蔬菜土传病原菌三重PCR检测体系的建立与应用

【目的】 针对生产中危害严重的3种蔬菜土传病原菌瓜果腐霉（Pythium aphanidermatum）、尖镰孢（Fusarium oxysporum）、大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）,建立三重PCR（triplex PCR）检测体系,为蔬菜土传真菌病害的早期诊断和鉴定提供技术与方法。【方法】 筛选3种病原菌特异性引物组合,通过设定不同的PCR退火温度、引物浓度、循环次数以及延伸时间,探索影响三重PCR扩增的因素,建立蔬菜土传病原菌三重PCR检测体系,并对体系灵敏度进行检测。为了验证建立体系的稳定性,选择2×Taq Master PCR Mix（北京博迈德生物技术有限公司）和TaKaRa Taq酶（大连宝生物工程有限公司）2个不同公司的试剂,分别利用C1000 Touch ^TM型（赛默飞世尔科技有限公司）与Aeris ^TM型（新加坡艺思高科技有限公司）热循环仪进行三重PCR反应,比较检测结果的可重复性。对田间采集的35份病害样本和149份土壤样本,分别进行三重PCR和病原菌分离检测,以确定所建立得三重PCR检测体系的适用性。 【结果】 三重PCR反应体系中引物对AsAPH2B/AsPyF、FOF1/FOR1、VActF/VActR可分别扩增出瓜果腐霉、尖镰孢、大丽轮枝菌长度为163、328和530 bp的特异性目的片段。反应体系（25 μL）：0.12 μmol·L ^-1 AsAPH2B/AsPyF,0.16 μmol·L ^-1 FOF1/FOR1,0.24 μmol·L ^-1 VActF/VActR,2×Taq Master PCR Mix 12.5 μL,退火温度为60.8℃,35个循环。该体系对病原菌纯培养物的检测灵敏度为10 ^-1ng·μL ^-1,对土壤中大丽轮枝菌、尖镰孢和瓜果腐霉的检测灵敏度分别为10 ⁵、10 ⁶个孢子/g土壤和10 ^-2mg菌丝/g土壤。分别采用2×Taq Master PCR Mix和TaKaRa Taq酶,利用C1000 Touch ^TM型和Aeris ^TM型热循环仪进行三重PCR,扩增结果一致,说明三重PCR体系检测稳定性好。对田间采集的病害和土壤样本进行检测,25份病害样本和71份土壤样本中检测出带菌,三重PCR检测与病原菌分离培养结果一致。 【结论】 本研究建立的瓜果腐霉、尖镰孢、大丽轮枝菌三重PCR检测体系具有灵敏度高、稳定性和重复性好的特点,能够快速、准确地检测田间病株及其根围土壤中的瓜果腐霉、尖镰孢、大丽轮枝菌,为蔬菜土传病害的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。     

结球甘蓝主要经济性状遗传研究

以５个结球甘蓝为亲本，按Ｈａｙｍａｎ双列杂交法配制杂交组合，对叶球主要经济性状的遗传规律进行研究。结果表明，叶球横经，紧实度和重量，符合加性－显性模型。叶球纵径和中心柱长可能存在非等位基因间的互作。叶球纵径，横径，重量和中心柱长为超显性遗传，对这些性状宜利用其杂种一代。受控显性基因，叶球纵径至少４对，横径和叶球重量到少３对，紧实度和中心柱长至少１对。     

秦岭南坡青杄林、青杄—华山松—红桦混交林林地土壤特性研究

本文探讨了秦岭南坡青林及青—华山松7红桦混交林林地土壤的养分、化学性质及酶活性特点。结果表明：针阔混交林林地土壤酸性淋溶过程及物质迁移过程比青林地土壤弱；混交林明显地增加了土壤有机质及N素含量而降低了土壤有效P及有效K的含量；阳离子交换量及水解性总酸度青林地土壤比针阔混交林地高而盐基饱和度比针阔混交林地低，说明了在青林地土壤阳离子交换量中置换性酸所占比例较大而盐基离子所占比例较小；脲酶活性是针阔混交林地比青林地高而磷酸酶活性比青林地低，这与两种林地土壤中水解N及有效P含量高低是一致的。     

可见半面树冠法预测油松种子产量的研究

以可见半面树冠法估测的油松球果成熟前数量来预测油松当年种子产量 ,结果得出 :油松球果数目和种子产量有着密切的直线相关关系 ,可以用油松球果数进行种子产量的预测 ;这是一种方便而且精度高的方法。二者呈直线相关 ,相关系数 r =0 .86 0 3,预测精度为 86 .99%。     

农村职业教育线上教学模式的改革与探索

为了保证全面脱贫与乡村振兴,巩固脱贫攻坚成果,农村职业教育发挥着重要作用.研究对象是高素质农民,这个群体的技能提升问题亟须解决,应培养其终身学习习惯,提升学习效果,赋能乡村振兴.根据高素质农民线上学习存在的问题,构建线上教学模式,打造"四位一体"体验式课堂教学闭环,进一步提升了高素质农民的课堂参与感,并进行深度的探索与实践,为农业产业的现代化发展提供智力支撑,为农村职业教育发展提供解决方案.     

连作、轮作对谷子根际细菌群落结构的影响

为探明谷子连作与轮作对土壤细菌群落组成的影响,利用高通量测序技术,结合土壤理化性质及酶活性,比较分析了撂荒地、玉米-谷子轮作、谷子连作2、3 a和5 a土壤细菌群落组成多样性。结果表明：谷子连作与轮作土壤均为碱性,pH为8.26~8.49,碱解氮、有机质、脲酶活性表现为轮作地最高,连作2 a开始降低,连作3 a达最低值,连作5 a又开始回升,速效钾、多酚氧化酶、过氧化氢酶以及蔗糖酶活性均是连作土壤高于轮作土壤。谷子连作与轮作土壤细菌在门水平上群落组成比较固定,但不同物种的丰度差异较大;菌群分析发现放线菌门、变形菌门以及酸杆菌门是谷子根际土壤优势菌群;菌群相对丰度在轮作土壤中高于连作土壤的有：变形菌门、酸杆菌门、拟杆菌门、厚壁菌门以及硝化螺旋菌门,低于连作土壤的有己科河菌门和绿弯菌门;Alpha多样性分析显示各组间菌群差异不显著,Beta多样性分析则显示连作、玉米-谷子轮作地和撂荒地土壤菌群分布差异较大;冗余分析（RDA）表明鞘氨醇单胞菌与pH、有效磷、碱解氮和有机质呈正相关,类诺卡氏菌与pH、有效磷、碱解氮、有机质、脲酶和过氧化氢酶呈正相关,轮作、连作、撂荒地组间根际土壤优势菌存在差异,LEfSe分析确定了谷子根际土壤特定标志物,其中轮作地的优势菌群为鞘氨醇单胞菌和类诺卡氏菌,3 a连作地的优势菌群为土壤红杆菌。综上所述,谷子连作土壤与轮作土壤相比,细菌的ASVs丰度减少,细菌群落分布差异较大;随着谷子连作年限增加,土壤养分呈先下降后上升趋势。     

旱伞草水热炭的稳定性特征及固碳潜能

为探究湿地植物旱伞草水热炭的稳定性特征与固碳潜能,分别在200、220、240℃和260℃下制备旱伞草水热炭,通过元素分析、红外光谱分析、X射线衍射分析、热重分析及化学氧化分析等方法分别探究了水热炭的理化性质及热稳定性和化学稳定性,并对不同温度水热炭的固碳潜能进行评估。结果表明：随着水热碳化温度升高,水热炭产率下降,pH值和灰分含量上升,H/C和O/C降低,—OH、—C—O等不稳定含氧官能团减少,芳香化程度增加。热重分析和稳定性系数（R₅₀）分析结果表明,不同温度制备的水热炭的R₅₀值为0.47~0.59。H₂O₂氧化试验表明,中低温（220℃）制备的水热炭的抗氧化性能最好,其氧化后稳定碳含量为54.14%。此外,固碳潜能分析结果表明,随着碳化温度的升高,旱伞草水热炭的固碳系数在30.21%~31.54%范围内波动,长期固碳潜能的CO₂当量为2.76~2.88 Mt·a^-1。研究表明：200℃和220℃制备的中低温水热炭具有较好的化学稳定性,且在短期固碳效果上具有优势;而260℃制备的高温水热炭具有最佳的热稳定性和长期固碳潜能,在固碳减排方面具有良好的应用前景。     

陆稻主要性状的产量效应及其育种应用

通过 10个陆稻品种 10 0个单本株的 8大类 4 2个主要性状对产量的单因素逐步回归、多元相关、通径与灰色关联的分析。结果表明 :影响陆稻产量的关键性状有 7个 ,效应大小顺序为单本株有效穗 (1) >主茎节间数 (2 ) >穗茎粗 (3) >一次枝梗数 (4) >始穗至成熟天数 (5 ) >实粒数 /穗 (6 ) >抽穗期下部花粉育性 (7) ,其中 (1)、(3)、(6 )为正效应 ,(2 )、(4)、(5 )、(7)为负效应。笔者认为陆稻选育的基本目标为“足穗、大穗、早熟” ,具体是 :分蘖力强、成穗率高 ;穗茎粗 ,主茎节间数、一次枝梗数中等 ,穗粒数多 ,小穗不育率低 ,结实率高 ;主茎节间数、叶片数适中 ,功能叶厚且狭短 ;生育后期进程快 ,早熟     

嗜酸乳杆菌生产特性的研究

以质量浓度 10 0 g/ L 脱脂乳为培养基 ,对嗜酸乳杆菌在乳中的生长能力、产酸能力、产香能力以及蛋白质分解能力进行了研究。结果表明 :在 37℃条件下 ,嗜酸乳杆菌可在乳中生长、繁殖 ,对数期细菌数达 10 9m L- 1 以上。在 10 %接种量条件下 ,36 h嗜酸乳杆菌可在乳中产生 10 3.2 5～ 10 8.5 6°T的酸度 ,p H值达 3.83～3.91,2 4～ 30 h产生 1.8716～ 2 .14 4 0 m mol/ m L双乙酰 ,3.2 32 2～ 3.6 84 4 m mol/ m L乙醛 ,使发酵乳具有良好的风味。同时 ,嗜酸乳杆菌具有较强的蛋白质分解能力 ,4 8h可以产生 171.6 7～ 182 .5 5μg/ m L的氨基酸 ,使发酵乳具有较高的营养价值     

试论特早熟棉亚区棉花生产问题

结合新疆特早熟棉亚区的气候特点、植棉历史与现状，提出了该区在棉花品种选择上应突出早熟，抗病不是重点；栽培技术以促早熟为中心，近期应大力推广高密度、超宽膜，推行合理的作物布局及耕作制度，适当减少棉田面积；对病虫害实行综合防治等措施。