Exogenous DNA Uptake of Boar Spermatozoa by a Magnetic Nanoparticle Vector System

The sperm‐mediated gene transfer method is applicable to transgenesis in many species that use spermatozoa for reproduction recently, which has been shown various results. In the current study, we show that transgenic porcine embryos can be efficiently produced by employing a simple transfection method that uses magnetic nanoparticles (MNPs). The complexes formed between plasmid DNA and MNPs were bounded on ejaculated boar spermatozoa at a higher efficiency compared to methods using DNA alone or lipofection. Using confocal microscopy, rhodamine fluorophore‐labelled MNPs were detected on external surfaces of the spermatozoa membrane, which were bounded on zona pellucida of in vitro maturated oocyte during in vitro fertilization. Electron microscopy revealed that clusters of MNPs were detected in inside of plasma membrane and nucleus of the spermatozoa head. Additionally, we found that magnetofected boar spermatozoa could be fertilized with oocytes in vitro and that the resulting gene of green fluorescent protein was detected in fertilized eggs by genomic PCR analysis. Taken together, these results suggest that MNPs can be used to efficiently introduce a transgene into embryo via spermatozoa.     

Wnt10b参与外源褪黑激素促进绒山羊绒毛生长的研究

本实验旨在研究Wnt10b在内蒙古成年绒山羊皮肤中的表达变化规律和褪黑激素(MT)对其表达量的影响。每隔1个月按照2 mg/kg BW的剂量在受试内蒙古成年绒山羊耳后皮下埋植MT。连续采集12个月(从2009年8月到2010年7月)的肩胛部皮肤样品,应用实时荧光定量PCR技术检测Wnt10b的表达量。结果表明:Wnt10b在内蒙古成年绒山羊皮肤组织中毛囊生长中期和休止前期高表达;埋植MT提高了Wnt10b在内蒙古成年绒山羊皮肤组织中毛囊休止期和退行期的表达量。结果提示,Wnt10b参与内蒙古绒山羊毛囊生长的信号传递过程,并在退行期和休止期转变过程中发挥作用;Wnt10b参与了外源MT促绒毛生长的毛囊周期性变化过程。     

灭活沙门菌处理黄粉虫抗菌肽的粗提及其抑菌活性测定

为了探究灭活沙门菌诱导黄粉虫的效果,试验采用灭活沙门菌液针刺和饲喂黄粉虫幼虫,然后粗提抗菌肽,测定其浓度及药物敏感性。结果表明:饲喂、针刺组诱导的抗菌肽浓度分别为6.644,6.832 mg/mL,两者不存在显著性差异(P>0.05),但都极显著高于对照组(浓度为1.746 mg/mL,P<0.01);黄粉虫菌饲和菌刺组的平均抑菌直径分别为14,16 mm,对照组的平均抑菌直径为11 mm。说明灭活沙门菌处理黄粉虫幼虫能产生大量的抗菌肽,并且对沙门菌具有抑制作用。     

不同饲用燕麦品种生产性能的综合评价

基于熵权赋权法,运用灰色系统理论中的灰色关联度法对26个燕麦品种的生产性能进行综合评价,结果表明,生产性能综合表现较好的是初岛燕麦、青永久409、青永久709及青永久316;青永久18综合评价值最低,生产性能最差,其余品种生产性能表现一般。经逐步回归分析,发现其中的绿叶数、叶长、茎叶比、鲜干比、生长速度、叶面积指数、相对生长速率及生长天数8个指标对饲用燕麦生产性能贡献显著。     

月季种质资源花色基础研究

运用测色仪对227个月季种质资源花色表型进行分类,并运用紫外分光光度计测定总类黄酮,探讨二者之间的相关性。结果表明:在a~*和b~*二维象限图上,7类色系主要集中分布在Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ象限,在第Ⅲ象限(蓝色)没有分布,花瓣正面颜色分布较为集中、部分橙红色和深红色品种的反面花色分布较为离散;7个色系的明度均为L~(*B)L~(*F),绝大多数色系的颜色参数a~(*F)/b~(*F)/C~(*F)a~(*B)/b~(*B)/C~(*B),并且玫红色、紫红色、橙红色和深红色的正反面花色a~*、b~*、C~*差异显著;各个色系TA之间差异显著(P0.05),深红色TA含量最高。而TF含量,除了深红色和紫红色差异显著外,其他色系之间差异不显著(P0.05);TA与L~*呈负相关关系(P0.01),与花瓣L~(*B)相关性更大;TA与h°负相关(P0.01)。TA与a~*/C~*呈正相关关系(P0.01),与正面颜色参数值相关性更强,而TF与L~*/h°也呈负相关关系(P0.05)。说明TA和TF共同影响花色的呈现,并且花青苷含量的高低是影响花色深浅的主要因素。     

江西省萍乡市某羊场布鲁菌病的流行病学分析

江西省萍乡市某山羊场妊娠母羊散发流产,为了分析该羊场流产的发生是否与布鲁菌感染有关,同时掌握该羊场布鲁菌病的流行情况,随机抽样采血共分离得到100份山羊血清,首先使用虎红平板凝集试验进行初步鉴定,然后通过试管凝集试验重新检测阳性血清。结果表明,该羊场布鲁菌病阳性率为20％。由此可以得出,该羊场的布鲁菌病防控工作存在较严重的问题,应制定有效的防治措施,将山羊布鲁菌病的检测纳入日常疾病监测工作中,最终达到净化该病的目的。     

添加复合预混料对奶牛抗氧化作用影响的试验研究

[目的]研究复合预混料对奶牛抗氧化作用的影响.[方法]把20头奶牛随机分成2组,分别为试验组和对照组,试验组奶牛精料补充料中添加2%预混料,180 d后测定试验组和对照组血清中T-SOD、GSH-Px活性和MDA含量.[结果]与对照组相比,试验组可以提高T-SOD和GSH-Px的活性,降低MDA含量.[结论]添加复合预混料可以提高奶牛的抗氧化能力.     

水貂毛皮成熟期皮肤中EGF、IGF-Ⅰ及IGF-ⅠR基因的表达

为探讨水貂皮肤和毛囊发育机理,试验运用组织学和免疫组化方法对水貂毛皮成熟期皮肤及毛囊中表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）和胰岛素样生长因子-Ⅰ（insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ）及其受体（insulin-like growth factor-Ⅰreceptor,IGF-ⅠR）进行了研究。结果表明,水貂皮肤表皮细胞和毛囊外根鞘细胞中都有IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和EGF基因的强阳性表达,3种基因主要分布于细胞质中,细胞核呈空泡状未见到阳性染色,呈苏木精复染的蓝色,皱褶区域和表皮下胶原结缔组织出现了阳性染色为非特异性阳性结果。IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和EGF基因在水貂皮肤表皮和毛囊外根鞘细胞中广泛表达,直接参与调控皮肤和毛囊的发育。表明EGF、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因在水貂皮肤及其衍生结构的发育中发挥着重要作用。     

固相萃取-高效液相色谱法测定乳制品中三氯蔗糖

建立乳制品中三氯蔗糖的固相萃取高效液相色谱检测方法.采用0.2％乙酸水溶液沉淀蛋白,提取三氯蔗糖,然后通过C18固相萃取柱进行净化浓缩后,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测仪进行检测,该方法0.1～0.8g/L范围内以三氯蔗糖进样质量的对数和相应峰面积的对数做标准曲线,R2为0.9991,相关性良好,加标回收率在94％～102％之间,检出限为2.0mg/L(RSN=3).     

载牛冠状病毒N蛋白壳聚糖微球的免疫效果评价

为了对壳聚糖分子作为佐剂的缓释效果进行免疫学评价,本研究合成了牛冠状病毒DB2毒株N蛋白基因的3'端第487位～1287位碱基,用大肠杆菌对其进行了高效表达,通过SDS-PAGE电泳分离、电洗脱纯化该牛冠状病毒N蛋白(BCV N).以戊二醛为交联剂,采用乳化交联的方法制备空白壳聚糖微球.利用吸附法制备载BCVN蛋白的壳聚糖微球,通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测免疫鼠血清中的抗体水平,由此评价壳聚糖微球对BCVN的缓释作用和佐剂效应.结果表明,壳聚糖微球的形态较好、表面光滑、分散性较好,平均粒径为6.50±1.77μm,电势分布在36 mV,吸附BCV N蛋白的壳聚糖微球在体内所产生的免疫效果明显优于唯N蛋白组,说明载BCV N蛋白的壳聚糖微球在体内具有一定的缓释效果,使N蛋白在体内缓慢释放而长时间诱导抗体的产生,该研究结果为以壳聚糖微球作为疫苗佐剂积累了实验数据.