猪链球菌细胞外蛋白因子Ef基因的克隆与原核表达

采用分子克隆手段,将Ef全长基因克隆至表达载体pGEX-6p-1的Ptac启动子下游,电击转入大肠杆菌E.cohi BL21(DE3)中表达。经PCR扩增和蛋白质凝胶电泳鉴定,表明该EF蛋白获得有效表达,为进一步构建猪链球菌Ⅱ生物工程疫苗提供前期载体。     

Effect of long non-coding RNA MEG3 on invasion and migration of colorectal cancer cells

AIM: To investigate the expression of long non-coding RNA maternally expressed gene 3(MEG3) in colorectal cancer(CRC) cells, and to observe the effect of MEG3 on the invasion and migration of CRC cells. METHODS: The levels of MEG3 in human normal colon cell NCM460 and CRC cells SW48 and LoVo were detected by real- time PCR. MEG3 was over-expressed by plasmid transfection, and the effects of MEG3 on the invasion and migration of SW48 and LoVo cells were analyzed by Transwell assay and wound healing assay. The expression of matrix metalloproteinase(MMP) family proteins was determined by Western blotting. RESULTS: The level of MEG3 was down-regulated in CRC cells compared with normal colon cell NCM460. The invasion and migration of CRC cells were reduced after MEG3 over-expression. Transwell invasion and migration assays showed that the numbers of transmembrane SW48 and LoVo cells were smaller in MEG3 over-expression group than control group(CONCLUSION: The expression of MEG3 is down-regulated in CRC cells. Over-expression of MEG3 inhibits the invasion and migration of CRC cells. TIMP-2, MMP-2 and MMP-9 might play an important role in this regulation.     

近红外漫反射光谱法用于不同人参种子的鉴别

目的建立近红外漫反射光谱法鉴别不同种类的人参及西洋参种子。方法利用近红外光谱(NIRS)法对不同产地和种类的人参及西洋参种子样品进行聚类分析并建立了鉴别分析模型。结果聚类分析结果良好,所建立的鉴别分析模型能有效地判别人参及西洋参种子的类别。结论近红外光谱法能够实现人参及西洋参种子的快速无损分析,为区分不同种类的人参及西洋参种子提供了一个客观的评价方法。     

F-苷肽对不同条件下C2C12细胞糖消耗的影响

本试验主要观察了F-苷肽对体外正常状态和氧化应激态的C2C12小鼠成肌细胞葡萄糖消耗及对细胞活力的影响，并考察了F-苷肽对胰岛素促进C2C12小鼠成肌细胞葡萄糖消耗的影响。结果发现F-苷肽对正常的C2C12细胞并无促进糖消耗的作用；F-苷肽与胰岛素合用在一定程度上能够使胰岛素促进糖代谢的作用增强，具有类似胰岛素增敏剂的作用；本试验采用不同浓度的H2O2诱导C2C12细胞使其处于氧化应激的状态，在此条件下，F-苷肽能够促进氧化应激态C2C12细胞的糖代谢，缓解氧化应激对细胞造成的损伤，增加细胞活力。     

苹果叶片总蛋白提取及其双向电泳分析

蛋白质提取方法和电泳条件的建立是蛋白质组学研究中双向电泳分析的关键。通过比较不同提取方法,包括酚/SDS抽提、TCA-丙酮沉淀法、甲醇/醋酸铵沉淀法以及改良HB-酚抽提方法。此外,还优化了样品上样量、等电聚焦程序设置等条件。从所得2-D图谱分离效果来看,改良HB-酚抽提方法所得蛋白点数最多,2-D图谱背景清晰、分离效果好,明显优于其他3种方法。300μg上样量可作为苹果叶片总蛋白2-DE分析的理想的上样量,同时优化了等电聚焦程序,最终得到的2-D图谱分离效果较为理想。该研究的开展也为苹果叶片蛋白质组学后续研究奠定了基础。     

NEFA和BHBA对体外培养的脂肪细胞HSL、ADPN mRNA表达的影响

在体外培养的牛脂肪组织和脂肪细胞中,分别添加5个浓度梯度的NEFA和BHBA,均设3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测不同浓度的NEFA和BHBA对牛脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明:NEFA在一定浓度范围内(0.2~0.8 nmol/L)对ADPN mRNA表达有显著促进作用并呈剂量依赖性,而高浓度(>1.6 nmol/L)时又显著下调其表达;0.2~0.8 nmol/L NEFA对HSL mRNA的表达有抑制作用,呈剂量依赖性,但在高浓度时(>0.8 nmol/L)反而促进了其表达(P<0.05)。低浓度的BHBA对HSL mRNA的表达无显著抑制作用,高浓度(1.2 mmol/L)的BHBA显著下调HSL mRNA的表达,并呈剂量依赖性;低浓度(<0.6mmol/L)的BHBA对ADPN mRNA的表达无明显作用,但高浓度的BHBA(>0.6 mmol/L)对ADPN mRNA的表达具有明显的抑制作用(P<0.05)。结论:代谢中间产物可通过促进ADPN mRNA或抑制HSL mRNA的表达来调节脂肪代谢。     

静液压传动拖拉机定速巡航控制系统设计与试验

针对现有农机速度调节策略功率匹配度不高、燃油经济性差的问题,以静液压传动拖拉机为平台,基于CAN总线设计了拖拉机定速巡航控制系统.该系统由拖拉机工况采集、负载检测、油门控制、变量泵排量调节、作业负载调节、通信等模块组成.设计了油门调节机构和负载调节装置,获取并解析了拖拉机工况数据,建立了静液压传动拖拉机油门开度、变量泵...     

氮素水平对科尔沁沙地羊草叶片氮代谢及产量的影响

合理的施氮量可以提高羊草氮素代谢关键酶活性,促进羊草氮素积累和利用,进而获得高产.为确定科尔沁沙地羊草适宜施氮量及其促高产的生理机制,采用随机区组设计,选取两块样地分别追施0、50、100、150、200 kg/hm2氮肥(纯N),分别用No、N1、N2、N3、N4表示,5月20日测定羊草叶片氮代谢相关酶活性及含氮物质含量,7月10日测定羊草产量.结果 表明:羊草产量、硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)、谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性和游离氨基酸(AA)、可溶性蛋白(SP)含量均随施氮量的增加而呈现先增加后降低的变化趋势,其中NR、GS、GOT、GPT活性和AA含量在N3水平下达到最大值;羊草产量和可溶性蛋白含量在N2水平下达到最大值.结论:在科尔沁沙地生境下追施150 kg/hm2氮肥(纯N)羊草叶片的氮素代谢能力最强,最有利于羊草干物质产量的积累.     

饲料型小黑麦新品系种子产量及籽粒营养价值的分析

以甘肃省临洮县种植的10份饲料型小黑麦新品系为试验材料,甘农1号小黑麦和新小黑麦5号为对照,研究了小黑麦材料的种子产量及籽粒的营养价值,采用灰色关联度法对参试材料的种子产量与营养品质进行了综合评价。结果表明:不同小黑麦材料间种子产量和营养价值均存在显著性差异,Z49的种子产量最高,达11 133.50kg/hm~2,Z48的粗蛋白含量最高,为14.04%,Z5的淀粉含量最高,为65.69%,Z35的赖氨酸含量最高,为0.46%,Z3的粗脂肪含量最高,为2.37%。综合分析表明,Z48和Z49的综合性状最佳,其关联度分别为0.713 6和0.786 4,Z19和Z23的综合表现较差。