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为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3′端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp~5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了ALV-J SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法.结果显示该方法的最低检测限度为2.36×102拷贝/μL,比普通PCR高100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%.表明本研究建立的方法具有良好的特异性、稳定性和灵敏性.采用该方法对100只临床病鸡进行检测,ALV的检出率为44%.随机选择10只感染阳性鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV-J在各主要脏器中均有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高. 相似文献
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一、情况我县自1978年购进美国产农药呋喃丹以来,每年用量约40吨,由于使用不当引起人、畜中毒事故常有发生。沿海围田地区,水禽饲养较多,引起中毒死亡尤为严重,造成经济上很大损失。该农药是新引进的广谱杀虫剂,对其引起畜禽中毒的救治未见有成文报 相似文献
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为了防止牛海绵状脑病(俗称疯牛病)和羊痒病传入我国,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要。本研究根据牛羊特异性卫星DNA建立了同一PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法。应用DNA提取液制备模板,不但有效地缩短了试验时间,还大大降低了成本,有利于在生产实际中推广应用。 相似文献
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在外眼病中,特别是角膜溃疡,在培养和抗菌剂敏感试验的结果未出来之前就需要开始治疗。在等待实验室检查结果期间,为了给初期治疗选择抗菌药物,了解结膜囊的“常在菌群”及其在疾病情况下变化的知识是很重要的。已对人、狗、猫、牛、羊和马结膜常在菌群的调查结果有过报道。近来还研究了马结膜的真菌群。一些人已对与外眼病有关的微生物进行了调查,并且报道了人和狗的调查结果。虽然马常发生角膜的细菌感染,但还没有为马所用的资料。本报道描述了三年半期间,对123例角膜溃疡和角膜炎马的培养结果和对抗菌剂敏感试验的结果。 相似文献