接种生防菌和病原菌对香蕉抗枯萎病的诱导

使用2株生防枯草芽孢杆菌A5-6,C10-1和香蕉枯萎病病原菌（Foc4）,以不同的接种方式对4～5叶香蕉组培苗进行根部接种,以苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）这3种与植物抗病性密切相关的酶活性变化为指标,研究植物产生抗性的时间和强度的变化趋势。结果表明,经过生防菌A5-6和C10-1诱导处理的叶片PAL,POD,PPO的活性均高于对照（CK）,生防菌和病原菌混合接种处理的POD和PPO酶活峰值高于生防菌和病原菌单独接种的处理。     

含氨基酸水溶肥料对2株芽孢杆菌的激活作用

含氨基酸水溶肥是一种新型绿色肥料,具有肥效快、无残留、改善作物品质和提高作物抗逆性等优点。将其作为有机载体制备菌肥,对芽孢杆菌生长和繁殖是否具有影响,尚未见报道。本研究分析不同浓度的“绿农林”含氨基酸水溶肥溶液对芽孢杆菌菌株X05和QB61生长繁殖、拮抗代谢物产生以及对番茄、香蕉生长和香蕉枯萎病防效的影响。结果表明：在1~50 g/L供试含氨基酸水溶肥溶液中培养24 h,芽孢杆菌X05和QB61细胞数量增长为初始菌量的86~2900倍,而在清水中培养24 h,细胞数量未发生明显变化;X05和QB61在50 g/L的含氨基酸水溶肥溶液中培养48 h,上清液对香蕉枯萎病菌的生长具有显著的抑制作用,而在其他浓度的含氨基酸水溶肥溶液和清水中培养48 h,上清液均无抑制作用;与单独施用芽孢杆菌X05或QB61处理相比,施用添加芽孢杆菌X05或QB61的含氨基酸水溶肥处理的番茄和香蕉幼苗生长显著增强,同时香蕉枯萎病发病指数分别降低33.4%和32.2%。以上结果表明,供试氨基酸水溶肥可促进芽孢杆菌X05和QB61的生长和繁殖,并使其产生拮抗代谢物,两者混合施用对番茄和香蕉具有更好的促生效果,并可提高芽孢杆菌对香蕉枯萎病的防效。因此,供试的含氨基酸水溶肥与上述的芽孢杆菌组合具有良好的应用前景。     

绿僵菌对甘蔗螟虫的室内致病力测定

在室内用喷雾法测定了4株绿僵菌对甘蔗螟虫3～4龄若虫的致病力。结果表明,绿僵菌致病力强弱与菌株种类和接种剂量有密切关系。先接虫后喷施菌剂时,菌株对甘蔗螟虫若虫致病力的强弱顺序为JF813HS1MA4JF883;先喷施菌剂后接虫时,菌株对甘蔗螟虫若虫致病力的强弱顺序为MA4HS1JF813JF883。在接种各菌株孢子浓度为1×108个/mL时,菌剂对甘蔗螟虫若虫的致死率高。其中JF813菌株对甘蔗螟虫若虫具有很强的二次侵染能力,HS1菌株在两种处理方式中致病力稳定。     

香蕉束顶病毒简易制样技术及分子检测

筛选了5对依据香蕉束顶病毒（Banana Bunchy Top Virus,BBTV）外壳蛋白基因（CP）、复制酶基因（RF）保守区段设计的引物.结果显示,以RF为靶序列的引物,香蕉束顶病毒PCR特异性高,可以从感病组织中检测到ng（10-9g）级的病毒.样品提取缓冲液经过Sephadex凝胶介质过柱可有效浓缩病毒、去除PCR反应抑制物质,提高检测灵敏度,降低检测的假阴性.     

椰心叶甲ITS、5.8S rDNA序列分析

利用PCR和DNA测序技术,克隆了椰心叶甲的内转录间隔区ITS及5．8SrDNA序列,其全长为2107bp,并对这一序列进行了详细的分析,为研究椰心叶甲地理种群的差异及其不同类群之间的遗传关系,并重构椰心叶甲从原产地到各受灾地区的传播路线等方面奠定了分子基础,对制定椰心叶甲的综合防治策略具有指导意义。     

解淀粉芽胞杆菌的GFP标记及定殖能力

采用改良的海藻糖电转化法获得GFP标记菌株X5-GFP、BQA2-GFP,显微镜观察标记菌株在土壤和水培中的番茄根际的定殖情况。结果表明:标记菌株单独或与青枯菌先后加入进行处理,番茄根际标记菌株的种群数量变化趋势都是一致的。在土壤番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为1.05×106CFU/g,随之菌量逐渐下降;处理30 d后,为1.50×10~3CFU/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为1.68×106 CFU/g,随之菌量也逐渐下降;处理30 d后,为2.50×10~3CFU/g;在水培番茄根际中,X5-GFP单独处理后当天的菌量为2.70×10~5CFU/g,随之菌量逐渐下降;处理30 d后,为1.00×10~3 CFU/g;而BQA2-GFP单独处理后当天菌量为3.60×10~5CFU/g,随之菌量同样逐渐下降;处理30 d后,为1.50×10~3 CFU/g。这表明解淀粉芽胞杆菌X5、BQA2均在番茄根际有较强的定殖能力。     

枯草芽孢杆菌和绿色木霉协同促进芹菜生长的研究

为了芹菜高产栽培的需要,利用枯草芽孢杆菌(BLG010)和绿色木霉(H06)对芹菜进行促生长试验,试验设置了蒸馏水处理、BLG010处理、H06处理、BLG010+H06处理。结果表明,BLG010和 H06具有促进芹菜生长协同增效的现象。因此,通过测定芹菜的防御酶活性和代谢物的变化来探明 BLG010和 H06对芹菜生长呈现协同增效效果的原因。酶活性测定结果表明,相对于蒸馏水处理,BLG010和 H06均能提高芹菜的 CAT和 POD活性,并且 BLG010+H06处理的 CAT和 POD活性均比蒸馏水处理、BLG010处理、H06处理高。利用 GC-MS技术分析不同处理代谢物的结果表明,苹果酸、甘露醇和蔗糖这 3种物质的含量在不同处理间呈现规律性差异。     

热带果树基因组DNA提取方法的改良及Southern blot分析

以香蕉、番木瓜、龙眼为代表材料,建立一套适合热带果树基因组DNA提取的方法——改良CTAB法。将提取各基因组DNA经限制性内切酶完全消化后,分别以香蕉内源乙烯受体基因（AF113748）、番木瓜八氢番茄红素脱氢酶基因PDS（DQ779922）、龙眼开花相关基因LEAFY（ADQ160214）为探针进行Southern blot杂交,3种植物的基因组DNA适宜上样量的60μg,杂交条带清晰,背景弱,说明采用改良CTAB法,能保证基因组DNA提取的浓度和纯度,符合Southern blot的要求。     

巴西橡胶HMG—CoA还原酶的分离纯化

以巴西橡胶树高产无性系热研7-33-97的新鲜胶乳为材料,分离纯化HMG-CoA还原酶的实验结果表明,低温下收集胶乳,在49000g,15℃下离心60min,离心胶乳底层部分经2％BrijW-1表面活性剂处理,可将其中结合在黄色体膜上的HMG-CoA还原酶洗脱下来,经40％(NH_4)_2SO_4盐析、Blue-dextron-agarose亲和层析、Mono Q(Pharmacia)离子交换层析,可达到HMG-CoA还原酶的纯化。用C_(?) Ultrapore TM反相柱(Beckman高效液相色谱)鉴定其纯度,用DU-70酶动力学分析系统(Beckman)检测底物NADPH在340nm处的消减,测定其HMG-CoA还原酶的活性。酶促反应动力学曲线的分析结果,前20min酶的反应初速度呈线性关系;以吸收光谱曲线分析发现,HMG-CoA还原酶在280nm处有最大吸收峰;用SDS-page测定酶亚基分子量为42K道尔顿;用IEF测定该酶的等电点为pH5.8。