鸡肾型IBV山东分离株核蛋白基因的遗传变异分析

应用RT-PCR方法扩增到了山东省2006-2007年分离的10株肾型IBV核蛋白(N)基因片段,并将其进行了克隆、序列测定及分析.结果发现,10株肾型IBV分离株核蛋白基因均含有1个长1 230 bp的ORF,编码由409个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的插入和缺失.与GenBank中的20个IBV参考毒株核蛋白基因序列进行比较和分析,发现10株肾型IBV分离株主要分布于2个群中.第Ⅰ群与弱毒疫苗株H120和参考毒株D41、D1466的亲缘关系较近,第Ⅱ群与参考毒株LX4、GDS14的亲缘关系较近.对核蛋白基因及其局部功能区序列比较发现,山东分离株与H120疫苗株核蛋白相比存在广泛的氨基酸变异,以点突变为主,突变位点无明显规律性.     

猪赤霉菌素中毒的诊治

自2003年12月份以来，山东省许多地区的猪场陆续出现猪脱肛或阴道脱出的病例，经过临床观察和实验室检查，确诊为赤霉菌素中毒。经及时采取综合防治措施，有效控制了该病的进一步发展。     

新型农村合作医疗制度实施效果调查——以山东省泰安市满庄镇为例

本文对山东省泰安市满庄镇新型农村合作医疗实施情况进行了调查,总结其取得的成果,并结合调查过程中反映的问题,为改革的进一步推进提出了积极的对策建议。     

黄山栾快繁体系建立优化培养方案研究

以黄山栾优良单株繁殖的种子为外植体,采用L9(34)正交试验设计方法,探索建立黄山栾快繁体系。通过实验,找到适合黄山栾种子无菌体建立的方法是:酒精消毒1min,升汞消毒10min;把消毒后种子放在湿润的无菌滤纸上可快速培养无菌苗;试验结果得出:适合侧芽生长的培养基是:MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.01mg/L;适合侧芽伸长生长的培养基组合是:MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.01mg/L;适合茎段愈伤组织增殖的培养基是:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.03mg/L;适合诱导茎段再生芽生长的培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.05mg/L。     

利用噬菌体随机肽库筛选NDV单克隆抗体识别的抗原表位

为了获得新城疫病毒（NDV）HN蛋白单克隆抗体1E5识别的抗原位点, 以NDV LaSota株HN蛋白的单克隆抗体（mAb）1E5为靶分子,采用噬菌体随机7肽库进行亲和筛选,并用间接ELISA和竞争ELISA鉴定阳性克隆。最终得到4组可用的7肽序列,同源性分析表明展示肽序列与HN蛋白的388~395氨基酸具有较高的同源性,所以它们的共有序列L * * * PNT是抗原表位的骨架结构。这个表位的位置与以往的文献报道不同,它很可能是新城疫病毒HN蛋白的另一个重要的抗原位点。     

细胞培养对PRRSV-SD分离株滴度的影响

猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)仍然是危害世界养猪业的主要疾病之一,严重制约着养猪业的发展。PRRSV的增殖受到多重因素的影响,其中细胞培养是PRRSV增殖的基础。通过实验探讨血清浓度、培养基pH值、细胞密度对PRRSV-SD滴度的影响,筛选出最佳培养条件,为PRRS疫苗研制打下良好基础。     

液体比重法无损分选多种植物种子硬实与非硬实的研究

利用不同比重的硫酸溶液,对苦豆子、乌拉尔甘草、草决明、黄芪4份种子进行分离,研究结果表明:比重越大,种子硬实率、发芽率、活力越高,虫蚀率越低。苦豆子、乌拉尔甘草和草决明种子的硬实率与比重之间均存在极显著的正相关关系,相关系数分别为0.992、0.945、0.982。比重大于1.262g/ml的苦豆子种子批的硬实率为95.2%,低于1.241g/ml的种子批其非硬实率达到87.7%,比重大于1.296g/ml的甘草种子硬实率为97.8%,低于1.296g/ml的种子批其非硬实率大于61.6%;液体比重法可在苦豆子和甘草种子上较好地分离硬实种子和非硬实种子。由于硫酸溶液液体比重法在一定程度上破除了草决明种子的硬实,需要进一步探索其他适合的液体比重法。黄芪种子的比重与硬实率之间的相关系数只有0.866,不适宜采用液体比重法分选硬实种子和非硬实种子。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因序列分析

通过病毒形态观察、血凝特性试验、病毒干扰实验、动物回归实验等分离鉴定了1株鸡肾型传染性支气管炎病毒,命名为LY07.利用RT-PCR技术对分离毒株的N基因进行了扩增,经克隆、序列测定和分析比较,结果表明,N基因全长为1230 bp,编码1条409个氨基酸组成的多肽;其核苷酸与H52、M41和BJ等毒株的同源性为84.4 %～89.7 %,氨基酸同源性为86.1 %～91.0 %;LY07株与LX4、BJ和GDS14株关系较近,与其余鸡传染性支气管炎病毒株的亲缘关系均较远,是1株新的肾型IBV毒株.     

鸭新城疫病毒分离株抗原表位和遗传演化分析

从规模化养殖场鸭群气管和泄殖腔试子分离到新城疫病毒(NDV)27株,用2株针对NDV HN单抗进行抗原表位分析,并选择4个分离株进行F基因高变区(374bp)和HN基因全长序列分析。抗原表位分析结果显示,27个鸭分离株均能与其中一株单抗C3-B7反应,而与另外一株单抗1E5反应为阴性。F基因(374bp)序列分析结果显示,4个鸭分离株均属于NDV ClassⅠ分支,分离株之间核苷酸同源性为99.2%～100%;分离株与NDV ClassⅡ毒株遗传距离为0.9%～9.9%,与NDV ClassⅠ毒株遗传距离为38.5%～41.7%。根据核苷酸序列推导的氨基酸序列表明,4个鸭NDV分离株F蛋白裂解位点氨基酸模式为:112-EROERL-117。HN基因序列分析结果显示,4个鸭NDV分离株HN基因全长1851bp,编码585个氨基酸;同源性比较发现4个鸭NDV分离株之间核苷酸同源性为99.7%～99.8%,与NDV ClassⅡ毒株核苷酸同源性为68.4%～70.5%,与NDV ClassⅠ毒株核苷酸同源性为95.8%～98.0%。本研究结果显示,鸭分离毒均属于NDV ClassⅠ弱毒,在抗原表位和基因序列上与广泛应用的NDV弱毒疫苗株(LaSota)不同,这些毒株的来源有待进一步深入研究。