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61.
本研究参照已发表的PCV2基因组序列,设计合成1对特异性引物,以PCV2基因组DNA为模板,PCR扩增了长约480 bp的ORF2基因片段。将目的片段定向克隆到pGEX-6p-1原核表达载体,酶切及测序鉴定正确后,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导得到了以包涵体形式表达的重组蛋白。采用亲和层析法在变性的条件下纯化重组蛋白,纯化的重组蛋白浓度为0.396 mg/mL。纯化蛋白经免疫印迹、间接ELISA检测证明具有良好的抗原性和特异性。 相似文献
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为明确辣蓼黄酮正丁醇部分(n-butanol part of flavonoids from Polygonum hydropiper L.,FNB)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)的效果。本研究以Marc-145细胞和PPRSV弱毒疫苗毒株(TJM-F92)为对象,通过CCK-8法检测FNB对细胞的毒性作用,并检测先给药后接毒、先接毒后给药、药物与病毒同时作用这3种方式处理细胞后药物对病毒的抑制率。结果发现,FNB对细胞的最大安全浓度为500 μg/mL,因此,选择25~500 μg/mL浓度范围的FNB进行后续试验。各浓度的FNB处理病毒后,能不同程度的抑制PRRSV在细胞上的增殖,并呈现一定的剂量效应关系,药物的浓度越高,抗病毒效果越好。其中,先接毒后给药、药物与病毒同时作用这两种方式抗PRRSV效果显著,在25~500 μg/mL浓度范围内细胞存活率分别为21.55%~65.23%和24.85%~73.60%。而先给药后接毒,不能有效降低病毒的感染力,在药物最高剂量(500 μg/mL)时细胞存活率仅为7.00%,抗病毒效果不明显。FNB预先作用于Marc-145细胞虽未降低PRRSV感染细胞的能力,即药物对于PRRSV预防作用效果不理想,但是FNB对病毒感染细胞后呈现一定的作用,药物能够通过抑制病毒的合成、释放及直接杀灭病毒,进而能够有效抑制PRRSV在细胞上的增殖。本试验结果不仅为FNB在临床上治疗猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)提供参考依据,而且可以为辣蓼的深度开发和利用提供理论依据。 相似文献
63.
景观植物管理信息系统的初步构建 总被引:1,自引:0,他引:1
景观植物管理查询系统(Landscape Plant Management Information System,简称LPMIS)是一种管理信息系统(Management Information System,简称MIS).LPMIS采用面向对象的开发语言Visual Basic 6.0和桌面数据库管理系统 ACCESS在Windows操作系统环境下运行.LPMIS具有可视化、人性化的界面,提供多媒体信息,数据的维护和更新具有继承性,后台数据库可方便的移植于网络等特点;PMIS具有较好的可移植性和通用性,通过更换后台数据库,LPMIS可方便的应用于其他领域并开发出不同的数据库.LPMIS可促进景观植物数据的查询和管理由手工向自动化变革,从而大大提高工作效率. 相似文献
64.
对甲型肝炎病毒(HAV)发病机理和免疫调控的研究近年来重新受到关注。在发展中国家感染者的平均年龄增加,导致机制尚不明确的更严重的肝炎。而且,从HAV和丙型肝炎病毒(HCV)的免疫对比来看,这两种正链RNA病毒感染结果完全不同。HCV比HAV复制效率低,导致HCV蛋白表达量低,因此对IFN信号传导的拮抗作用较低。有研究发现循环的HAV病毒颗粒隐藏在膜里,导致先天免疫和抗体介导中和作用的激活。同时还考虑到CD4^+辅助T细胞对CD8^+细胞毒性T细胞对抗病毒免疫和肝损伤的作用,提出了一种非细胞毒性的HAV感染免疫控制模型。 相似文献
65.
文章旨在研究不同日粮类型(玉米、小麦和高粱)对1~14 d肉仔鸡常量和微量元素沉积的影响。试验选择健康、体重一致的1日龄AA肉鸡540只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复30只鸡。试验设计3种日粮,分别以玉米、小麦或高粱原料为主,3组日粮的代谢能、粗蛋白质和必需氨基酸水平维持一致,试验共进行14 d。结果表明:除了钙的含量例外,玉米、小麦或高粱型日粮其他矿物质元素的含量表现一致(P> 0.05)。14 d肉鸡各元素沉积系数的变化由0.24(镁)到0.64(钠),其中钠沉积系数在第3天最高(P <0.05);肉鸡日粮对各常量元素的影响表现为显著差异(P <0.05);3~7 d常量元素沉积系数显著降低(P <0.05);日粮类型显著影响3 d肉鸡钙的沉积系数,显著影响5 d肉鸡镁的沉积系数及磷的沉积系数(除了14 d)和钠的沉积系数(除了3 d)(P <0.05);小麦型日粮较玉米和高粱型日粮显著降低了钠的沉积系数(P <0.05);日粮类型和日粮对常量元素沉积系数的影响无显著交互作用(P> 0.05)。;肉鸡日粮对所有微量元素具有显著影响,其中在第3天表现为最高(P <0.05);日粮类型显著影响第7天铁、锌和锰的沉积系数(P <0.05),显著影响第9天铜的沉积系数(P <0.05);日粮类型和肉鸡日粮对微量元素的影响无显著交互作用(P> 0.05)。结论 :肉仔鸡对日粮无机矿物质的利用率较低,日龄对矿物元素的沉积量具有显著影响,但玉米、小麦或高粱型日粮对肉仔鸡常量和微量元素沉积量无显著影响。 相似文献
66.
67.
竞争性内源RNA (competing endogenous RNA,ceRNA)假说提出具有相同短序列非编码微小(microRNA,miRNA)应答元件(microRNA response element,MRE)的转录物通过竞争的方式结合miRNA,从而影响转录物的表达水平。ceRNA假说颠覆了miRNA与靶基因单向调控的传统观念,在RNA调控网络中具有重要的生物学意义。在众多转录物中,长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)是一类序列长度超过200个核苷酸的非编码RNA,对lncRNA的研究涉及到遗传、分子生物、基因调控、疾病(癌症、神经系统疾病等)等领域。miRNA与lncRNA形成了一个相互作用的调控网络,lncRNA可作为ceRNA抑制miRNA的功能,从而影响后续基因的表达。近年来,随着生物信息学技术的发展,科研人员发现ceRNA作用机制不仅涉及到人类癌症疾病,而且在各种复杂动物的肌细胞分化、脂肪细胞分化和颗粒细胞凋亡等生物过程中也发挥重要的调控作用。作者追溯了ceRNA调控机制,分析了ceRNA网络调控的影响因素,综述了ceRNA在不同动物中调控miRNA的研究进展,为进一步研究lncRNA与miRNA的调控网络提供参考,为畜牧业发展及复杂动物疾病治疗提供新的思路。 相似文献
68.
本试验旨在研究辛硫磷(Phoxim)对大鼠的毒性作用,探讨辛硫磷中毒的氧化应激机制。将36只SD大鼠分成对照组和2个染毒组,染毒组大鼠分别以30(低剂量组)和300μmol/kg体重剂量(高剂量组)灌服辛硫磷,连续灌服153、0 d后,分别测定血浆和肝脏胆碱酯酶(ChE)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察肝脏组织学变化。结果表明:辛硫磷染毒后大鼠血浆和肝脏ChE活性均极显著降低(P<0.01),尤其是高剂量染毒组,大鼠血浆ChE最大降低至对照组的22%,肝匀浆中ChE活性降低至对照组的75%。大鼠血浆和肝脏SOD、GSH-Px活性变化随染毒时间延长呈下降趋势,血浆和肝脏MDA含量均呈上升趋势。组织学检查显示辛硫磷可造成肝细胞脂肪变性。本研究表明,大鼠辛硫磷持续染毒可以诱导机体脂质过氧化增强,并导致肝脏结构损伤,说明氧化应激在辛硫磷的肝脏毒性中发挥着重要作用。 相似文献
69.
稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 总被引:1,自引:3,他引:1
为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF。ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞。 相似文献
70.