利用实时荧光PCR 方法检测香蕉软腐细菌

 由Dickeya spp.引起的香蕉细菌性软腐病是近年来在中国广东发生的一种严重危害香蕉的病 害,检测方法的建立和应用是防止病害传播和实时防治的重要手段。依据报道的Dickeya spp.通用引物, 建立了用于香蕉细菌性软腐病发病植株和带菌土壤检测的实时荧光PCR 方法。优化后的检测体系对香蕉 软腐细菌（XJ8-3-3）靶片段克隆质粒DNA 的检测灵敏度可达到2.4 × 10^-5 ng · μL^-1,对菌悬液的检测灵敏 度可达到4.0 × 10² cfu · mL^-1,而常规PCR 对其检测的灵敏度为2.4 × 10^-3 ng · μL^-1 和4.0 × 10⁴ cfu · mL^-1, 实时荧光PCR 的灵敏度比常规PCR 高100 倍。利用实时荧光PCR 能够快速的检出香蕉细菌性软腐病发 病植株和带菌土壤中的病原菌量,对梯度稀释的菌悬液接种的带菌土壤检测结果表明,可检测到病菌DNA 最低含量为0.35 pg · L^-1。该方法适用于对香蕉软腐病菌的检测和监控。     

绿色技术助力经济林果提值增效

随着经济林果深加工产业的蓬勃发展,大量的加工废弃物随之产生,造成了资源浪费和环境污染,科学、合理地利用林果副产物是推动经济林果产业融合发展的重要举措。从经济林果加工副产物再利用角度出发,综合分析了林果加工副产物的经济价值,着重梳理了目前林果副产物加工存在的问题,综述了高效绿色加工技术在副产物的提取、分离、纯化和干燥等方面的应用前景,以期为经济林果副产物再加工利用提供指导。     

高能饲粮对育成期蛋鸡肝脏miRNA表达谱的影响

本研究利用高能和低能饲粮饲喂育成期蛋鸡,运用small RNA测序方法对肝脏中miR-NA进行检测,对其表达量进行分析,对差异表达miRNA进行靶基因预测,并对差异表达的预测靶基因进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.结果表明:与低能组相比,高能组有2个miRNA表达显著上调...     

冷等离子体对单核增生李斯特菌的杀菌机理

【目的】作为一种新兴的非热灭菌技术,冷等离子在食品行业中得到了广泛的应用。通过探讨冷等离子体对细菌细胞膜的破坏效果,阐述其抗菌机制,为冷等离子体在食品行业的应用提供参考。【方法】本研究以单核增生李斯特菌（Listeria monocytogenes,LM）为试验菌株,研究冷等离子体处理对LM形态和胞内物质的影响,阐述LM细胞膜完整性的变化;冷等离子体处理后,通过测定细胞膜脂肪酸含量和类型的变化,比较8-苯胺-1-萘磺酸荧光强度的改变,反映冷等离子体对LM细胞膜流动性的影响。通过测定碘化丙啶荧光、电导率和β-半乳糖苷酶活性的变化,观察冷等离子体对LM细胞膜通透性的改变。最后,通过检测胞内活性氧和活性氧相关基因表达量的变化,阐明冷等离子体对LM细胞膜造成的氧化损伤。【结果】冷等离子体处理后,LM细胞膜表面观察到破损变形的结构,胞内蛋白质和DNA分别下降了68 mg?mL^-1和14 μg?mL ^-1,证明冷等离子体破坏了细胞膜的完整性。冷等离子体处理使LM细胞膜中不饱和脂肪酸的含量从40.17%上升至53.91%,饱和脂肪酸的含量从53.68%下降到41.57%,8-苯胺-1-萘磺酸荧光强度从8.99下降到3.73,说明冷等离子体处理后细胞膜的流动性增加。此外,冷等离子体处理后,碘化丙啶可以透过细胞膜,与胞内遗传物质结合发出红色荧光,电导率由0.15 mS?cm^-1上升至0.33 mS?cm^-1,β-半乳糖苷酶活性也发生了明显的变化,OD_420nm从0.274提高至0.683,说明LM细胞膜通透性提高。胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）荧光和荧光强度的变化说明,冷等离子体刺激细胞膜上ROS的产生,因此对细胞膜造成了氧化损伤。qRT-PCR结果显示冷等离子体处理下调了perR和recA的相对表达量,分别下降43.29%和52.71%,而sigB的相对表达量上调了89.42%,揭示冷等离子体处理条件下,微生物在基因层面的氧化应激和调控机制。【结论】冷等离子体的活性基团通过对细胞膜的作用,破坏LM的细胞活性,起到了抑制效果。     

Are humic substances soil microbial residues or unique synthesized compounds?A perspective on their distinctiveness

Humic substances(HS),which are defined as a series of highly acidic,relatively high-molecular-weight,and yellow to black colored substances formed during the decay and transformation of plant and microbial remains,ubiquitously occur in nature.Humic substances represent the largest stable organic carbon pool in terrestrial environments and are the central characteristic of the soil.However,the validity of the HS concept and the justification of their extraction procedure have been recently debated.Here,we argue that the traditional humic paradigm is still relevant.Humic substances are distinctive and complex because the extracted HS formed during the humification are chemically distinct from their precursors and are heterogeneous among soils.By reviewing the concept,formation pathways,and stabilization of HS,we propose that the key question facing soil scientists is whether HS are soil microbial residues or unique synthesized compounds.Without revealing the distinctiveness of HS,it is impossible to address this question,as the structure,composition,and reactivity of HS are still poorly known owing to the heterogeneity and geographical variability of HS and the limits of the currently available analytical techniques.In our view,the distinctiveness of HS is fundamental to the soil,and thus further studies should be focused on revealing the distinctiveness of HS and explaining why HS hold this distinctiveness.     

一株羊源尸毒梭菌的鉴定及生物学特性研究

为探究羊源尸毒梭菌的生物学基本特性，进行生理生化分析、16S rDNA基因扩增、动物回感试验、耐药表型和耐药基因检测等试验。结果显示，菌株LJH-1为革兰阳性菌。PCR扩增获得长度为1 023 bp的片段。LJH-1与尸毒梭菌C4菌株聚类，从而判定LJH-1为尸毒梭菌。试验组小鼠全部死亡。小鼠肝中央静脉充盈大量红细胞，炎性细胞浸润，肾间质血管充血，肠黏膜上皮细胞脱落。LJH-1对头孢噻肟、氨苄西林等敏感，对头孢拉定、阿莫西林等耐药，并检出ant（3″）-Ia、aac（3）-IIa、aph（3'）-IIa、Sul2、Sul3和TEM耐药基因。这为该细菌性疾病的检测和防治提供了科学资料。