素,在基础饲料中添加40%的玉米黄贮秸秆对小尾寒羊的育肥效果最佳。     

线虫fat-1基因密码子优化设计

本研究旨在优化线虫fat-1基因,使其在牛肌肉组织中高效表达,为进一步生产fat-1转基因肉牛提供目的基因。试验在不改变fat-1基因编码氨基酸序列的基础上,参考了11个牛肌肉蛋白相关基因的密码子使用频率,对fat-1基因进行了密码子优化。结果发现,共改变了65个碱基,涉及65个密码子、7个氨基酸,约占fat-1基因总碱基数的5.38%,G+C含量从45.08%上升到50.04%,且分布均匀利于基因的表达。结构预测结果显示,该优化后的基因能够在牛肌肉中高效表达。     

猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(CH-1R株)工厂化生产培养条件的研究

为提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)活疫苗CH-1R株的产量和疫苗的质量,本实验探索了PRRSV活疫苗CH-1R株在MARC-145细胞中大规模生产培养的最佳条件。将CH-1R株分别在3L和10L转瓶培养的MARC-145细胞中进行增殖试验,分析CH-1R株在不同接种病毒量和不同接种病毒时间的TCID50变化规律。结果表明,在3L和10L转瓶中,病毒的TCID50最高可达到107.0TCID50/mL以上。CH-1R株通过转瓶在MARC-145细胞中大规模增殖,为PRRSVCH-1R株的工厂化生产奠定了基础。     

Homeobox基因对毛囊生长发育作用机制的研究进展

Homeobox（Hox）基因作为一种重要转录因子,在调节动物体轴发育方面发挥着重要的作用。自Hoxc13基因被首次证明与毛囊生长发育有密切关系后,Hox基因家族其他成员也逐渐被认为在毛囊生长发育与周期变化过程中充当着一个重要角色。作者综述了Hox基因在毛囊生长中的作用机理,为今后绒毛用动物相关领域研究提供思路。     

猪表皮生长因子基因的遗传变异及其与产仔性状的相关性分析

本研究通过建立两次PCR扩增分型法,分析猪表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)基因第3内含子上的875bp插入片段在13个中外不同繁殖性能的猪种中的遗传变异,以及EGF基因在白色杜洛克×二花脸资源家系180头F2母猪中与繁殖性状的相关性。结果表明,不同类型中国地方猪种与西方商业猪种在EGF基因位点上存在偏态分布。在资源家系中该位点对总产仔数、产活仔数和断奶活仔数无显著影响(P0.05);尽管BB基因型的产活仔数和断奶活仔数分别比AA型多1.74和0.46头,但BB型的个体太少,各基因型间的均值差异不显著(P0.05);虽然产活仔数的a值和d值分别达到0.87和1.24头,但该基因位点的加性效应和显性效应并不明显。因此,需要利用更多的SNP位点和更多样本进一步了解EGF基因与繁殖性状的关联性。     

规模化奶牛场育成牛产污系数的测定

通过对华中地区重点监测点郑州市某千头奶牛场监测,制定出能表示该地区奶牛场育成牛产生污染物状况的产污系数.随机选择5头采食正常,健康,体重300 kg左右的育成牛,测定每头育成牛每天饲料采食量及饲料中粗蛋白、磷、铜、锌等指标,每天粪便产生量及粪中全氮、全磷、铜、锌、有机质等指标和每天尿液产生量及尿中COD、氨氮、全氮、全磷、铜、锌等指标,最后得出该奶牛场育成牛的年均产污系数为:氮126.02 g·head-1·d-1,磷60.94 g·head-1·d-1,有机质1966.18 g·head-1·d-1,铜0.143 g·head-1·d-1,锌0.953 g·head-1·d-1,COD 98.908 g·head-1·d-1,氨氮1.579 g·head-1·d-1.育成牛中COD、有机质、氮、磷、锌等污染物排出量较大,且育成牛中COD、氮、磷、铜、锌、氨氮和有机质等污染物排出量随季节变化有不同变化,一旦饲粮满足育成牛的需要,多余的部分将被排到粪尿中,造成营养物质的流失和污染物产生量的增加.     

我国牛轮状病毒的分离鉴定和疫苗研究进展

约50%的犊牛腹泻是由牛轮状病毒(Bovine Rotavirus, BRV)引起的,它制约着我国养牛业的发展.论文综述了牛轮状病毒毒株的分离、鉴定方法及疫苗研制的现状,并对BRV新型疫苗的发展趋势进行了展望.     

祁连山东段不同退化高寒草甸土壤有机碳密度研究

于2008年在祁连山东段天祝地区选取轻度、中度和重度3个不同退化程度的高寒草地,以土壤有机碳密度为研究对象,探讨高寒草地在不同退化程度干扰下土壤有机碳密度的变化特征。结果表明:随着高寒草地退化程度的加重,土壤含水量降低,容重和pH值增大;土壤有机质和全氮有相似的变化趋势,中度与轻度或重度退化草地土壤有机质和全氮差异显著(P<0.05);土壤有机碳密度在0-10 cm土层显著高于其他土层(P<0.05),并随着土层加深有显著的垂直变化趋势;不同退化程度草地在0-30 cm土层总土壤有机碳密度表现为中度>轻度>重度退化草地。     

两种运输车对驴运输应激的影响

本试验旨在研究改造运输车对缓解驴运输应激的效果。选取28头健康德州公驴,随机分为2组,从北京密云县运输至聊城市东阿县东阿黑毛驴研究所,路程约500 km,历时18 h。试验使用9.6 m长单层货车为运输车,对试验组(T)运输车进行改造,即加装顶层和双侧篷布、底部加装草帘和中部加装隔栏,对照组(C)不作处理。运输前后测定驴血液生化和激素指标,统计体重变化和发病驴数量。结果表明,与运输前相比,普通车组驴在落地当天检测到血清皮质醇(COR)、白蛋白(ALB)水平均显著升高(P<0.05),总蛋白(TP)、谷草转氨酶(AST)、热休克蛋白-90(HSP90)和肌酸激酶(CK)指标极显著升高(P<0.01),钙(Ca)浓度显著降低(P<0.05)。改造车组驴血液指标TP、AST和CK的变化范围低于普通车组。两组驴落地后血糖(GLU)水平均比运输前升高,但差异均不显著(P<0.05)。与运输前相比,改造车组驴落地后的体重减少低于普通车组;改造车组驴在落地后第10天平均体重接近运输前,而普通车组驴的平均体重在落地后第20天才基本恢复至运输前水平,即使用改造运输车辆可以尽早恢复体重。普通车组驴发病率为21.4%,改造车组为7.1%;两组均无死亡。综合上述结果,改造运输车可有效降低驴的运输应激,有利于提高动物运输福利,减少经济损失;本试验结果可为动物运输应激提供参考。