用分子生物学方法检测孵化前后鳖受精卵中的霍乱弧菌

精选15批进境鳖受精卵,在30℃孵化前后对霍乱弧菌进行检测,采用PCR方法鉴定可疑菌并应用实时荧光PCR鉴定其O1、O139群,以比较鳖受精卵在孵化前后霍乱弧菌检出情况,并对鳖受精卵孵化后废弃物处理以及鳖幼苗消毒等生物安全问题提出建议.结果:孵化前检出1批,检出率为6.7％,孵化后检出8批,检出率为55.3％,实时荧光PCR检测结果显示检出的霍乱弧菌均不属于O1、O139群.表明经过孵化的鳖受精卵的霍乱弧菌检出率明显大于未孵化的,所以孵化后的鳖卵废弃物和鳖幼苗应进行消毒处理.     

中华被毛孢的液体培养条件优化

[目的]优化中华被毛孢的液体培养条件。[方法]通过18srDNA及系统进化树对中华被毛孢进行鉴定分析,然后以中华被毛孢菌丝体生物量为指标,采用单因素试验和正交试验研究菌丝体液深层发酵的培养条件。[结果]单因素试验表明,最佳的氮源为蛋白胨,其次为牛肉膏;最佳碳源为葡萄糖,其次为蔗糖和麦芽糖。正交设计试验表明,菌株的液体发酵的最佳配方:浓度1%葡萄糖+浓度0.5%蛋白胨+浓度0.1%酵母粉+浓度0.01%维生素B1+浓度0.05%KH2PO4+浓度0.05%MgSO4;在该浓度培养下,菌丝体生物量可达到20.8 g/L。[结论]该方法优化了中华被毛孢的液体培养条件,为中华被毛孢的的开发利用提供依据。