大豆中脂肪氧化酶同功酶的鉴定研究

大豆是高蛋白和优质油料作物,自古以来,其丰富的营养价值对改善国民膳食营养水平起着重要作用,但豆油的不稳定性以及豆制品具有的豆腥味,影响人们对大豆的更有效利用.大豆中存在约占总蛋白含量1%的脂肪氧化酶(Lipoxygenase,简称LOX),能催化空气中氧对不     

重组牦牛肌肉生长抑制素成熟肽的纯化及其免疫原性研究

为了探索牦牛MSTN的作用机制,寻找合适的阻断MSTN活性的方法,最终实现牦牛的高效率育肥,本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛MSTN成熟肽基因,构建MSTN-pET28a(+)重组表达载体,进而在E.coliBL21(DE3)宿主菌中进行表达,将表达产物用亲和层析纯化,最后用ELISA方法检测牦牛MSTN重组成熟肽的免疫原性。重组载体中连接的牦牛MSTN成熟肽基因包含330bp,编码109个氨基酸。含MSTN-pET28a(+)重组载体的工程菌经0.1mmol.L-1 IPTG诱导表达6h后,MSTN成熟肽的表达量约占蛋白总量的21%,总蛋白经亲和层析纯化后得到了高纯度的牦牛MSTN重组成熟肽,分子量约16.5ku;ELISA结果显示,兔抗牦牛MSTN重组成熟肽的血清效价为32 000个抗体单位,表明牦牛MSTN重组成熟肽具有较好的免疫原性。本研究建立了牦牛MSTN重组成熟肽高效表达系统并纯化获得具有免疫原性的牦牛重组MSTN成熟肽,这为通过调控MSTN功能来改良牦牛产肉性能的研究储备了技术条件。     

牦牛解偶联蛋白 3基因的克隆测序和肌肉表达谱

为了比较高原牦牛和低海拔地区黄牛解偶联蛋白-3(UCP3)基因序列及其在骨骼肌中的表达水平,采用RT-PCR方法从牦牛背最长肌中克隆UCP3基因,所获得的cDNA序列编码区及推导的氨基酸序列与GenBank中黄牛相应序列相比相似度均为99.04%,编码区有9个碱基差异,并导致3个氨基酸的改变。实时定量RT-PCR分析显示,牦牛背最长肌中UCP2 mRNA水平显著高于黄牛,而背最长肌中UCP3 mRNA及股二头肌中UCP2、UCP3 mRNA水平均显著低于黄牛。另外,牦牛背最长肌中Mn-SOD活力显著高于黄牛。这些特征可能与牦牛肌肉在低氧环境中的能量代谢有关。     

藏绵羊肌红蛋白（Mb）基因克隆及肌肉Mb含量的测定

为探索藏绵羊适应青藏高原缺氧环境的分子机制,克隆了藏绵羊的肌红蛋白（Mb）基因,纯化了心肌Mb,同时比较了心肌和骨骼肌的Mb含量。用RT-PCR克隆了心肌Mb的cDNA,长度为640 bp,编码153个氨基酸。试验采用盐析、CM-Sephadex离子交换层析、Sephadex G-50凝胶层析等方法分离纯化了藏绵羊Mb,SDS-PAGE分析其分子量约为17kD。组织含量测定表明,藏绵羊心肌中Mb含量极显著高于骨骼肌。     

不同胎次草地藏系绵羊乳营养成分、酶活力及蛋白组分的研究

对不同胎次草地藏系绵羊乳营养成分含量、乳酶活力及乳蛋白组分进行了研究.结果表明草地藏系绵羊乳蛋白平均含量为48.45±13.21 g/L,乳糖平均含量为41.93±5.06 g/L,乳脂肪平均含量为69.43±11.41 g/L.乳蛋白含量第二胎显著高于第一胎(P＜0.05),第四胎极显著高于第一胎(P＜0.01);不同胎次间乳糖含量差异不显著(P＞0.05);乳脂含量随着胎次增加呈下降趋势,第一胎乳脂含量显著高于第四胎(P＜0.05).乳中γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化物酶(LP)和淀粉酶(AMY)的活力分别为268.25±89.18 U/100 mL、231.85±107.38 U/100mL、3.97±3.68 U/mL和80.65±73.91 U/100 mL;γ-GT的活力在不同胎次间未见明显变化(P＞0.05),而AKP和LP的活力在不同胎次间虽有的变化,但差异不明显(P＞0.05).乳蛋白主要包括α-乳清蛋白(α-La)、β-乳球蛋白(β-Lg)、酪蛋白(CN)、免疫球蛋白(IgG)等组分.其中酪蛋白的相对含量约50%～52%,优势明显;α-La相对含量较低.不同胎次间主要蛋白组分相对含量差异不显著(P＞0.05).对乳上皮粘蛋白(MUC1)研究发现它有4种分子量类型,分子量分别为214 kD、209 kD、207 kD、205 kD.     

川西高原黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C基因cDNA的克隆及序列分析

[目的]为研究以鼠兔LDH-C4为靶蛋白的节育型鼠药奠定基础。[方法]采用简并引物PCR克隆得到黑唇鼠兔LDH-C基因的EST序列,再根据EST序列采用RACE技术克隆出基因的开放阅读框（ORF）全长,和3’UTR序列。[结果]整个cDNA全长1 498 bp,其中ORF长996 bp,编码332个氨基酸,3’UTR长486 bp。ORF序列比对显示LDH-C基因在大的分类单位上均很保守。系统树分析显示黑唇鼠兔的LDH-C基因和灵长类及偶蹄目的遗传距离较近,和啮齿目较远。[结论]成功的克隆得到了黑唇鼠兔的LDH-C基因的cDNA序列。     

藏山乳主要营养养成分及乳酶,乳清蛋白的研究

本文研究了分布西藏和四川地区的藏山羊乳蛋白、乳糖和乳脂含量，并对乳中４种酶活力及乳清蛋白的组成进行了研究。结果表明：藏山羊乳中３种营养成分存在一的地区差异，脱脂乳中乳酸脱氢酶，碱性磷酸酶，ｒ－保氨酰转肽酶、乳过氧化物酶活力分别为８１．９±３７．８，７．７±３．５，４３７．４±９３．０，５３２．７±２０２．６单位。乳过氧化物酶在体外可被１０＾－５Ｍ的硫氰酸根或乳酸根活化。用琼脂糖凝胶电泳可将乳ＬＤＨ