猪圆环病毒:一种新发现的病原

１９７４年,Ｔｉｓｃｈｅｒ［３２］发现,在多株连续传代的ＰＫ－１５细胞中存在一种形态类似小ＲＮＡ病毒的圆型小颗粒病毒,该病毒可以持续感染ＰＫ－１５细胞,不会引起细胞病变。Ｔｉｓｃｈｅｒ［３３］证实,ＰＫ－１５细胞中存在的这种病毒来源于当初制备ＰＫ－１５细胞的猪肾组织,病毒的基因组由一个单股呈圆环状的ＤＮＡ链组成,是一种新发现的病毒,称为猪圆环病毒（ＰＣＶ）。血清学调查表明,ＰＣＶ在柏林附近猪群中的阳性感染率高达７７％－９５％［３４］,之后加拿大［１１］、新西兰［１８］、英国［１２］、北爱尔兰［１…     

RT—PCR一步法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

根据已发表的ＩＢＶＳ基因核苷酸序列,自行设计合成了一对跨幅约０．９ｋｂ的引物。该区段包括了Ｓ１基因Ｃ末端的４００ｂｐ和Ｓ２基因Ｎ末端的５００ｂｐ。用该引物对５株ＩＢＶ参考毒株Ｇｒａｙ、Ｍ４１、Ｈ１２０、Ｈ５２和ＭＡ５进行ＲＴ－ＰＣＲ一步法扩增均获得预期的ＰＣＲ产物,该引物的ＲＴ－ＰＣＲ灵敏度检测结果表明,可以检测出０．１１２ｐｇ／μＬ的模板。用该引物对３０个地方分离株进行检测,１８株呈阳性,与鸡胚传代及电镜观察结果一致。     

口蹄疫3A蛋白基因的表达及其抗原性研究

从pUCm-3ABC质粒切割FMDV的3A蛋白基因DNA，将其与pET-30c( )载体连接，构建pET30C3A原核重组表达质粒，序列分析表明，pET30C3A重组质粒的插入3A蛋白基因的阅读框架正确。pET30C3A—BL21经IPTG诱导后可表达3A融合蛋白。Westem Blot试验证明该表达蛋白具有较好的抗原活性，提示可进一步用重组表达的FMDV 3A蛋白作抗原检测FMD。     

水泡性口炎病毒N基因的克隆及其PCR检测方法的建立

根据国外发表的水泡性口炎病毒(VSV)基因组核苷酸序列，设计了2对特异性引物，通过RT-PCR方法得到N基因。将此基因与pGEM-T Easy Vector相连，通过蓝白斑筛选出阳性克隆，碱裂解法小剂量提取质粒。经测定，N基因与参考序列同源性高达99％。同时根据克隆产物进行亚克隆，建立了VSV的PCR检测方法。     

人与动物源冠状病毒的流行病学特征

为全面了解冠状病毒的流行病学研究进展及其造成的影响,本文综述了人与动物源冠状病毒的流行病学特征,冠状病毒的宿主特性、病毒变异和病毒的跨物种传播;阐述了多种禽源、猪源、犬源、牛源、马源及人源冠状病毒的流行状况、发病特点和流行过程,冠状病毒在流行过程中所出现的遗传变异特性;明确了这些人与动物源冠状病毒对于人类健康、公共卫生和畜牧业安全所造成的影响。研究表明,冠状病毒在感染动物间广泛存在,存在病毒变异引起的跨种属宿主感染,病毒变异致病毒多样性。研究结果对于深入开展冠状病毒的基础研究、应用研究和有效防控措施提供借鉴和帮助。     

肉鸡空肠弯曲杆菌的监测与分析

本文对集约化肉鸡场空肠弯曲杆菌流行状况进行监测与分析。1 981份样品中,JM地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为6.48%~7.48%,JZ地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为9.45%~9.91%,JN地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为14.6%~16.9%。17种抗菌药中,对36株肉鸡空肠弯曲菌分离株高度敏感的是:阿米卡星(86.1%)、链霉素(91.7%)、庆大霉素(94.4%)、卡那霉素(83.3%)、阿奇霉素(86.1%)、头孢噻肟(83.3%),另外有3种抗菌药对肉鸡空肠弯曲杆菌表现出较好的敏感性,分别是红霉素(61.1%)、氨苄西林(78.8%)、青霉素(69.4%),其它临床常用抗菌药对36株肉鸡空肠弯曲杆菌则表现出较强的耐药性。JM地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至10耐,JZ地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为8耐至12耐,JN地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至11耐。研究结果证明,不同地区肉鸡中空肠弯曲杆菌的流行和耐药状况呈现多样化。     

水疱性口炎病毒N基因原核表达载体的构建及表达

针对水疱性口炎病毒(VSV)N基因设计特异性引物,在引物中分别加入EcoR 和Xho 酶切位点。RT-PCR扩增后得到目的基因,将其克隆到表达载体pET30c,连接产物转化于DH5α菌株,在含Kan+的平板上37℃培养24h,然后挑取白色菌落,鉴定为阳性者,转化于BL21菌株,再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导获得高效表达。表达融合蛋白分子质量为53ku(目的蛋白大约47ku),同预期蛋白大小相近。Westernblot检测表明,其能与本病毒阳性血清发生特异性反应,表达蛋白有望成为有价值的VSV诊断抗原。     

我国马立克氏病研究进展

马立克氏病是危害养禽业健康发展的主要疫病。本文从马立克氏病的流行病学、致瘤基因、诊断技术、疫苗研究等几个方面,对国内马立克氏病的研究进展进行了综述。     

用Nested-PCR诊断鸡弯曲菌病的研究

本研究采用Nested-PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested-PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点.研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视.