不同地域来源的家蚕微孢子虫DNA特异片段序列及同源性分析

利用碱裂解方法抽提到山东株系的家蚕微孢子虫 (Nosemabombycis,N .b)的基因组DNA ,通过PCR技术扩增得到了N .b的一段特异的DNA片段 ,经测序发现 ,该片段大小为 317bp。将其与日本株N .b和广东株N .b的序列比较得知 ,山东株N .b和广东株N .b ,山东株N .b和日本株N .b ,以及广东株N .b和日本株N .b之间的序列同源性分别为 94 .0 0 %、96 .2 1%、92 .11%。进一步聚类分析发现 ,山东株N .b和日本株N .b之间的亲缘关系更接近     

Adaptive evolutionary expansion of the ribonuclease 6 in Rodentia

Ribonuclease 6 (RNase6 or RNase K6) is a protein that belongs to a superfamily thought to be the sole verte‐brate‐specific enzyme known for a wide range of physiological functions, including digestion, cytotoxicity, angiogenesis, male reproduction and host defense. In our study, 51 functional genes and 11 pseudogenes were identified from 27 Rodentia species. Intriguingly, in the 3 main lineages of rodents there were multiple RNase6s identified in all species of Ctenohystrica, whereas only a single RNase6 was observed in other Rodentia species examined except for 2 species in the mouse‐related clade. The evolutionary scenario of “birth (gene duplication) and death (gene deactivation)” and gene sorting have been demonstrated in Ctenohystrica. In addition, bursts of positive selection, diversification of isoelectric point and positive net charge have been identified in Ctenohystrica, especially at two key sites that are involved in antimicrobial function. Site Trp30 has undergone positive selection and Ile45 has changed into other residues in Group B and Group C of the Ctenohystrica. Our results demonstrated a complex and intriguing evolutionary pattern of rodent RNase6, and indicated that functional modification may have occurred, which establishes an important theoretical foundation for future functional assays in rodent RNase6.     

PP1和PP2对鸡传染性喉气管炎病毒感染影响的研究

为研究化学小分子SRC抑制剂PP1和PP2对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染宿主细胞的影响,本研究将ILTV接种鸡细胞系LMH作为研究模型,检测了PP1和PP2对ILTV感染各阶段的作用。结晶紫染色结果显示,ILTV感染细胞中,与DMSO处理组相比,PP1和PP2处理组的细胞死亡均明显增多,表明PP1和PP2促进了ILTV感染介导的宿主细胞死亡;高内涵细胞筛选检测分析结果显示,在病毒感染24h时,PP1和PP2处理组EGFP荧光面积显著大于对照组(p<0.05),表明PP1和PP2可以促进ILTV的扩散,并且该现象不受ILTV中和抗体的影响,提示PP1和PP2可以促进ILTV的细胞-细胞间扩散;病毒特异性qPCR检测显示,PP1和PP2处理组的病毒基因组拷贝数与DMSO对照组相比无显著差异,PP1和PP2处理组之间的病毒基因组拷贝数也无显著差异(p>0.05),PP1和PP2对病毒复制无显著影响。为了进一步确定PP1和PP2促进ILTV细胞-细胞间扩散的具体作用方式,本研究利用多种颜色及理化性质不同的染料对LMH细胞膜、细胞质以及ILTV囊膜分别进行染色检测,结果显示PP1和PP2能够促进ILTV进入细胞,但对ILTV吸附细胞和细胞间胞质直接联系无显著影响。本研究初步确定了PP1和PP2影响ILTV感染的具体作用方式,为对其进一步分子机制研究奠定了基础。     

家畜毛色形成分子基础及应用研究进展

动物毛色是一种容易被识别的表型,也可作为筛查某些疾病的有效手段。毛色主要由黑色素细胞产生的真黑色素和棕黑色素的分布、比例和产生速率所决定。许多基因对黑色素的产生和分布起着重要调控作用,各基因间的不同基因型形成多种基本毛色、淡化毛色和花斑。此外,miRNA靶向结合毛色主效基因mRNA,诱导抑制/增强其转录翻译过程,从而调控毛色基因的表达,影响黑色素合成。文章简述了家畜调控毛色的主效基因黑色素皮质素受体1（MC1R）、野灰位点信号蛋白（ASIP）、原癌基因（KIT）、酪氨酸酶关联蛋白（TYRP）、小眼畸形相关转录因子（MITF）和内皮素受体B（EDNRB）的DNA序列多态性（不同基因型）与毛色性状、疾病之间的关系;介绍了毛色形成相关miRNA挖掘鉴定、miRNA调控毛色相关基因研究进展与毛色基因研究应用价值,旨在为今后研究家畜毛色机理提供理论依据。     

泡沫消毒剂在养殖场的临床应用研究

为考察泡沫消毒剂对鸡场的消毒效果,选取洛阳周边一家蛋鸡场进行试验。将戊二醛苯扎漠鞍溶液按1 : 100倍稀释,使用自吸式泡沫清洗一体机进行消毒,分别考察泡沫消毒后30 min对地面、墙面和料槽的消毒效果,结果表明,使用泡沫型消毒剂戊二醛苯扎漠钱溶液以1 : 100倍稀释消毒30 min后,消毒效果在99.93%以上,消毒效果良好,这种泡沫消毒方法值得临床推广应用。     

抗猪繁殖与呼吸综合征高免血清的研制

为研制用于治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征的高免血清,选取健康育肥猪作为免疫接种对象,用猪繁殖与呼吸综合征灭活苗和弱毒苗作基础免疫和强化免疫,通过优化免疫程序,制备出抗猪繁殖与呼吸综合征高免血清,并进行了临床治疗试验,结果总有效率为86.67%。表明采用这种方法制备猪繁殖与呼吸综合征高免血清是安全有效、切实可行的。     

基于高密度SNP芯片技术对中国西门塔尔牛SCD1基因与肉质性状的相关性分析

试验借助高密度SNP芯片技术在整个基因组范围内对223头中国西门塔尔牛群体进行基因分型,在SCD1基因上发现7个SNPs位点,对各SNP位点与西门塔尔牛肉质性状进行相关性分析。结果表明,SCD1基因的7个SNPs位点均与大理石花纹等级显著相关(P<0.05或P<0.01);A10050C、A13655G、C14790T和A15565G4个位点对剪切力影响显著(P<0.05);位点A13655G对肌内脂肪含量影响显著(P<0.05);位点A10050C、C14790T、A15565G不同基因型个体间脂肪颜色差异显著(P<0.05)。单体型分析结果显示,7个SNPs位点共构成6种单体型和14种单体型组合。单体型组合H3H6与高肌内脂肪含量极显著相关(P<0.01);单体型组合H6H6与优质大理石花纹极显著相关(P<0.01);单体型组合H4H6与高剪切力值显著相关(P<0.05);各单体型组合对肉色和脂肪颜色影响不显著。     

3种不同方法对肉牛胴体性状预测能力的比较研究

本研究为了寻求一种对肉牛胴体性状预测准确性较高的方法,运用DPS数据处理系统和SAS软件比较偏最小二乘回归、GM(1,N)灰色系统和BP神经网络3种常用的预测模型对肉牛胴体性状的预测能力。选择肉牛7个宰前生长性状(体高、体长、胸围、腹围、管围、宰前活体质量、平均日增体质量),对2个重要的胴体性状(胴体质量和净肉质量)进行预测。结果表明:偏最小二乘回归方法在肉牛胴体性状预测方面准确性最高;GM(1,N)灰色系统和BP神经网络预测准确度偏低。本研究还将3种预测结果相结合,取其均值,大大提高了预测的准确性。这一研究将为肉牛生产实践提供一定的科学参考。     

影响猪精子介导基因转移效果的因素研究

为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响。结果表明,PEI和TransFast转染剂能极显著提高猪精子转染效果,且PEI优于TransFast,而NanoFect转染剂包裹DNA不能转染精子。随着转染温度的升高,精子的活力和活率均明显下降,而转染率和内化外源DNA量基本保持稳定,而吸附外源DNA量呈下降趋势。环状DNA和线性化DNA在与精子共孵育后,两者的精子活力、活率、转染率和内化外源DNA量差异均不显著,精子吸附线性化DNA量极显著高于环状DNA量。综合分析表明,外源DNA形态对猪精子转染效果无显著影响;PEI和TransFast能够显著提高猪精子转染效果;共孵育温度以17℃为最佳,本结果为开展精子载体法制备转基因猪研究提供了基础试验依据。     

小鼠硫酸黏杆菌素中毒神经电生理时效变化

昆明系雌性小鼠尾静脉注射硫酸黏杆菌素7.5 mg/kg体重·12h,对照组注射生理盐水,连续7d,分别于给药后1,3,7,15 d观察小鼠的步态、体重、坐骨-胫神经的电生理指标变化,探究硫酸黏杆菌素中毒小鼠坐骨-胫神经动作电位时间-效应关系及敏感性指标.结果显示,黏杆菌素给药后1,3,7,15d与对照相比,坐骨-胫神经动作电位各指标随各时间点发生变化,阈值(TP)增加,分别为59.8％,60.5％,192.5％ (P＜0.01),70.1％;最大刺激强度(MI)增加,分别为3.63％,12.7％,100％ (P＜0.05),29.1％;时程(CAPD)增加,分别为15.1％,11.5％,52.8％ (P＜0.05),20.6％;潜伏期(CAPL)增加,分别为9.0％,9.0％,14.6％ (P＜0.05),11.2％;波幅(CAPA)降低,分别为0.92％、16.2％、47.6％ (P＜0.01)、38.8％(P＜0.05);传导速率(NCV)减低,分别为7.6％,7.5％,12.7％ (P＜0.05),9.3％;给药后在第1天出现重复性动作电位.结果证实,硫酸黏杆菌素中毒后,小鼠坐骨-胫神经电生理改变存在时效性变化,CAPA较为敏感.