鸭源大肠杆菌O_(78)菌蜕的制备及免疫原性研究

为制备大肠杆菌(E.coli)菌蜕并研究其免疫原性,本研究将带有裂解基因E的质粒pHH43转化致病性鸭源E.coli O78,构建获得E.coli O78/pHH43重组菌。于不同培养温度下研究重组菌E裂解蛋白表达所介导的宿主菌的裂解情况,结果显示在42℃培养时最佳诱导时间为4h,约90%的重组菌被裂解失活,以冻干法及添加庆大霉素完全灭活未裂解的细菌后制备"菌蜕疫苗"。雏鸭免疫试验表明,接种E.coli O78/pHH43菌蜕两周后免疫雏鸭可产生对同源强毒菌株致死剂量攻击的免疫保护。比较E.coli O78/pHH43菌蜕与甲醛灭活的同株E.coli所诱导的免疫保护效果,结果免疫保护率分别为87.5%和75%,表明菌蜕比甲醛灭活法能更有效地诱导机体的特异性免疫应答。     

日粮阴阳离子平衡对高温环境中奶牛生产性能和血液指标的影响

选择泌乳前期奶牛15头,随机分成3组,每组5头,采用3×3重复拉丁方设计,分别饲喂3种不同日粮阴阳离子平衡(DCAB)的日粮,其中对照组A(DCAB为83meq/kgDM),B组(DCAB为275meq/kgDM),C组(DCAB为425meq/kgDM),研究DCAB对高温环境中奶牛生产性能和血清生化特性的影响。结果表明:(1)DCAB显著影响泌乳奶牛的血气指标,与对照组相比B组和C组血清的pH值显著增加(P<0.05)。血液中的HCO3-浓度和CO2总量)随着DCAB的增加而显著降低(P<0.05)。血液中的)随着DCAB的增加而显著增加。血液中的CO2分压(PCO2(TCO2)随着DCAB的增加而增加(P<0.05)。(2)血清中雌激素(E2)的浓度随着DCAB的)和O2饱和度(SATO2O2分压(PO2增加而显著增加。血清中的肌酸磷酸激酶(CK)随着DCAB的增加而降低,与对照组相比B组和C组奶牛血清中的CK分别降低了29.1%(P<0.01)和25.2%(P<0.01)。血清中的碱性磷酸酶(ALP)和谷丙转氨酶(GTP)受DCAB影响不显著。(3)DCAB对热应激奶牛的生产性能具有显著影响。275meq/kgDM组的产奶量及4%标准乳产量分别比对照组提高10%(P<0.05)和10.1%(P<0.05)。DCAB对奶牛的乳脂率和乳蛋白率无显著影响。从对血液缓冲能力、激素和酶水平及生产性能等方面考虑,在泌乳前期当DCAB为275meq/kgDM时饲喂效果最佳。     

添加甲酸+甲醛对草木樨青贮品质的影响

在刚收获及收获后经过8和30 h晾晒的初花期草木樨青贮料中,加入甲酸 甲醛进行青贮.结果表明,草木樨低水分(DM为44.98%)青贮可以使青贮料的氨态氮含量降低,并保存更多的干物质、粗蛋白质和可溶性糖.甲酸 甲醛青贮能明显改善草木樨青贮料的发酵品质,即降低青贮料的氨态氮含量和保存更多的可溶性糖和粗蛋白质.晾晒8 h组添加甲酸(2.0 ml/kg) 甲醛(2.0 g/kg)的效果最好;而晾晒30 h组添加甲酸(3.0 ml/kg) 甲醛(1.0g/kg)的效果最好.     

顶复门原虫电子转移链代谢及Ⅱ型NADH脱氢酶研究进展

顶复门原虫是包括刚地弓形虫、疟原虫及球虫等在内的一大类寄生性原虫的总称,可引起重要的人畜寄生虫病.抗顶复门原虫药物的长期使用,甚至是滥用,使得这类寄生虫对现有药物产生了明显的抗药性,急需开发新型药物.Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶是电子转移链途径中的关键酶,由于其仅存在于某些植物、细菌、真菌和寄生原虫等一些低等生物体内,而在高等动物体内缺失,是研发新型抗感染性药物的重要靶标.笔者主要针对顶复门原虫线粒体电子转移链代谢途径以及Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶的研究概况进行综述.     

自身启动子控制的卡那霉素抗性基因在哺乳动物细胞中表达的检测

为了研究卡那霉素抗性(KanR)基因能否在哺乳动物细胞中表达以及用含相同抗性基因重组质粒防治奶牛乳腺炎的安全性,用PCR从重组质粒p215C3LYZ中扩增得KanR基因,将其克隆入原核表达载体pQE-31,用含卡那霉素(Kan)琼脂平板筛选得KanR重组菌,经IPTG诱导成功表达了预期大小的Kan抗性融合蛋白;用纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得了Kan抗性蛋白抗血清,经Western blotting证明免疫血清特异性良好;分别用重组质粒pQE-Kan和p215C3LYZ转染COS-1细胞,在不含抗生素培养液中培养后分别收集细胞上清和细胞裂解物;将转染细胞上清分为添加和不加Kan组,接种Kan敏感菌DH5α大肠杆菌,培养物的OD600检测结果显示,添加组的指示菌生长被抑制,转染细胞上清中无Kan抗性蛋白表达;以Kan抗性蛋白免疫血清进行的Western blotting结果显示,转染细胞内无Kan抗性蛋白表达;将p215C3LYZ注射奶牛乳腺,用脱脂和浓缩奶样进行Western blotting检测,结果显示试验牛乳中也无Kan抗性蛋白表达。这些试验结果提示,来源于原核大肠杆菌的KanR基因启动子在动物细胞中无转录活性,乳腺注射含KanR基因的重组质粒不会表达对奶牛和人体有害的Kan抗性蛋白。     

鸡蛋蛋黄高密度脂蛋白结构、组成、来源及功能研究进展

鸡蛋蛋黄高密度脂蛋白(HDL)主要存在于卵黄颗粒中,是一个类似环状微胶束结构的伪球状蛋白。其来源于卵黄蛋白原,卵黄蛋白原在体内又经过一系列的结构修饰与受体识别,最终以高密度脂蛋白及卵黄高磷蛋白的形式沉积于卵黄中。高密度脂蛋白具有重要的生物学功能,除为胚胎提供必要的营养物质,还具有抗氧化性、抗菌性以及调控人体血清HDL功能等生物特性。本文主要介绍卵黄高密度脂蛋白结构、组成、来源、定位以及生物学功能,并对卵黄高密度脂蛋白研究前景进行展望。     

灌溉对白三叶生殖生长及种子产量和质量的影响

白三叶(Trifolium repens L.)是温带重要的豆科牧草,在我国草地改良及生态环境建设中具有重要作用。而目前我国白三叶种子主要依靠进口,其生产研究匮乏、技术落后,使之生产利用受到严重制约。本研究以白三叶海法品种为对象,于2003年11月-2005年6月在云南省种羊场,采用随机区组试验设计,设置5个水分调控处理;结合室内土培法,通过对白三叶种子田需水量及灌水时间的确定,水分对白三叶种子产量及产量构成要素的影响、对营养生长与生殖生长的调控、对种子发育及种子质量的影响等方面研究其种子生产的高产灌溉制度,并从生理生化的角度研究水分对白三叶生长发育的调控。     

副溶血弧菌基因分型和检测的研究进展

副溶血弧菌（Vibrio Parabaemolyticus，VP）是一种革兰氏阴性嗜盐杆菌，是引起食源性疾病的重要病原之一，可导致患者腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应。1998年以来的资料显示，副溶血弧菌引发的食物中毒的发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势，均已超过沙门氏菌食物中毒，跃居首位。为了便于进行临床诊断、流行病学调查、食品中微生物检测及医院感染监控，微生物的分型与诊断技术是必不可少的工具。随着分子生物学技术的发展，基因分型与诊断方法以其敏感性高、特异性强、分型率和分辨率佳的优点，逐渐取代传统的表型分型技术，在微生物的分型与诊断中发挥巨大的作用。本文就近年来国内外在副溶血弧菌的基因分型与检测方法上的研究作一综述。     

不同浓度氮酮、薄荷醇对盐酸特比萘芬体外经皮渗透作用的影响

为选择促进盐酸特比萘芬(TBF)透皮扩散作用的促渗剂,选用立式Franz扩散池,以犬离体皮肤为透皮屏障,通过计算含不同浓度氮酮(AZ)、薄荷醇(MT)组盐酸特比萘芬透皮试验的累积渗透量Q、稳态流速Jss、渗透系数Kp和增渗比ER等参数来比较促渗效果.结果显示试验中所有组别促渗剂都具有促渗作用,作用由强至弱依次为1%AZ**>5%MT**>3%AZ**>3%MT**>1%MT*>5%AZ*,其中薄荷醇组促渗效果与浓度呈线性正相关,而氮酮组则呈线性负相关.虽然各组促渗剂均起促进作用,但薄荷醇组的效果优于氮酮组,加之薄荷醇属天然物质,毒副作用低,所以更适合作为药物外用制剂的促渗剂.     

海南藏族自治州发展生态畜牧业浅议

畜牧业是一个特殊而复杂的产业系统,除受经济、社会因素的影响外,还受自然因素的影响。因此,在畜牧业的发展过程中,经营者必须综合考虑其经济、社会和生态效益,遵循生态学原理、经济学原理,按照畜牧业自身特点和规律,合理地配置资源,组织生产,大力发展高原生态型畜牧业。只有大力发展高原生态畜牧业,海南州的畜牧业才有可能走出一条可持续发展的路子。