斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因shRNA干扰载体的构建及效果评价

利用Invitrogen公司的在线生物学软件分析斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因,设计针对CP基因不同位置的小发卡RNA( short hairpin RNA,shRNA)干扰序列[其结构特征为正链( 19 nt) -环(4 nt) -负链(19 nt)].化学合成这些序列,并退火连接为双链干扰片段,将双链干扰片段定向克隆到干扰载体pENTRTM/U6中,构建shRNA干扰载体pshRNA -124、pshRNA-896和pshRNA-NNV.然后,用脂质体转染法分别将3种shRNA干扰载体和pEGFP-CP基因共转染导入黑头呆鱼(FHM)肌肉细胞,荧光显微镜观察细胞荧光强度,分析荧光抑制效率,Real-time RT-PCR检测CP基因mRNA的表达水平变化.结果表明,在pEGFP-CP与shRNA干扰载体共转染组,pshRNA-124、pshRNA-896、pshRNA-NNV的荧光抑制效率分别为47％、68％、51％.3种shRNA干扰载体都有干扰效果,均能干扰绿色荧光蛋白的表达,其中pshRNA-896干扰效率最好.Real-time RT-PCR检测表明,干扰质粒pshRNA-124、pshRNA-896、pshRNA-NNV对pEGFP-CP基因的沉默效率分别约为60％、96％和55％,与对照组相比差异显著(P＜0.05).研究表明,靶向斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因的shRNA干扰载体构建成功,为进一步运用RNA干扰技术进行CP基因的功能研究奠定了基础.     

15种鱼转铁蛋白cDNA序列密码子使用比较分析

运用DNAman v4.0分析软件,对克隆的鲫鱼血清转铁蛋白cDNA序列与文献中的14种鱼转铁蛋白cDNA序列的同源性、密码子使用频率和密码子使用偏性进行分析,结果表明:鲤形目鱼类Tf的cDNA序列同源性在46%以上,而鲑形目鱼类Tf的cDNA序列同源性在34%-99%之间,变化较大。密码子使用频率越高或使用偏性越小,说明陔密码子编码的氨基酸对蛋白质空间结构的形成和基本生理功能的影响也越重要;在进化上分化时间越早的物种,密码子使用频率和使用偏性的差异较小,反之则较大;在同源性方面,在进化上比较接近的物种,基因的密码子使用频率和使用偏性指标比较接近或基本相同。根据对15种鱼Tf的cDNA序列同源性和密码子分析,推测Tf基因的进化顺序是:鲤形目、鳕形目、鲑形目和鲽形目。     

白缘(鱼央)染色体核型分析

本文对长江上游水系的白缘鱼央染色体作了分析研究。采用肾脏细胞法和空气干燥法制片 ,Giem sa染色。结果表明 :白缘鱼央的染色体数在 2 2～ 2 6之间 ,并确定 2n =2 4的类型占 73 7% ,臂数NF =4 6 ,染色体单倍体总长度为 2 8 75 μm。由核型公式 2 0m +2sm +2st确定为雌性个体。尚未发现有多倍体现象 ,也未发现异型染色体和随体染色体。     

3种育苗因素对闽楠容器苗生长和根系发育的影响

[目的]通过研究容器育苗中不同处理对闽楠苗木生长和根系发育指标的影响,探讨闽楠容器苗在不同育苗措施组合下苗木生长效果的差异,得到闽楠容器育苗的最佳措施组合,最终为闽楠优质容器苗培育提供科技支撑和实践指导.[方法]以1年生闽楠容器苗为材料,采用析因实验设计,系统研究基质比例、缓释肥施用量和容器大小对闽楠容器苗生长和根系发...     

蜂王浆疗烧伤

今年5月23日,武汉市蔡甸区李集镇一位88岁的老人在打扫自家环境卫生,将杂物、树枝、野草集中烧毁,不幸灾难临头.在燃烧杂物中,约有1 kg不明化工原料被燃烧,火势较猛,老人衣服着火,被惊呆了,家人发现,马上替她脱下着火衣服,拉离现场.     

基质和生根剂对火力楠扦插生根的影响研究

为探讨不同基质、不同生根剂以及同一生根剂在不同浓度下对火力楠Michelia macclurei扦插繁育的影响,研究采用3种浓度水平的ABT溶液(800、500和333 mg/kg)处理火力楠穗条,分别以3种基质(100%黄心土、100%泥炭土和65%泥炭土+25%木糠+10%珍珠岩)进行扦插,比较不同浓度生根剂和基质组合中插穗的生根率,并检测了ABT、赤霉素和根太阳3种生根剂对火力楠穗条的促生根效果。结果表明,基质类型和ABT浓度水平对火力楠插穗的生根有显著影响,但这两个因素之间的交互作用不显著,其中最佳扦插基质为黄心土,低浓度的ABT溶液的促生根效果优于高浓度,但与空白对照相比,3种生根剂对火力楠插穗生根均无明显的促进作用,即研究所选取的火力楠家系扦插繁育无需使用外源激素促进生根,可选用黄心土为扦插基质,但如何进一步提高扦插生根率仍需进一步研究。     

农业物联网技术发展程度的实证分析

近年来快速发展的物联网技术对农业的产业升级起到了积极促进作用。首先对国内外物联网概念与农业发展融合的现况进行概述,采用模糊层次分析法(AHP)建立农业与物联网融合发展程度指标体系,基于农业与物联网融合度指标体系,分析我国各省农业与物联网融合发展水平,结合市政结果给出对应的政策建议,从而为政府在制定农业产业政策时提供农民、研发单位及消费者等相关用户参考信息,发展国内适用并且能与国际接轨的农业物联网。     

连续污泥农用对土壤微团聚体及有机质组分中 重金属分布的影响

采用物理和化学相结合的分组方法,将土壤逐级分离成不同粒径后再分出以有机无机复合体存在的重组,研究施加不同污泥后土壤中不同粒径颗粒、不同重组结合态腐殖质组分中铜锌镉的分配特征。结果表明,土壤重金属浓度随其粒径减小呈不断升高趋势,但施用污泥增加了土壤细砂粒级组分中的重金属所占比例,且随施用污泥中重金属浓度上升而增率升高。施加污泥后,不同粒径土壤颗粒中松结态腐殖质比例明显增加,紧结态腐殖质所占比例下降。施加污泥后土壤细砂颗粒松结态腐殖质中铜锌镉所占比例上升,紧结态腐殖质中铜锌镉所占比例下降。粉砂粒级松结态腐殖质中铜镉比例上升,紧结态腐殖质中铜镉所占比例下降。细粉砂和胶体粒级不同结合态腐殖质中铜锌镉比例没有明显变化。不同粒径组分土壤颗粒中重金属比例变化不仅与不同结合态腐殖质的比例有关,还与土壤颗粒大小和土壤性质有关。     

RS和GIS支持下农业非点源污染模型研究评述

农业非点源污染主要由降雨径流、土壤侵蚀、地表溶质溶出和土壤溶质渗漏4个过程形成。从数据获取和数据处理两方面分析了农业非点源污染模型研究中引入RS和G IS技术的必要性和可行性,总结了模型与RS、G IS的集成主要表现为3个层次,在此基础上提出引入空间决策支持系统是集成研究的发展方向,将目前模型与RS、G IS集成方式概括为松散集成、紧密集成和完全集成3种,阐述了每种集成方式的实现方法和难易程度。综合叙述和展望了国内外农业非点源污染模型与RS、G IS集成研究取得的成果和最新研究进展,分析了集成研究面临的问题,对其中的主要问题如模型验证、运算效率以及模型与G IS匹配问题进行了深入探讨并且提出了解决的办法。     

有机络合强化植物修复的环境风险研究：Ⅱ．不同质地对EDTA淋溶土壤中重金属的动态作用

通过土柱淋溶试验研究了EDTA对不同质地土壤中Cu,Zn,Cd,Pb淋溶作的影响及其动态特征。结果表明，土壤质地对EDTA淋溶重金属元素的行为有一定的影响。这些金属的淋失主要发生在淋溶初期，可能造成地下水污染的潜在风险。