New insights into the genetics of EBLV-1 from Germany

Previous epidemiological studies on EBLVs indicated a distinct geographical distribution of EBLV-1 in Germany. In this study, 48 isolates were selected to further investigate the spatial and temporal distribution of EBLV-1 variants in Germany. The nucleoprotein-gene (N), the nucleoprotein-phosphoprotein spanning untranslated region (NP-UTR) and the UTR between G- and L-gene of each isolate were sequenced using direct cycle sequencing. Results of the subsequent phylogenetic analysis of the N-gene confirmed previous studies on EBLVs, showing a high sequence identity among German EBLV-1a isolates, and a correlation between genetic and temporal and spatial distance, respectively, was shown. Our results indicate that the GL-UTR is not suitable for phylogenetic analyses. Interestingly, 6 nt insertions in two isolates as well as a single nucleotide insertion in a different isolate were detected in the N-P UTR. Within the UTR between G- and L-gene one isolate showed a 35 nt deletion. The effect of those changes on viral properties remains elusive as such mutations have not been described for lyssaviruses before.     

The occurrence of a reovirus variant in a German broiler flock

Broilers deriving from a parent flock, which had been effected in the 6th. month of hatching egg production, show arthritis beginning with the 12th day of life. The tarso-metatarsal joint has been affected. Birds show stunting. Body weights at slaughter and feed conversion of the affected flocks were reduced. The percentage of condemned birds before slaughter was highly increase and came up to 3-5%. Chickens of other breeder flocks, which were reared with the diseased birds, showed viral arthritis at an age of 18-20th day of life. The boilers derived from parent flocks which had been vaccinated twice during the with a 1133 reo live vaccine and before laying with an oil based vaccine of the antigen type WVU. A reovirus has been isolated (isolate K 171/87), which caused viral arthritis in 1133-immune day old chicks after parenteral and oral application. Infection of these chickens with the pathogenic reovirus of the antigen type 1133 didn't cause a disease. Also by serological examinations it was shown, that the reo-isolate K 171/87 possesses a different antigenicity. The kind of occurrence indicates, that this reovirus infection has been transmitted vertically from one parent flock and it spread laterally to chickens of other parent flocks in broiler farms.     

Einfluß von Penicillin in hoher Konzentration auf Wachstum und Sauerstoff-Aufnahme von Erbsenwurzeln bei Kultur in vitro

Zusammenfassung Einleitend wird eine Übersicht über die wichtigste Literatur zur Frage der Penicillin-Wirkung auf höhere Pflanzen gegeben. Eigene Versuche beschäftigen sich mit der Beeinflussung von Wachstum und Atmung in vitro kultivierter Erbsenwurzeln durch Penicillin in hohen Konzentrationen. In Übereinstimmung mit der Literatur wurde festgestellt, daß Erbsenwurzeln Penicillin in das Gewebe aufnehmen. Durch 3,75 · 10^–4 bis 1,2 · 10^–2 g Penicillin je ml Nährlösung werden Wachstum und Trockenmasse-Bildung der Wurzeln mit steigender Konzentration zunehmend stark gehemmt. Auf die Atmung der Wurzeln hat Penicillin einen bedeutend geringeren Einfluß; bis zu einer Konzentration von 3 · 10^–3 g/ml betrug die auf Trockenmasse bezogene O₂-Aufnahme selbst nach siebentägiger Behandlung noch 80% der Kontrollwerte. Erst bei längerer Einwirkung sehr hoher (bereits hypertonischer) Penicillin-Konzentrationen geht auch die O₂-Aufnahme deutlich zurück. Zur Sterilhaltung von Wurzelkulturen ist Penicillin in höheren Konzentrationen dann anwendbar, wenn Stoffwechselvorgänge, die auch ohne wesentliches Wachstum normal ablaufen, untersucht werden sollen.

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Summary Introduction reviews the most essential literature concerning the effects of penicillin upon higher plants. Experiments deal with the influence of high penicillin concentrations upon growth and respiration of pea roots cultivated in vitro. In accordance with literature uptake of penicillin into the tissues of pea roots could be proved. By concentrations from 3,75 · 10^–4 up to 1,2 · 10^–2 g penicillin per ml nutrient solution growth and dry matter production in the roots are strongly depressed with increasing concentration. Effects of penicillin upon respiration are considerably smaller; up to concentrations of 3 · 10^–3 g/ml the O₂-uptake per unit dry matter remained within 80% of the controls, even after seven days' treatment. Only after longer treatment by very high (hypertonic) penicillin concentrations the O₂-uptake will be distinctly depressed. Penicillin may be applied with higher concentrations for sterilizing root cultures if meta bolic processes are to be investigated which proceed normally without substantial growth.

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. in vitro, . , . ( 3,75·10^–4 1,2·10^–2 1 ) , . ; 3·10^–3 / ( ), , 80% . () . , , .

     

Einfluß verschiedener Kulturbedingungen auf Wachstum,Entwicklung, Sauerstoffverbrauch und andere Eigenschaften der Wurzeln vonPisum sativum L.

Zusammenfassung Von steril angezogenen, 3 Tage alten Erbsenkeimlingen wurden Wurzelkulturen in einer modifizierten Nährlösung nach Bonner und Addicott ohne und mit Zusatz von 2 · 10^–8 M/l Dichlorphenoxyessigsäure (2,4-D) angelegt. Das Wachstum von Keimlingswurzeln, normalen und 2,4-D-Kulturwurzeln wurde quantitativ analysiert. Die von Brown und Wightman (1952) gefundene Abhängigkeit des Wachstums von der Ausgangslänge der isolierten Wurzeln gilt auch noch für über 10 mm lange Wurzelspitzen. Durch 2,4-D werden Erbsenwurzeln in Kultur viel stärker beeinflußt als Maiswurzeln (Kandler 1950); in Lösungen mit 1 · 10^–7 M/l 2,4-D wachsen Erbsenwurzeln nicht mehr.Die ersten fünf, jeweils 2 mm langen Segmente der drei Wurzeltypen wurden durch Zellenzahl, Frischgewicht, Trockengewicht, Wassergehalt und Gehalt an Protein-Stickstoff (PN) charakterisiert. Bei Kultur in vitro wird die Entwicklung der Wurzeln in bestimmter Weise verändert, vor allem werden die Differenzierungsvorgänge beschleunigt; in besonderem Maße ist dieses in 2,4-D-haltiger Nährlösung der Fall. Dabei ist der Unterschied zwischen Keimlingswurzeln und Kulturwurzeln größer als zwischen den beiden Arten von Kulturwurzeln (ohne und mit 2,4-D).Nach Übertragung der in 2 mm lange Segmente zerteilten Wurzeln in saccharosehaltige Lösung nimmt die Trockenmasse gewöhnlich zu, das Spitzensegment mit dem Wurzelmeristem ausgenommen, das an Trockenmasse verliert. In anorganischer und in citrathaltiger Lösung tritt stets ein Gewichtsverlust ein.Der Sauerstoff-Verbrauch der verschiedenen Wurzeltypen ergibt je nach der Bezugsgröße ein unterschiedliches Bild. Im allgemeinen folgt der in 8 Stunden gemessene O₂-Verbrauch, bezogen auf gleiche Stückzahl, den Veränderungen des Trockengewichtes in dem zur Atmungsmessung benutzten Medium, z. B. steigt die O₂-Aufnahme in Sacharose-Lösung im allgemeinen an, doch kommen Ausnahmen von dieser Regel vor. Bezogen auf gleiche Zellenzahl, nimmt der O₂-Verbrauch in den meisten Fällen vom ersten Segment an laufend zu, bezogen auf PN, ergibt sich ein Maximum in einem bestimmten Segment, das bei den drei Wurzeltypen durch das erste Auftreten von Xylemelementen gekennzeichnet ist. Bei Kulturwurzeln ist es das zweite (2–4 mm), bei Keimlingswurzeln das vierte (6–8 mm) Segment.

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Summary Excised roots of 3 days old pea seedlings were cultivated in sterile nutrient solutions (Bonner and Addicott) with and without addition of 2 · 10^–8 M/l dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). Quantitative analysis of growth of seedling roots and roots from normal and 2,4-D solutions revealed that relations between elongation and initial length of isolated roots, as found by Brown and Wightman (1952), are valid even for root tips longer than 10 mm. Cultivated pea roots being much more influenced by 2,4-D than maize roots (Kandler 1950) do not exhibit any growth in solutions with 1 · 10^–7 M/l 2,4-D.The first five segments of 2 mm length from the above named three root types were defined by number of cells, fresh-weight, dry-weight, water content, and content of protein nitrogen (PN). Cultivation in vitro changes the development of roots accelerating first of all the processes of differentiation, in particular in solutions with 2,4-D. The difference between seedling roots and cultivated roots is greater than that between both types of cultivated roots (with and without 2,4-D).Dry matter of roots dissected in 2 mm long segments ordinarily increases after translocation into sucrose solutions, except the tip segments with root meristem which looses dry-weight. Loss of dry-weight always happens in inorganic and citrate solutions.Oxygen is consumed in different manner by the different root types, results depending from relation system. O₂-uptake measured over 8 hours, if related to equal number of segments, in general follows the changes of dry-weight in the medium used for respiration measurement; e.g. in sucrose solutions O₂-uptake generally increases exceptions, however, may occur. If related to equal number of cells, O₂-consumption in most cases increases continuously from the first segment on; if related to PN, a maximum occurs in a certain segment being defined by the first appearance of xylem elements, i. e. the second segment in cultivated roots (2–4 mm), the fourth one (6–8 mm) in seedling roots.

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am ¶rt;au . - (2,4-) 2 · 10^–8 /. . (Brown and Wightman 1952) 10. 2,4- , (Kandler 1950); 1 · 10^–7 / . 5 ( 2) , , «» . in vitro ; ; , 2,4-. , . (2 ) ; , . , . . O₂, 8 , , ; . O₂ , . O₂, , , . «» , , . (2–4), — (6–8).