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猪繁殖与呼吸综合征病毒GXA株分离及主要结构基因的克隆和序列分析 总被引:3,自引:5,他引:3
近来,广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致。本研究从病猪中采集材料,经RT-PCR检测为阳性后,接种于Marc-145细胞,经过6代盲传,发现典型的细胞病理变化(CPE),经鉴定为PRRSV,命名为GXA株,其毒价为105.33TCID50/mL。参考VR-2332和CH-1a株基因序列,设计了3对特异性引物,分别对GXA株的E、M、N基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。应用DNAstar生物学软件拼接得到GXA株的E、M和N3个基因片段共长为1473bp。同源性分析表明,GXA株与VR-2332、MLV和BJ-4的同源性为99.7%~100%,而与欧洲型代表株LV的同源性只有66.4%。表明GXA与VR-2332、MLV及BJ-4株亲缘关系比较密切,与欧洲型代表株LV亲缘关系最远,属于美洲型毒株,有可能来源于疫苗株。 相似文献
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试验旨在了解2019年广西地区牛星状病毒(bovine astrovirus,BoAstV)在水牛群中的流行情况及毒株序列特征,并进行遗传进化分析。从2019年广西南宁、贵港、北海、横县、灵山5个地区15个水牛场共采集297份水牛粪便样品,使用Trizol法抽提样本总RNA后,利用半巢式RT-PCR方法对收集到的粪便样品进行检测,并将阳性样品连接到pMD18-T载体进行测序,对测序结果进行同源性分析及系统进化树构建。结果显示,BoAstV感染的水牛场阳性率为40.00%(6/15),样品总阳性率约为11.11%(33/297),1~180日龄犊牛感染率最高为18.75%(27/144);有19株BoAstV ORF1b基因测序成功,核苷酸序列同源性为53.9%~99.3%,氨基酸序列同源性为12.1%~98.5%。遗传进化分析发现,广西地区流行的BoAstV主要分为4个亚群:第一亚群是NNC-286、HX-3、HX-4和NNA-14,与新型的神经嗜性的牛星状病毒BoAstV NeuroS1和BoAstV BH89/14等Mamastrovirus 13亚群的序列之间有较高的亲缘性;第二亚群是NNA-12、NNA-13、NNA-17、NNA-11,与水牛星状病毒(buffalo astrovirus)亲缘性较近,属于水牛星状病毒分支内;第三亚群是HX-1、HX-5、HX-6和BH-C22,与经典的牛星状病毒毒株BoAstV B170-HK亲缘性较近;第四亚群包含NNA-7、NNA-15、NNA-6、NND-S2、NND-S16、NNC-296与BH-C14,与广西BoAstV地方流行毒株的亲缘性较近。不同基因型BoAstV感染了广西不同地区的水牛群体,本试验在广西地区发现了类神经嗜性BoAstV毒株感染水牛的情况,为进一步全面了解该病毒的流行病学和生物学特性提供参考。 相似文献
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试验收集2013年6月至2014年2月广西南宁、桂林、柳州、玉林、贵港、钦州等6个市送检的疑似猪丹毒发病的材料,用鲜血琼脂平板对病料进行细菌分离,37℃恒温箱培养24~48 h,观察分离细菌的菌落形态,并进行革兰氏染色观察,初步确定其为革兰氏阳性的细小杆菌。为进一步确定分离出的是否为猪丹毒杆菌,试验进一步纯化细菌,提取细菌DNA用16S rRNA随机引物进行扩增,将扩增出来的目的片段连接到p MD18-T载体上,进行克隆、酶切鉴定及序列测定;最终将测序获得16S rRNA序列在NCBI上进行BLAST,结果表明试验最终分离出5株猪丹毒杆菌,为进一步确定分离出来猪丹毒杆菌的生物学特性,试验做了进一步深入研究:药物敏感性试验、小白鼠攻毒试验、耐药基因的检测、免疫攻毒保护性试验。 相似文献
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为了解广西猪群中猪流感(SI)的流行情况,以猪流感病毒H3N2亚型作为诊断抗原,采用微量血凝抑制试验(HI)方法,对广西部分市(县)的猪群进行猪流感的血清学调查.在12个市(县)采集的1000份血清中,有10个市(县)检出H3N2抗体,共有257份血清呈H3N2抗体阳性,平均阳性率为25.7%.百色的阳性率最高,达到82.9%,贵港和南宁市郊两地没有检出阳性,其它9个市(县)的阳性率在13.0%~45.7%之间.结果表明我区猪群中很可能存在H3N2亚型猪流感感染,其中百色地区猪流感的感染率比较高. 相似文献
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5个腰果高产无性系农艺经济性状比较 总被引:2,自引:0,他引:2
2003~2006年,连续3a观察记录FL30、GA63、CP63-36、HL2-13、HL2-21无性系腰果的农艺经济性状。结果表明:FL30品系的坚果产量高,坚果出仁率高,果仁质量等级高,果梨与坚果均较大,重量比小,在果仁和果梨的加工及综合利用上表现出较好的经济性状和商品价值,其农艺经济性状较优,可作为主要优良品系在我国腰果植区推广种植;其他品系均具有高产性状,在生产上可针对不同品系的早花早熟、迟花晚熟、果仁质量等级和果梨用途等性状,在我国腰果植区进行适宜的品系配置和推广种植。 相似文献