抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。     

绵羊妊娠期胎儿垂体促性腺激素细胞的发生发育与血浆B-LH浓度的变化关系

为了研究绵羊胚胎期垂体中促性腺激素细胞的发育及功能变化，分别在胎儿发育的第60、90、120天和出生期采集垂体和血液，利用免疫荧光标记和生物学测定方法研究了垂体中促黄体激素β亚单位（LH-β)的表达和血液中LH生物活性的变化。结果证明：在胚胎发育的第60天，在腺垂体可观察到少量散在的LH-β阳性细胞；在胎儿发育的90d，LH-β阳性细胞率显著高于60d(P＜0．01)时，且均匀分布于整个腺垂体；在胎儿发育的120d，LH-β阳性细胞率达到高峰，但出生期又显著降低。胚胎发育过程中，垂体的LH-β细胞阳性率与血液中B-LH浓度呈现相似的变化趋势，且无显著的性别差异。以上研究征明绵羊垂体促性腺激素细胞的功能在胚胎中期之后最活跃，在后期垂体中LH-β阳性细胞率和血浆BLLH浓度都有降低，这种波动可能与胎儿垂体-性腺物的负反馈调节机制的建立有关。     

浅谈如何培养和提高学生英语阅读理解的能力

在大学英语教学过程中,培养和提高学生英语的阅读理解能力是非常重要的环节,但笔者在教学中发现：大多数学生的阅读能力都比较薄弱。针对这种普遍现象,作为大学英语教师应该积极探索解决方法,充分利用精读课、泛读课及选择合适的阅读材料等来激发学生阅读的兴趣,以达到快速提高英语水平的目的。     

甜叶菊重要农艺性状关联分析

为挖掘与甜叶菊重要农艺性状显著相关标记,利用相关标记辅助甜叶菊育种。本研究对93份甜叶菊种质材料11个重要农艺性状描述性统计,并利用58对EST-SSR引物对其扩增,群体遗传结构分析,基于以上分析采用Tassel 5.0的GLM (generalized linear model)模型进行EST-SSR标记与甜叶菊11个重要农艺性状的关联分析。分析检测到10个标记与6个农艺性状极显著相关,各标记对表型变异的解释率范围为0.071 6～0.189 3,部分标记与2～3个农艺性状极显著关联。     

乳山湾东流区海水营养盐消长与盐度的关系

利用数理统计的方法，对乳山湾东流区６－９月间的水化学，水文和生物观测数据进行处理，结果表明６－９月间硝酸盐与盐度有着极显著的负相关关系，６月和９月亚硝酸盐和氮氨与盐度呈显著性相关，而７月和８月养殖高峰期间呈弱相关关系。     

皖西南春棉田主要害虫和天敌种群时序动态格局

为探索直播春棉田害虫与其天敌之间的相互作用和竞争共存机制,采用直接观察法,系统研究了棉田主要害虫和天敌种群的时间动态变化,及其生态位宽度和生态位重叠值。研究结果表明,在直播春棉的不同生育期,棉田害虫和天敌的优势种不同。主要害虫和天敌的发生高峰期多集中在6—7月,而棉蚜高峰期在5月下旬,棉叶蝉高峰期在9月下旬。不同种群的时间生态位不同,害虫中棉盲蝽的生态位宽度最大,其次是棉铃虫,棉叶蝉和棉叶螨的生态位宽度较小;天敌中蜘蛛类天敌的生态位宽度最大,其次是小花蝽,黑襟毛瓢虫的生态位宽度最小。而黑襟毛瓢虫和瓢虫类天敌与棉蚜、棉叶螨生态位重叠度较大。因此,皖西南棉区直播春棉田可利用瓢虫类天敌抑制棉蚜和棉叶螨的危害,保护并利用好蜘蛛类天敌,需重点防治棉盲蝽和棉铃虫。     

珍稀树种香果树的利用价值及实用繁殖技术

香果树是我国特有单种属珍稀阔叶树种,属国家Ⅱ级重点保护野生植物,具有较高的推广价值。结合生产实践经验和目前有关科研进展,综合论述了香果树的开发利用价值以及关键培育技术,为开发利用香果树提供了科学理论基础。     

Development and characterization of monoclonal antibodies to subgroup A avian leukosis virus

Avian leukosis virus subgroup A (ALV‐A) is a retrovirus which infects egg‐type chickens and is the main pathogen of lymphoid leukosis (LL) and myeloid leukosis (ML). In order to greatly enhance the diagnosis and treatment of clinical avian leukemia, two monoclonal antibodies (MAbs) to ALV‐A were developed by fusion between SP2/0 and spleen cells from mice immunized with expressed ALV‐A env‐gp85 protein. Using immunofluorescence assay (IFA), two MAbs reacted with ALV‐A, but not with subgroups B and J of ALV. Western blot tests showed that molecular weight of ALV‐A envelope glycoprotein recognized by MAbs was about 53 kD. Isotyping test revealed that two MAbs (A5C1 and A4C8) were IgG1 isotypes. These MAbs can be used for diagnosis and epidemiology of ALV‐A.     

白菜EST-SSR信息分析与标记的建立

 数量迅速增加的EST为开发新的SSR标记提供了宝贵的资源。本研究对4 584条白菜EST进行了搜索, 共检索出474个SSR, 检出率为10.3% , 包括40种重复基元。其中二核苷酸和三核苷酸重复单元的EST-SSR占主导地位, 二者出现的频率基本相近, 占总SSR的近83%; 其它重复类型所占比例均不足5%。GA和GAA是二、三核苷酸中的优势重复类型, 分别占二、三核苷酸重复类型的71.5%和37.5%。设计了15对EST-SSR引物, 在合适的PCR反应体系下, 以构建EST的白菜自交系A的DNA为模板, 对设计的EST-SSR引物进行筛选, 发现15对EST-SSR引物都能扩增出产物。进一步用这些可扩增的引物对28个白菜品种进行PCR扩增, 发现7对引物显示多态性, 占引物总数的46.7%。此结果表明, 根据EST建立EST-SSR标记是一条简便而又有效的途径。     

Two-dimensional Electrophoresis Analysis of Proteins in Response to Cold Stress in Extremely Cold-resistant Winter Wheat Dongnongdongmai 1 Tillering Nodes

The overwintering survival ratio of the cultivar Dongnongdongmai 1 with strong cold-resistance in paramos of Heilongjiang Province in China are over 85%. The tillering nodes are the most important organs for overwintering survival of winter wheat, because there are more substances associated with cold resistance in tillering nodes than those in leaves and roots. Proteins in the tillering nodes of the cold-resistant cultivar Dongnongdongmai 1 grown under field conditions with or without any low-temperature stress were analyzed by 2–dimensional electrophoresis and identified by mass spectrometry. In the range of pH 4–7, the expression of 37 proteins showed obvious difference (±more than two fold) in the proteomic maps of cold-stressed and non-stressed tillering nodes, including a new protein spot. All proteins exhibiting the difference in expression were identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, followed by a database search for protein identification and function prediction. Five groups of proteins were confirmed, namely stress-related proteins (22%), metabolism-associated proteins (35%), and signaling molecules (24%), cell wall-binding proteins (5%), unclear proteins (14%). This indicated that tillering node cells supported the energy requirements of plant growth and stress resistance by signal transduction adapting to metabolism and structure.