全文获取类型
收费全文 | 12699篇 |
免费 | 411篇 |
国内免费 | 449篇 |
专业分类
林业 | 1282篇 |
农学 | 645篇 |
基础科学 | 780篇 |
641篇 | |
综合类 | 5141篇 |
农作物 | 801篇 |
水产渔业 | 669篇 |
畜牧兽医 | 2414篇 |
园艺 | 849篇 |
植物保护 | 337篇 |
出版年
2024年 | 93篇 |
2023年 | 278篇 |
2022年 | 326篇 |
2021年 | 376篇 |
2020年 | 327篇 |
2019年 | 406篇 |
2018年 | 477篇 |
2017年 | 272篇 |
2016年 | 356篇 |
2015年 | 327篇 |
2014年 | 679篇 |
2013年 | 572篇 |
2012年 | 704篇 |
2011年 | 702篇 |
2010年 | 622篇 |
2009年 | 591篇 |
2008年 | 620篇 |
2007年 | 534篇 |
2006年 | 512篇 |
2005年 | 430篇 |
2004年 | 382篇 |
2003年 | 384篇 |
2002年 | 354篇 |
2001年 | 307篇 |
2000年 | 240篇 |
1999年 | 237篇 |
1998年 | 188篇 |
1997年 | 169篇 |
1996年 | 167篇 |
1995年 | 173篇 |
1994年 | 218篇 |
1993年 | 174篇 |
1992年 | 158篇 |
1991年 | 146篇 |
1990年 | 137篇 |
1989年 | 131篇 |
1988年 | 129篇 |
1987年 | 95篇 |
1986年 | 80篇 |
1985年 | 87篇 |
1984年 | 75篇 |
1983年 | 67篇 |
1982年 | 60篇 |
1981年 | 47篇 |
1980年 | 38篇 |
1979年 | 22篇 |
1978年 | 9篇 |
1965年 | 9篇 |
1964年 | 19篇 |
1957年 | 9篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 0 毫秒
91.
92.
2021年,沂南县推进动物疫病强制免疫“先打后补”工作,依托“鲁牧云”信息平台,通过强化组织领导,加强政策宣贯,强化人员培训,放开强免疫苗经营渠道,提供抗体检测无偿服务等措施,提升了养殖场户“先打后补”的积极性、自主性、灵活性,强化了养殖场户动物防疫主体责任,满足了养殖场户疫苗多样化需求。但由于 “先打后补”补助金额少、社会化服务不规范、基层动物防疫体系弱化、缺少配套工作经费等原因,部分养殖场户实施“先打后补”的积极性不高。建议通过规范社会化服务组织,强化培训水平,提高补助标准,强化三级(县乡村)基础设施建设,升级“鲁牧云”等措施,确保“先打后补”政策惠及更多养殖场户。 相似文献
93.
粗蛋白测定的快速消化法 总被引:1,自引:0,他引:1
粗蛋白测定的快速消化法刘翠珍,黄爱珍,刘是帼(广东省农科院畜牧研究所广州510640)1前言蛋白质是饲料中的重要成分。在质量检测时,首先测出氮的含量,然后乘上校正系数6.25,即得出蛋白质含量。氮的测定是用凯氏定氮法,此法首次出现在1883年。沿用至... 相似文献
94.
本研究旨在利用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) DH13株重组σB蛋白,并检测其免疫原性,为NDRV基因工程疫苗研制等提供物质材料。采用RT-PCR方法扩增获得NDRV σB基因,构建原核表达重组质粒pET-30a-σB和pET-32a-σB,将2个重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导获得相应的重组蛋白,通过SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式。纯化无His的σB蛋白,并以此蛋白作为免疫原免疫新西兰白兔,制备兔源多克隆抗体。利用Ni2+柱亲和层析法纯化含His的σB蛋白,以此蛋白作为检测原,通过间接ELISA方法测定兔源多克隆抗体效价;Western blotting鉴定多克隆抗体与重组蛋白的特异性识别能力。结果显示,PCR扩增获得大小约为1 100 bp的σB基因片段。SDS-PAGE结果显示,高效表达出了2种重组σB蛋白,大小分别约为41和46 ku,均以包涵体形式存在。间接ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价达1∶204 800,能特异性地识别原核表达的重组蛋白,表明重组无His的σB蛋白具有良好的免疫原性。Western blotting特异性鉴定结果显示,含His的σB蛋白和无His的σB蛋白均与制备的兔源多克隆抗体发生特异性反应,表明原核表达得到的重组σB蛋白具备良好的反应原性。本试验利用原核表达系统成功地表达出了重组σB蛋白,并证实了重组NDRV σB蛋白具有良好的免疫原性及反应原性,该结果将有助于后续对NDRV σB蛋白生物学功能的鉴定、NDRV诊断用抗原的制备及NDRV新型疫苗的研制。 相似文献
95.
以家蚕(Bombyx mori)微孢子虫(Nosema bombycis)免疫BALB/C小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合后制备杂交瘤细胞,分泌对N.bombycis孢子表面抗原特异性的单克隆抗体。用酶联吸附免疫分析(ELISA)以筛选杂交瘤细胞,经3次有限稀释法克隆后,用包括N.bombycis等6种微孢子虫及正常蚕体组织匀浆作抗原筛选出1株分泌仅对N.bombycis孢子有特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(LC_2)。小鼠腹水滴度为1:640O,用ELISA最少检出100O个孢子的样本。 相似文献
96.
97.
广大动物防治员在猪牛羊疫苗注射中,常遇到动物出现应激反应,甚至死亡现象,给农户带来了一定的经济损失,并间接影响到动物的防疫密度.据统计,2006年蒙山县在注射疫苗时发生不同程度疫苗应激的猪牛羊有1396头,其中死亡59头,死亡率高达4.2%. 相似文献
98.
目的将小反刍兽疫病毒M蛋白基因截短表达后用于特异性单抗制备及临床抗体水平检测。方法:用在线分析软件BepiPred分析小反刍兽疫病毒M蛋白潜在的B细胞线性表位,以本实验室构建的pCR2.1T-PPRV M质粒为模板,扩增三段截短的M基因,纯化后的PCR产物分别与克隆载体pCR2.1T连接,筛选出的阳性重组质粒经双酶切后,分别与表达载体pET-32a(+)及pGEX-6p-1连接,再将鉴定为阳性的重组质粒转化入E.coli BL21(DE3)菌株诱导表达,并用SDS-PAGE及Western blot验证。结果 PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段。对连接克隆载体及表达载体的重组质粒双酶切后,均出现与预期一致的片段,DNA测序表明,插入片段序列与小反刍兽疫Nigeria75/1株M蛋白基因完全一致。重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明所构建的重组蛋白均获得高效表达,并均具有良好的反应原性。结论成功表达了小反刍兽疫截短M基因的蛋白,为制备特异性单抗及小反刍兽疫抗体检测奠定了一定基础。 相似文献
99.
100.
某养殖户所饲四眼斑龟(Sacalia quadriocellata)突发群体死亡,为查明具体死亡原因,提供有效的后续防控措施建议,本试验对病死的四眼斑龟进行大体剖检,取相应脏器制成病理切片进行观察,于多脏器中获取病料进行细菌分离培养,经PCR扩增、全基因组测序、药敏试验和动物回归感染试验,确定致病病原体。结果显示:引起四眼斑龟发病的病原体为1株耐氨苄青霉素的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),其对氨苄青霉素和喹乙醇具有耐药性;分离菌的基因组中含有2种与β-内酰胺酶相关的耐药基因和多种毒力基因;在动物回归感染试验中,接种该株嗜水气单胞菌的小鼠出现了被毛粗乱、食欲减退,部分小鼠死亡;经计算得该分离菌的半数致死量为2.00×10~7 CFU,主要侵袭小鼠的肝脏、肾脏和肺脏。据此判断,该起四眼斑龟发病事件由分离所得的耐药性嗜水气单胞菌感染引起。 相似文献