多功能根际生防促生放线菌的分离鉴定及其对辣椒的益生效果

从健康辣椒根际土壤筛选具防病促生功能的菌种并应用于生物障碍土壤,可为辣椒提质增产和根腐病的防治提供优质的菌剂资源。本研究以辣椒根腐病的病原菌——腐皮镰孢菌（Fusarium solani）为靶标菌,采用平板对峙法筛选优良生防菌株,对其固氮、溶磷、解钾、分泌3-吲哚乙酸（3-indole acetic acid,IAA）、产铁载体、产纤维素酶和蛋白酶、利用酚酸类连作障碍物质等能力进行定性和定量测定。采用形态学、生理生化及16S rRNA基因序列对分离菌株进行鉴定,并采用田间原位栽培试验检测其生防和促生效果。结果表明,从设施连作抗病辣椒根际土中获得6株具有抑菌作用的放线菌,通过定性、定量测试发现菌株G-1拮抗效果最强,其对设施蔬菜5种常见病原菌均具有较好的抑制效果,抗菌谱广,且具有分泌IAA、产铁载体、产纤维素酶和蛋白酶、溶解有机磷、利用酚酸类化感物质等特性。结合形态学、生理生化及16S rRNA进化树分析结果,将其鉴定为弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）。田间原位栽培试验显示,G-1菌剂对辣椒根腐病具有较好的防病作用,可显著降低根腐病的病情指数,促进辣椒根系生长,且可使辣椒增产31.04%。研究表明,弗氏链霉菌G-1具有优良的防病促生功能,其固体菌剂的田间应用对辣椒根腐病具有较好的防治效果,且对辣椒具有明显的促生增产作用,可作为辣椒益生菌剂的候选菌株资源。     

冬小麦双覆条播试验初报

试验表明,双覆条播与常规露地条播相比,当季增产率为１６．４８ ％ ,潜在增产率为１１ ．５８ ％ ,理论增产率为２８ ．０６％ ,而且增强了小麦根系生长,地膜还可被下茬作物再利用。     

13种抗生素类药物对大肠杆菌的体外抑菌试验

研究13种抗生素类药物对大肠杆菌体外抑菌的作用。通过在M-H琼脂平皿上贴药敏片,测量抑菌圈的直径来确定药物的抑菌作用。结果表明大肠杆菌对大观霉素、硫酸安普霉素、硫酸粘菌素、左氧氟沙星和乳酸环丙沙星表现出中度敏感,其它表现为低敏感度或者没有抑菌效果。     

土壤微生物量及养分对设施农业种植年限的响应

以辽宁省朝阳市喀左县公营子镇番茄种植大棚不同种植年限0～20 cm耕层土壤为研究对象,采用分年限取样法,取O、1、5、10、15、20年以上的土壤样本,利用熏蒸提取法和常规方法,研究不同种植年限大棚耕层土壤养分和微生物量的变化,以期为保证设施农业的可持续发展提供参考依据.结果 表明:随着种植年限增加,朝阳地区设施农业土壤随种植年限增加多数养分呈先上升后下降的趋势,土壤微生物量碳(SMBC)先增加后下降,在5年时达到峰值,比1年高17.3％;土壤微生物量氮(SMBN)则呈先下降后上升的趋势,峰值出现在20年,比1年高39.1％;土壤微生物量磷(SMBP)呈先下降后突然上升再下降的趋势,峰值出现在10年.朝阳地区设施土壤养分在种植过程中累积严重,应抓住5～10年的时间节点进行合理耕作.     

郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎治疗效果的研究

为了研究郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎的治疗效果,从张家口顺德猪场选取患有传染性胃肠炎的成年长白猪20头,随机分为郁金散加减方低剂量组、郁金散加减方高剂量组、西药组和对照组,每组各5头。郁金散加减方组每天灌服郁金散方剂,早晚各1次,低、高剂量组分别按6、7mL/kg体重给药;西药组每天灌服金刚乙胺,颈部皮下注射氟苯尼考,早晚各1次;对照组正常饲喂,不给药。7d后观察临床症状和生长性能,测定血常规、血清生化指标、血清免疫指标及抗氧化指标。结果表明:郁金散加减方组和西药组病猪反应灵敏,体温正常,进食量增加,粪便恢复正常。低、高剂量组和西药组治愈率分别为80%、90%和60%,郁金散加减方的治疗效果优于西药治疗。与对照组相比,高剂量组能极显著提高猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)(P<0.01),极显著降低料重比(P<0.01);3个给药组均能极显著降低血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)和白细胞数量(WBC)(P<0.01),极显著提高血清钾(K)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.01),但3组间差异不显著(P>0.05);高剂量组过氧化氢酶(CAT)活性极显著高于低剂量组、西药组和对照组(P<0.01)。表明郁金散加减方对长白猪传染性胃肠炎有较好的治疗效果,其中郁金散加减方高剂量组效果更好。     

山东规模化养殖场毛皮动物多重感染病原学分析

2012—2013年间,山东10个地市多家毛皮动物养殖场养殖的毛皮动物（狐狸、貉子、水貂）出现腹泻,皮肤湿疹,神经症状,空怀、流产、出血性肺炎等症状和病变类似的疫情,为探明其病因,本研究对发病规模化毛皮动物养殖场发病情况进行调查,并对送检的病料进行病原学检查,结果发现,犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒感染率分别为54.21%、47.30%、31.35%;肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌、大肠杆菌、沙门杆菌、绿脓杆菌、加德纳菌的感染率分别为37.58%、25.05%、21.81%、14.04%、12.53%、10.37%、8.21%;犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌6种病原的单独感染、二重感染、三重感染、四重感染分别为22.03%、39.52%、36.07%、2.38%,未见五重以上的感染。结果表明,近两年造成山东规模化场毛皮动物发病主要原因是由犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒与肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌多重感染所致,这为规模化毛皮动物养殖场有效地控制疫病提供了理论依据。     

玉米种子清蛋白 PAGE 谱带稳定性及玉米杂交种纯度检验

利用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术对１１个不同玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）自交系和杂交种种子清蛋白（ａｌｂｕｍｉｎ）进行了电泳分析。结果表明,改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对玉米种子清蛋白具有较高的分辨率;玉米种子清蛋白存在丰富的多态性,各自交系和杂交种的电泳图均具有鲜明特征,并构成其独特的生化“指纹”;电泳谱带具有相对稳定性,基本不受产地和收获早晚的影响。     

Mcl-1 involves in G2/M arrest of HL-60 cells induced by diallyl disulfide

AIM: To investigate the role of Mcl-1 in the G₂/M arrest induced by diallyl disulfide (DADS) in leukemic HL-60 cells.METHODS: The inhibitory effect of DADS on human leukemic HL-60 cells was detected by CCK-8 method in vitro. Flow cytometry analysis was employed to observe the cycle arrest in HL-60 cells and the effect of DADS-induced G₂/M arrest on HL-60 cells with Mcl-1 gene knockdown by RNAi silencing. The expression of Mcl-1, PCNA and CDK1 in HL-60 cells treated with DADS was determined by Western blotting. The binding of Mcl-1 with PCNA and CDK1 was detected by coimmuno-precipitation. RESULTS: HL-60 cells were treated with DADS at concentration of 15, 30, 60, 120 or 240 μmol/L for 48 h. The inhibition rates of HL-60 cell proliferation were 31.15%, 55.88%, 66.14%, 75.29% and 80.35%, respectively, and gradually enhanced with the increase in the concentration of DADS (P<0.05). Flow cytometry analysis revealed that the proliferation of HL-60 cells was blocked by DADS in the G₂/M phase. Treatment with DADS for 24 h and 48 h at concentrations of 60 μmol/L and 120 μmol/L, the percentage of G₂/M phase cells increased as compared to the untreated cells (P<0.05). DADS induced arrest of HL-60 cells in G₂/M phase in a time- and dose- dependent manner (P<0.05). The results of Western blot analysis indicated that Mcl-1, PCNA and CDK1 in HL-60 cells were significantly reduced after treated with DADS (P<0.05). HL-60 cell cycle progression delayed by silencing Mcl-1 gene with siRNA technique, suggesting that silence of Mcl-1 gene led to G₂/M arrest. Compared to the cells treated with DADS only, the percentage of G₂/M cells raised in the cells with Mcl-1 gene silencing and treated with DADS (P<0.05), indicating that Mcl-1 gene silencing enhanced the effect of DADS-induced G₂/M arrest in HL-60 cells. The binding of Mcl-1 with PCNA and CDK1 was detected by coimmuno-precipitation and the formation of heterodimers was observed, which was decreased after treated with DADS for 4 h.CONCLUSION: DADS inhibits the proliferation of HL-60 cells and induces its G₂/M phase arrest. The decreased expression of PCNA is related to inhibiting the proliferation of leukemic cells. Knockdown of Mcl-1 gene enhances the effect of DADS-induced G₂/M arrest.     

p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响

本试验旨在探讨β-羟丁酸（BHBA）对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA（0、0．6、1．2、2．4mmol／L）,培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580（10pmol／L）预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2．4retool／L;PI／An—nexinV—FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase9、bcl2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1．2和2．4mmol／I—BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加（P〈0．01）。bcl2基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．05）;添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）,bcl-2基因mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。     

一串红温室撒播栽培技术研究

在大通植物园苟圃进行一串红温室撒播栽培试验,结果表明,撒播一串红的栽培方式,比容器培育的一串红粗壮高大,而且操作技术简单易行.