杜氏盐藻MAPK基因植物表达载体的构建及对烟草的转化

以载体pBI121为基础,经SmaI和BamHI单酶切后,构建了植物表达载体pBI121-MAPK,并通过农杆菌介导采用叶盘转化法将其转入烟草中,经卡那霉素抗性筛选,获得转基因抗性植株。经PCR检测表明pBI121-MAPK已整和到烟草基因组中。     

Regulatory effect of Panax notoginseng saponins on the oxidative stress and histone acetylation induced by porcine circovirus type 2

Porcine circovirus type 2 (PCV2) exists widely in swine populations worldwide, and healthy PCV2 virus carriers have enhanced the severity of the infection, which is becoming more difficult to control. This study investigated the regulatory effect of Panax notoginseng saponins (PNS) on the oxidative stress and histone acetylation modification induced by PCV2 in vitro and in mice. In vitro, PNS significantly increased the scavenging capacities of superoxide anion radicals (O₂^•-) and hydroxyl radicals (^•OH) and reduced the content of hydrogen peroxide (H₂O₂) induced by PCV2 in porcine alveolar macrophages (3D4/2). In addition, PNS decreased the protein expression level of histone H4 acetylation (Ac-H4) by increasing the activity of histone deacetylase (HDAC) in PCV2-infected 3D4/2 cells. In vivo, PNS enhanced the scavenging capacities of ^•OH and O₂^•− and reduced the content of H₂O₂ in the spleens of PCV2-infected mice. PNS also reduced the protein expression level of histone H3 acetylation (Ac-H3) by reducing the activity of histone acetylase (HAT) and increasing the activity of HDAC in the spleens of PCV2-infected mice. PCV2 infection activated oxidative stress and histone acetylation in vitro and in mice, but PNS ameliorated this oxidative stress. The research can provide experimental basis for exploring the antioxidant effect and the regulation of histone acetylation of PNS on PCV2-infected 3D4/2 cells and mice in vitro and in vivo, and provide new ideas for the treatment of PCV2 infection.     

珍禽贵妃鸡商用配套系的选育——商品代雏鸡自别雌雄结果的观察和分析

据伴性遗传基因的遗传原理和羽速基因的遗传特点,选择8只珍禽贵妃鸡快羽公鸡与32只慢羽母鸡按1:4的公母比例组成8个组合进行配套杂交。其杂交种蛋经孵化出雏,观察每只公鸡的后代中快慢羽雏鸡的数量,再通过翻肛鉴别和解剖验证。结果表明贵妃鸡快慢羽杂交后代雏鸡自别雌雄的总体准确率的96.77%,其中7个组合后代雏鸡的雌雄自别准确率达到100%。因此珍禽贵妃鸡商用配套系的杂交后代完全可以实现商品雏鸡自别雌雄。     

昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达

为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。     

4种蛋白酶制备水溶性蜂王浆

通过水溶性蛋白质的提取率,比较了4种蛋白酶制备水溶性蜂王浆的效果,结果显示,木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶的水溶性蛋白质提取率分别为14.10%、13.97%、24.91%、7.20%,酶解产物在热、酸、碱环境中具有较强的稳定性。采用中性蛋白酶制备水溶性蜂王浆明显优于其他3种酶,同时中性蛋白酶反应条件简易,可用于水溶性蜂王浆的生产。     

饲料中添加不同水平醋糟对獭兔肉品质的影响研究

为研究醋糟作为粗纤维饲料对獭兔肉品质的影响,选择90日龄健康的生长獭兔180只,随机分成6组,分别饲喂6种不同比例醋糟替代谷草与小米壳(0%、7%、14%、21%、28%和35%)的饲粮。结果表明:各组氨基酸总量、鲜味氨基酸含量差异不显著(P>0.05);在人体必需氨基酸含量方面,各试验组都有一定程度的提高,其中35%组最高(P>0.05);兔肉中蛋白、灰分与水分含量各组差异不显著(P>0.05)。脂肪含量35%组与对照组接近,与21%组差异显著(P<0.05);各组滴水损失、熟肉率及剪切力差异不显著(P>0.05);肉色方面,35%组与对照组最低;在pH值方面,对照组与各试验组之间差异不显著(P>0.05)。因此,从兔肉的营养价值和饲料成本等综合考虑,在獭兔日粮中添加35%的醋糟对肉品质效果较好。     

高铜日粮对肉鸡肝细胞线粒体呼吸功能的影响

采用玉米-豆粕型日粮研究铜(源于硫酸铜)对肉鸡肝细胞线粒体呼吸功能的影响.在对照组(Cu 11 mg/kg)基础上设3个高铜组(110 mg/kg、220 mg/kg和330 mg/kg,分别对应为:试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),试验60 d,在不同时间点(12、24、36、48、60日龄)采集肝脏提取线粒体.随着饲养时间的延长,对照组和试验I组肝脏线粒体呼吸功能有增强的趋势.在48日龄之前,试验Ⅱ和Ⅲ组肝脏线粒体呼吸功能也有增强的趋势,但幅度较小,48日龄以后,肝脏线粒体呼吸功能呈现下降趋势,特别是60日龄的试验Ⅲ组.高铜日粮能影响肉鸡肝细胞线粒体的呼吸功能,日粮铜浓度为110mg/kg时,能增强线粒体的呼吸功能,但较高的铜浓度日粮则损害线粒体的呼吸功能. 、220 mg/kg和330 mg/kg,分别对应为:试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),试验60 d,在不同时间点(12、24、36、48、60日龄)采集肝脏提取线粒体.随着饲养时间的延长,对照组和试验I组肝脏线粒体呼吸功能有增强的趋势.在48日龄之前,试验Ⅱ和Ⅲ组肝脏线粒体呼吸功能也有增强的趋势,但幅度较小,48日龄以后,肝脏线粒体呼吸功能呈现下降趋势,特别是60日龄的试验Ⅲ .高铜日粮能影响肉鸡肝细胞线粒体的呼吸功能,日粮铜浓度为110mg/kg时,能增强线粒体的呼吸功能     

饲粮中添加籽粒苋对泌乳奶牛瘤胃发酵、血液指标和生产性能的影响

本试验旨在研究饲粮中添加籽粒苋青贮和干草对泌乳奶牛瘤胃发酵、营养物质表观消化率、血液指标和生产性能的影响。选取产奶量、胎次和泌乳天数等相近的健康荷斯坦奶牛45头,随机分成3组,每组15头牛。对照组粗饲料包括全株玉米青贮、羊草和苜蓿干草,试验Ⅰ组粗饲料使用籽粒苋青贮替代30%玉米青贮,试验Ⅱ组粗饲料使用籽粒苋干草替代30%苜蓿干草。3组饲粮营养水平接近。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:1)与对照组相比,试验Ⅰ组能显著提高粗蛋白质(CP)表观消化率、瘤胃液氨态氮(NH_3-N)和血液总氨基酸(T-AA)的含量(P0.05),对其他营养物质表观消化率、血液指标和乳成分影响不显著(P0.05)。2)与对照组相比,试验Ⅱ组的血液T-AA含量显著高于对照组(P0.05),对其他血液指标、瘤胃发酵指标、营养物质表观消化率和乳成分均无显著影响(P0.05)。综上所述,饲粮中添加适量的籽粒苋不会影响奶牛的生产性能,同时会提高牧场经济效益。     

猪瘟病毒cF114株E2基因在家蚕杆状病毒表达系统中的融合表达

为进一步利用家蚕杆状病毒表达系统研制猪瘟病毒(CSFV)新型的亚单位疫苗,将猪瘟病毒cF114株囊膜糖蛋白E2基因克隆至带有GST标签的分泌表达杆状病毒转移载体pAcSecG2T的EcoRⅠ和BamHⅡ位点之间,获得了带有杆状病毒囊膜蛋白gp67信号肽-GST-E2元件的重组杆状病毒转移载体pAcSecG2T-E2,与线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,筛选重组病毒(Bm-BacPAK6-E2),PCR证实所分离的重组病毒含有目的片段E2基因。SDS-PAGE图谱显示,感染重组病毒后,在细胞培养液上清和家蚕幼虫、蛹的血淋巴中均可检测到一条分子量为63 kD左右的特异性条带;感染Bm-BacPAK6-E2家蚕蛹的血淋巴可检测到GST活性,接种病毒148 h后重组蛋白的表达水平达到17.11μg/mL。     

含水量和乳酸菌制剂对狗尾草发酵品质的影响

研究含水量(30%、35%和40%)和乳酸菌制剂添加量(3%、6%、9%和12%)对成熟期狗尾草(Setariaviridis(L.)Beauv.干草发酵品质的影响。结果表明,在含水量30%条件下添加乳酸菌制剂显著降低粗蛋白质含量(P<0.05);含水量35%和40%条件下添加乳酸菌制剂显著降低粗纤维和中性洗涤纤维含量(P<0.05);随着含水量的升高pH值趋于降低,乳酸、丁酸产量趋于增加;含水量和乳酸菌制剂对pH值、乳酸产量以及乳酸菌数量具有显著的互作效应(P<0.05);在含水量30%-40%条件下,添加乳酸菌制剂3%-12%,各处理组的发酵品质均为优或良。