布氏乳杆菌和甲酸对青藏高原不同物候期燕麦青贮饲料发酵品质和细菌群落的影响

为探讨布氏乳杆菌和甲酸对青藏高原不同物候期燕麦（Avena sativa L.）青贮饲料发酵品质和细菌群落的影响,本试验以开花期、乳熟期和蜡熟期燕麦为原料,设置对照、添加甲酸和添加布氏乳杆菌3个处理,青贮90 d后,测定其营养成分、发酵指标和细菌群落组成。结果表明：布氏乳杆菌和甲酸处理均改变不同物候期燕麦青贮饲料中细菌群落组成（P<0.05）,并提高其乳酸细菌相对丰富度;与对照相比,用布氏乳杆菌和甲酸处理不同物候期的燕麦青贮后,蜡熟期的燕麦pH值降低（P<0.05）,乙酸均增加9.7%,丙酸分别降低11.6%和8.6%,氨态氮分别降低11.3%和19.2%。综合细菌群落组成、发酵品质和营养成分来看,蜡熟期的燕麦添加布氏乳杆菌和甲酸后,其青贮品质较佳。     

四川低山丘陵地区多年生冷季型优良牧草引种试验

2001～2003年在四川省洪雅县对从国内外引进的15个多年生冷季型牧草品种的生育状况、产量、营养品质等指标进行了试验研究.结果表明:由于气候原因紫花苜蓿和百脉根不能结实;白三叶品种Ladino和紫花苜蓿品种Amerigraze702的产草量最高,而单位面积粗蛋白质产量最高的是红三叶品种Cherokee;所引进的禾本科牧草中只有鸭茅品种Pennlate可以越夏.     

9个野生早熟禾对低温胁迫的生理响应及苗期抗寒性评价

以甘肃省境内采集的9个野生早熟禾（Poa）为试验材料,设5,0,-5,-10℃共4个温度处理,探讨其对低温胁迫的生理响应和抗寒性,为抗寒早熟禾种质材料筛选和新品种选育提供依据。结果表明：随着温度下降,各材料的叶片相对膜透性逐渐增大,游离脯氨酸（Pro）、可溶性糖（SS）、可溶性蛋白（SP）、丙二醛（MDA）含量逐渐增加,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性逐渐增强。运用隶属函数法综合评价9个材料苗期抗寒性发现,一年生早熟禾（P. annua）抗寒性最强,小药早熟禾（P. micrandra）、草地早熟禾（天祝）（P. pratensis）和草地早熟禾（甘南）抗寒性中等;硬质早熟禾（P. sphondylodes）、波伐早熟禾（P. poophagorum）、草地早熟禾（肃南）、草地早熟禾 （渭源）、草地早熟禾（兴隆山）抗寒性弱。相关性分析表明,SP含量与抗寒综合评价值极显著正相关（P<0.01）,POD活性与抗寒综合评价值显著正相关 （P<0.05）,Pro含量、SS含量、SOD活性、海拔与抗寒综合评价值成正相关,相对膜透性、MDA含量和年均温与抗寒综合评价值成负相关。     

乳酸菌和纤维素酶对光叶紫花苕青贮发酵品质的影响

为明确乳酸菌、纤维素酶及二者混合物对光叶紫花苕（Vicia villosa var. glabrescens）青贮发酵品质的影响,设置CK、乳酸菌（0.5×10⁶, 1.0×10⁶,1.5×10⁶ cfu·g^-1）、纤维素酶（2.0, 3.3, 4.6 g·t^-1）,以及乳酸菌+纤维素酶（0.5×10⁶ cfu·g^-1+2.0 g·t^-1,1.0×10⁶ cfu·g^-1 + 3.3 g·t^-1, 1.5×10⁶ cfu·g^-1+4.6 g·t^-1）共10个处理,青贮60 d后测定相关指标。结果表明：除乳酸菌外,其他处理组都不同程度的降低了青贮饲料pH值,增加了可溶性碳水化合物（WSC）含量;添加3.3 g·t^-1纤维素酶显著降低了青贮饲料的中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量（P<0.05）;添加1.0×10⁶ cfu·g^-1乳酸菌+3.3 g·t^-1纤维素酶显著提高了青贮饲料的粗蛋白（CP）和乳酸含量（P<0.05）;添加0.5×10⁶ cfu·g^-1乳酸菌+2.0 g·t^-1纤维素酶显著降低了氨态氮（NH₃-N）含量（P<0.05）。综合各项指标,添加0.5×10⁶ cfu·g^-1乳酸菌、2.0 g·t^-1纤维素酶或1.0×10⁶ cfu·g^-1乳酸菌+3.3 g·t^-1纤维素酶的光叶紫花苕发酵品质最好。     

饲料级果胶酶对肉仔鸡生长性能的影响

试验旨在研究日粮中添加饲料级果胶酶对肉仔鸡生长性能的影响。选择体重、健康状况基本一致的AA肉仔鸡240只,随机等分为试验组与对照组2个组,每组设3个重复,每重复40只,分成2个处理组,试验组饲喂在基础日粮中添加0.01％含6000U/g 的饲料级果胶酶的日粮,进行为期35d的试验。结果表明,与对照组相比,试验组日增重提高9.51％（P〈0.05）;料重比降低7.06％（P〈0.05）;死淘率降低11.00％（P〈0.05）。说明在日粮中添加饲料级果胶酶可显著提高肉仔鸡的生长性能。     

口蹄疫病毒Asial/JS/China/2005株基因组全长感染性克隆的构建

利用长距离RT-PCR技术扩增病毒基因组3'端覆盖口蹄疫病毒Asial/JS/China/2005株近全长的3个片段(共约7.5 kb),并利用单一酶切位点将其分别克隆到pBlueseriptSK+载体上.利用融合PCR扩增到基因组5'端含有15个C碱基的基因片段(约700 bp),并将其连接至pGEM-T载体.最后将这4个片段的阳性克隆装配至剔除T7启动子的低拷贝载体pcDNA3.1/Zeo(+)中构建该病毒株的全长cDNA克隆.以构建的FMDV Asial/JS/China/2005株全长cDNA为模板,使用TTRNA聚合酶在体外转录得到病毒RNA,通过脂质体将其导入BHK细胞获得拯救病毒.对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析结果证实,通过体外转录获得了具有感染性的口蹄疫病毒.该株感染性克隆的构建为深入研究口蹄疫病毒的致病机制及研制新型疫苗等奠定了基础.     

饲养层细胞的接种密度对分离培养胚胎干细胞的影响

建立有效的昆明白小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层培养体系,用于分离和培养小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ES细胞)的研究.(1)取怀孕14.5 d昆明白小鼠胎儿分离成纤维细胞,利用体外培养体系分离传代,选取生长旺盛并且已纯化的P3代的MEF,经丝裂霉素处理后.用细胞计数板计算活细胞数,分别按1×104、1×106、1×108/mL密度接种,制备饲养层,观察不同密度饲养层的生长状况.(2)取怀孕4 d的昆明白小鼠囊胚,接种在不同密度饲养层上.观察不同密度饲养层上囊胚、ICM及ES细胞的克隆生长情况.结果显示:囊胚在密度为1 × 106/mL的饲养层上,贴壁率和ICM孵出率分别为(97.0±3.606)%和(96.3±2.887)%,显著高于其他2组;密度为1×104/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率高于密度为1×104/mL(差异极显著,P<0.01)和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率(差异显著,P<0.05);而1×104/mL饲养层和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率差异不显著(P>0.05).结果表明:以1×104/mL密度接种的MEF作为饲养层,最适合用于分离培养昆明白小鼠ES细胞,有利于囊胚的发育,ICM的增殖,促进ES细胞的增殖,并起到抑制其分化的作用.     

RNA干扰技术抑制口蹄疫病毒复制研究进展

RNA干扰(RNAi)技术作为一种特异性地抑制哺乳类细胞外源性或内源性基因表达的方法,近年来在口蹄疫病毒(FMDV)防治研究中迅速发展起来。文章综述了利用RNAi技术抑制口蹄疫病毒复制的各种策略,包括化学合成或病毒载体转染构建抑制FMDV复制的小干扰RNA(siRNA)、构建多个FMDV功能区的SiRNA、交叉抑制不同血清型FMDV的siRNA的设计和双功能载体来双向防控FMDV的SiR-NA设计。RNAi干扰技术的发展,为设计防治口蹄疫新型疫苗奠定了基础。     

不同咸蛋腌制温度对禽流感毒灭活的影响

经人工接种H9亚型禽流感病毒(AIV)的鸭蛋,分别在12℃、22℃和32℃条件下按常规方法腌制于饱和盐水中,同时以置饱和盐水中的禽流感病毒和未经处理禽流感病毒样品作为对照,通过MDCK细胞培养、间接免疫荧光方法定期进行禽流感病毒毒力测定,结果在12℃、22℃和32℃条件下腌制鸭蛋中的禽流感病毒分别于49天、27天和4天失去毒力,置饱和盐水中的禽流感病毒分别在27天、9天和2天失去毒力,而未经处理的禽流感病毒分别在92天、29天和17天失去毒力;不同试验温度条件下,以荧光RT-PCR检测腌制鸭蛋和对照样品中的禽流感病毒,在100天后仍可检出病毒核酸(Ct<30)。以上检测结果表明,在腌制鸭蛋时于常温下置饱和盐水腌制40天以上的传统咸蛋生产工艺,可使禽流感病毒完全失去毒力,腌制的鲜咸蛋携带或传播禽流感病毒的风险极低或不存在风险。     

猪萎缩鼻炎研究进展

猪萎缩性鼻炎是猪的一种重要的呼吸系统疾病 ,该病给养猪业造成了重大的经济损失 ,其病原是支气管败血波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌。支气管败血波氏杆菌引起非进行性萎缩性鼻炎 ,而产毒素多杀性巴氏杆菌引起进行性萎缩性鼻炎。二者在致病机理、临床症状、病理变化、流行病学和控制方法等方面存在很大差异。鉴于环境因素和病原因子在此病发生过程中均起一定作用 ,对本病的控制应是多种措施的综合。