PRRSV重组N蛋白表达、纯化及间接ELISA检测试剂盒的研制

采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因（PRRSV N gene）,将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21（DM3）诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组N蛋白获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为41 000,并具有良好的免疫学活性。扩大诱导培养,收集菌体,提取包涵体,用GST-Protein Purtification Kit亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯度达到90%以上,可满足诊断抗原质量要求。用纯化PRRSV重组核衣壳蛋白GST-N为包被抗原,建立检测PRRSV血清的间接ELISA诊断方法,并组装ELISA试剂盒。优化后抗原最适包被质量浓度为2.5mg/L;血清最适稀释度为1∶100;对血清样本检测临界值为0.224;与美国IDEXX公司的HerdChek ELISA试剂盒符合率为92%,特异性为95%,敏感性为90%;与猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒等常见猪繁殖障碍病标准阳性血清无交叉反应。ELISA试剂盒批内和批间变异系数分别为3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。置4℃条件保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。该试剂盒对350份临床疑似血清检出率为88.6%。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。     

蓟马取食对苜蓿氨基酸组成及含量的影响

为了探究蓟马取食对苜蓿(Medicago sativa L.)氨基酸组成及含量的影响,本研究以'草原2号'(Medicago varia Martin.'Caoyuan No.2')感蓟马品种和'草原4号'(Medicago sativa L.'Caoyuan No.4')抗蓟马品种为材料,分别进行牛角花齿蓟马(Odo...     

公司化运营的丹寨模式：新型基层兽医服务模式（三）

公司化运营丹寨模式是贵州省建立的一种新的基层兽医服务模式。为推广这一新模式,从模式的成立背景、项目营运、收入分配和运转成效等方面进行了系统介绍,从村级防检员收入、服务能力等方面剖析了该新型模式的先进性,并提出了推动该模式持续健康发展的相关建议。     

貂,貉,犬多种免疫球蛋白的研究与应用

利用犬温热，细小病毒性肠炎，犬传染性肝炎，狂犬病等弱毒株，以香菇多糖和动物的核糖，多肽做为免疫增强剂，对异源动物羊，猪，犊牛，家兔进行了免疫应答，筛选出了猪做为异源免疫动物。在免疫增强剂的参与下，完成了多次免疫应答，达到了理想的免疫球蛋白（ＩｇＧ），通过试验摸清了该制剂的免疫程序，确定了生产工艺，经重复性试验，稳定性试验及含量测定，以及临床应用试验和现志应用试验均达以了预期效果，该制剂经冷冻干燥后     

足迹特征在警犬使用中的实战运用

本文通过介绍足迹特征在警犬追踪中起点突破、作业判断、断踪处理、终点鉴别方法中的具体运用,分析了足迹特征在警犬追踪过程中的重要性,强调了“人犬合一”的警犬追踪要与足迹特征相结合的必要性和可操作性。     

论甘南高原生态建设与可持续发展战略

简述了甘南高原区的自然地理特点,分析了甘南高原区的主要生态环境问题及其成因;指出甘南高原的生态地位十分重要,其生态环境严重恶化的状况已直接威胁到本区域乃至黄河、长江流域社会经济的可持续发展,大力开展生态保护与生态建设已刻不容缓,提出了甘南高原区生态保护、生态建设与可持续发展的对策建议。     

日粮中添加丙烯酸对绵羊消化代谢的影响

选取25只身体健康,体重32kg左右的8月龄中国美利奴(新疆型)细毛公羊,日粮精粗比为25∶75,采用分组试验设计,分别是对照组、添喂丙酸8,12mmol/(d·只)组和添喂丙烯酸8,12mmol/(d·只)组,研究丙烯酸对绵羊消化代谢和体增重的影响。结果表明,与对照组和添喂丙酸组相比,添喂丙烯酸组绵羊干物质采食量没有显著差异(P>0.05);添喂丙烯酸组与对照组相比,半纤维素消化率提高5.15%~9.70%,纤维素消化率提高3.64%~5.73%,但差异不显著(P>0.05);8mmol丙烯酸组钙、磷的消化率分别高于8mmol丙酸组2.86%和8.39%,但差异不显著(P>0.05);添喂8,12mmol/(d·只)丙烯酸组绵羊的尿氮排出量(g/d)分别低于对照组12%和18%,而N保留率与对照组相比分别提高5.35%和3.91%,但均没有显著差异(P>0.05)。添喂丙烯酸组绵羊的体增重和饲料利用率与对照组和丙酸组相比没有显著差异(P>0.05)。本研究表明,添喂丙烯酸对绵羊的采食量、干物质、有机物、粗蛋白、纤维素、半纤维素的消化量(率)均无显著影响(P>0.05),对绵羊氮、钙、磷的代谢无显著影响(P>0.05)。     

猪链球菌2型疫苗效力检验的动物模型研究进展

猪链球菌病是一种重要的人兽共患病,近年该病在亚洲重新暴发。CpG寡脱氧核苷酸等佐剂以及逆向疫苗学方法、标签式突变法等一系列方法的相继出现,有利于猪链球菌特别是猪链球菌2型疫苗的研究,但因缺乏理想的动物模型来评价疫苗效力,给该病的防治增加了难度。2007年-2010年,针对猪链球菌2型对小鼠、斑马鱼、猪等模型动物的致病性,以及这些动物易感性等方面做了大量研究。论文对近年来与猪链球菌2型疫苗效力检验动物模型有关的研究进行了综述。     

圈养条件下北极熊的饲养繁殖

对大连森林动物园圈养条件下北极熊的饲养管理、发情交配、繁殖及幼仔人工育幼等方面进行了研究与分析,为北极熊在动物园的饲养与繁殖,尤其在人工育幼方面取得了大量的基础数据,希望对北极熊的圈养繁殖起到一定的推动作用。     

夏季热应激对奶牛的影响及预防措施

夏季热应激会降低奶牛的生产性能,影响养殖行业的经济效益,严重制约畜牧业的发展。因此牧场热应激的防控工作显得尤为重要。本文就热应激对奶牛的行为、采食量、繁殖性能的影响等进行综述,探讨缓解热应激的措施,以期帮助牧场管理人员制定预防热应激的策略。