原核表达番鸭呼肠孤病毒σC与σB蛋白对雏番鸭的免疫保护

【目的】探讨原核表达的番鸭呼肠孤病毒（DRV）外壳蛋白σC与σB对于雏番鸭的免疫保护作用,为研制有效的DRV亚单位疫苗提供理论基础。【方法】对pET-30a-S3/BL21重组菌与pET-30a-S4 ORF2/BL21重组菌进行稳定性检验,表达的重组蛋白进行纯化和复性后,进行油乳剂制备,50只1日龄雏番鸭随机平均分为5组,即DRV σB蛋白免疫组、DRV σC蛋白免疫组、DRV σB + σC蛋白免疫组及PBS对照组和攻毒对照组,免疫组皮下接种剂量为500 μg/只,7日龄时进行二次免疫,14日龄时进行攻毒试验,ELISA和琼扩（AGP）检测抗体水平并计算保护指数。【结果】重组菌具有良好的稳定性,各免疫组的雏番鸭均在第2次免疫后7 d产生了一定效价的抗体,其中DRV σB + σC蛋白免疫组和DRV σC蛋白免疫组的雏番鸭血清抗体ELISA效价均为1﹕200,高于DRV σB蛋白免疫组的1﹕100。攻毒保护试验结果表明,联合免疫的保护指数最高,可达70,重组DRV σC保护指数次之,为60,重组DRV σB蛋白保护指数最低,仅为40。【结论】使用原核表达的DRV外壳蛋白σC与σB制备油乳剂,联合免疫可诱导雏番鸭快速产生一定效价的抗体,并提供良好的免疫保护力。     

透皮吸收制剂恩诺沙星搽剂的稳定性

建立了兽医透皮吸收新型制剂恩诺沙星搽剂中恩诺沙星紫外分光光度测定法,用初均速法探讨其稳定性．结果表明,用紫外分光光度法测定制剂含量平均回收率为１００．４０％ , Ｒ Ｓ Ｄ 为０．１３％ ．初均速法预测本制剂２５ ℃贮存有效期为 ２．２８ ａ,这说明该搽剂处方合理,稳定性良好,质量可靠．紫外分光光度法测定恩诺沙星搽剂含量快速简便,精确度好．     

猪血浆中去呋喃甲酰基头孢噻呋浓度的HPLC测定

建立了测定猪血浆中去呋喃甲酰基头孢噻呋(DFC)的高效液相色谱法(HPLC).血浆样品经DTE-磷酸缓冲液提取,过SPE小柱净化浓缩,甲醇洗脱,用XDB-C18色谱柱分离,流动相由乙腈(A)和0.1%三氟乙酸水溶液(B)组成.采用梯度洗脱:0 min为12%A和88%B,15 min为18%A和82%B,18 min为12%A和88%B,平衡至20 min.流速0.8 mL.min-1,波长266 nm.以DFC峰面积定量,浓度在0.25-40.0μg.mL-1时,其峰面积与浓度呈良好的线性关系,r2=0.9987,平均回收率为82.1%-87.4%,其日内和日间变异系数(RSD)分别为5.04%-8.58%和6.83%-9.34%.该方法适用于血浆中DFC的浓度测定和药代动力学研究.     

恩诺沙星透皮吸收搽剂防治仔猪大肠杆菌性腹泻

将恩诺沙星与皮肤渗透促进剂氮酮按药剂学方法配制的透皮吸收搽剂 ,经皮给药防治哺乳仔猪肠型大肠杆菌病 ,收到了与恩诺沙星注射剂、口服剂同样的效果 .表明透皮吸收制剂在兽医临床上具有广阔的应用前景 .     

饵料中添加镉对罗非鱼组织形态的影响

[目的]探讨摄入镉在罗非鱼中的累积效应及其对肠道、肾脏和肝脏组织的影响,为罗非鱼及其他水产品种的养殖及质量安全控制提供理论依据.[方法]在罗非鱼饵料中分别添加0、50、100和200 mg/kg的氯化镉,按鱼体重3.0%~3.5%的量投喂2月龄健康吉富罗非鱼,饲养60d后测定罗非鱼肠道、肾脏和肝脏组织中的镉含量,并取样制作石蜡切片观察组织形态结构的变化.[结果]至试验结束时,各处理组间的罗非鱼全长、体长、体高等指标无显著差异(P>0.05),但其肠道、肾脏和肝脏组织中镉含量均随食物相镉添加量的增加而升高,且存在明显的剂量—效应关系.投喂含镉饵料可引起罗非鱼肠道、肾脏和肝脏组织形态结构发生病理变化,具体表现为肠绒毛排列紊乱、上皮细胞出现明显的空泡变性;肾小管排列结构紊乱程度加重、肾小球出现轻度萎缩甚至坏死;肝窦增宽、结构紊乱,少数肝细胞核浓缩变小甚至溶解,肝细胞界限模糊不清.[结论]食物相镉对罗非鱼生长的影响是通过富集于肠道、肝脏和肾脏等组织中,并引起这些组织细胞凋亡及破坏关键组织形态结构来实现.     

不同产地薏苡仁的保健与加工品质

采用常规生化分析方法,研究了我国主产区薏苡仁的保健品质和加工品质.结果表明,薏苡仁含有丰富的薏苡仁酯、薏苡仁多糖、三萜类化合物,其平均值分别为44.60 mg.g-1、59.03 mg.g-1、22.83 mg.g-1;薏苡仁属高淀粉质食物,平均淀粉含量为56.42%,直链淀粉为4.78%.我国薏苡仁是优良的药食同源经济作物,其保健与加工品质特性与品种、产地密切相关.     

太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究

为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制,本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况,筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL～400μg/m L。将25μg/mL～400μg/m L RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性,结果显示：RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01),且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL～200μg/mL时呈剂量依赖式升高;Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量,结果显示：RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05),且呈RPFRP剂量依赖式升高;ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,结果显示：与空白对照组相比,RPFRP处理的RAW264.7细...     

从转化医学走向转化（中）兽医药

简述了转化医学产生的背景、概念及当前国内发展现状,分析了转化医学在中（兽）医药研发过程中应用的模式和难点,针对中（兽）医药转化研究的特点提出加强中（兽）医药转化研究的几点建议。盼望中国农业科学院兽医药物监督所率先创建中兽医药临床疗效评价中心。     

番鸭源呼肠孤病毒YJL株σNS基因克隆和序列分析

参考GenBank上公布的禽呼肠孤病毒(ARV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)σ非结构基因(σNS)序列设计合成一对引物,对番鸭源呼肠孤病毒YJL株σNS全基因进行RT-PCR扩增,克隆到pMD18-T载体中,并对克隆产物进行PCR鉴定和测序;YJL株σNS的编码基因位于S4节段,基因全长1192 bp,其5′端和3′端序列分别为5′-GCTTTT和3′-TATTCATC,具有典型的禽正呼肠孤病毒基因末端碱基序列;σNS基因只有一个有效阅读框(24-1127 bp),编码由367个氨基酸组成的σNS蛋白;σNS蛋白的分子质量约为40.57 ku,等电点(PI)为7.875.YJL株与法国MDRV-89026株σNS基因核苷酸的同源性为77.8%,推导氨基酸的同源性为90.2%;与ARV-S1133株σNS基因的同源性为99.4%,推导氨基酸的同源性为99.5%;系统进化树分析表明,YJL株σNS基因和蛋白与S1133株的亲缘关系更近,处在ARV分支上.可见,番鸭源呼肠孤病毒YJL株属于ARV,同时也表明我国发病番鸭群中存在不同基因群的呼肠孤病毒感染.     

透皮吸收制剂恩诺沙星搽剂的稳定性

建立了兽医透皮吸收新型制剂诺沙星搽剂中恩诺沙星紫外人分光光度测定法,用被均速法探讨其稳定性。结果表明,用紫外分光光度法测定制剂含量平均回收率为１００．４０％,ＲＳＤ为０．１３％。