能源草芦竹遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术,对我国6省11个芦竹种群共89个个体的遗传多样性水平和遗传结构进行了研究。从UBC801~900中筛选出7个有效引物,共扩增出40个位点,其中多态性位点为38个。PCR产物的分子量为100~2 000 bp。在物种水平上,Shannon多样性指数为0.494,Nei指数为0.329,遗传分化系数G_st为0.826,平均基因流N_m为0.097。种群内的平均遗传多样度H_s为0.040。表明芦竹在物种水平上具有较高的遗传多样性而种群内的分化极小。UPGMA法聚类结果表明, 芦竹11个种群分为3个类群:浙江和江苏的芦竹聚为一簇,湖南、贵州和广西的芦竹聚为一簇,云南种群单独为一支。不同种群芦竹亲缘关系的远近与它们的地理距离有一定的关系,但不完全一致。     

遗传标记及其发展概述

本文综述了遗传标记方法及其优点和不足，重点对RFLPs、Microsatellite DNA、RAPD、AFLPs、SNPs等几种主要的分子遗传标记作了较全面的概述。     

新型动物病毒分离与鉴定常用方法的探讨

本文结合当前国内外在病毒分离与鉴定方法中取得的进展,初步探讨一些可常用的方法,包括鸡胚接种、乳鼠脑内—腹腔接种、细胞接种分离、抗原抗体血抑交互试验、单克隆抗体免疫荧光试验、RT-PCR方法等,同时对这些方法在实际应用中存在的问题和前景进行讨论。1标本的采集与处理用于分离病毒的标本应含有足够的活病毒,因此必须根据病毒的生物学性质、病毒感染的特征、流行病学规律及机体的免疫保护机制,来选择所需要采集标本的种类,确定最适采集时间和标本处理方法。为了避免细菌污染,标本一般都应加入抗菌素除菌,也可用过滤方法处理。为了使…     

猪TLR2基因Bi-PASA遗传标记的建立及多态性研究

根据人和小鼠TLR2基因序列设计了特异性PCR引物,优化PCR条件后扩增到中国梅山猪、欧洲约克夏猪、PIC-2系及PIC-3系商品猪的TLR2基因690 bp的基因片段,并对其进行序列分析。序列分析结果显示,猪TLR2基因多态性程度低,发现在猪TLR2基因编码区第1 255位点上存在1个单碱基突变位点。利用双向特定等位基因PCR扩增法(B i-PASA)建立了检测猪TLR2基因变异的遗传标记。利用猪TLR2基因的B i-PASA标记,分析了TLR2基因在大河乌猪、撒坝猪和黔邵花猪中的基因频率和多态性。研究建立的B i-PASA遗传标记和基因变异信息,将为进一步分析猪TLR2基因变异与疾病抵抗力及经济性状的相关分析提供基础资料。     

黔邵花猪CETP基因多态特征及其与生长性能的相关性

应用PCR-RFLP技术对湖南黔邵花猪280头个体的血浆胆固醇脂转移蛋白(CETP)基因436 bp进行扩增,用限制性内切酶AvaⅡ对其酶切可得到3种基因型.应用最小二乘单因素模型分析不同基因型对初生重、45日龄重、6月龄日重、体高、体长、膘厚的影响.结果显示:CETP基因AvaⅡ酶切位点的各基因型对各生长性状的影响差异显著(P<0.05),对膘厚的影响差异极显著(P<0.01),Aa基因型对初生重、45日龄重、6月龄重、体高、体长等性状的影响较大,AA基因型相对较低.由此可知,CETP基因是影响生长性状的一个重要基因.     

鱼腥草注射液体外抗菌活性研究

研究了鱼腥草注射液的体外抗菌活性.以水蒸气蒸馏法制备鱼腥草中药注射液,金黄色葡萄球菌为供试菌种,通过活菌记数法、加氨苄西林钠辅助法对鱼腥草注射液的体外抗菌活性进行研究.结果表明:鱼腥草注射液在体外有一定的抑菌作用,其抗菌效果比生理盐水明显要强.以活菌记数法、加抗生素辅助法测定中草药的体外抗菌活性,方法可行,数据可靠.     

PCR技术检测饲料中沙门氏菌的应用研究

用聚合酶反映(PCR)技术检测饲料中沙门氏菌。对已知被沙门氏菌污染的动物饲料的培养物均能检出阳性,说明此方法对检测饲料中沙门氏菌具有特异性高、灵敏、快速等特点,适用于快速和准确地检测饲料中沙门氏菌的需要。     

磷脂转移蛋白(PLTP)基因Hae Ⅲ多态性与猪生长性能相关性研究

应用PCR—RFLP技术检测猪磷脂转移蛋白（PLTP）基因内含子4多态性。结果表明：凉伞猪、龙潭猪群体中PLTP基因内含子4经HaeⅢ酶切后均有A和B2个等位基因存在。利用最小二乘分析研究该多态位点对初生质量、45日龄质量、60日龄质量、4月龄质量、6月龄体质量、6月龄体高、6月龄体长、6月龄胸围等生长性状的影响。结果显示：aa与AA基因型个体间在4月龄体质量上存在极显著差异（P〈0．01）,同样在6月龄体高上存在显著差异（P〈0．05）,Aa基因型个体在初生质量上显著高于AA基因型个体（P〈0．05）。由此可知,猪PLTP基因不同基因型对生长性状有着重要的影响,是猪育种应用中的一个潜在的遗传标记。     

糖皮质激素受体（GR）基因内含子7长度多态性与猪脂肪性状相关研究

应用特异PCR技术检测了猪糖皮质激素受体（GR）基因内含子7长度多态性,并分析其与脂肪性状的相关性。结果表明：凉伞猪、龙潭猪群体中GR基因内含子7长度多态性发现有A和B两个等位基因存在,该两种等位基因A/B频率在两个群体中分别为0.2286/0.7714和0.2008/0.7992。B等位基因是群体中的优势等位基因,该基因座在两群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态。建立混合模型方程组分析该长度多态对猪脂肪性状的效应,结果显示,猪GR基因内含子7长度多态的不同基因型与肌内脂肪、肩部膘厚、腰部膘厚、6～7肋膘厚、板油质量等性状显著相关（P<0.05）。表明猪GR基因内含子7长度多态对猪脂肪沉积有一定的影响。     

猪Toll样受体5基因cDNA克隆、蛋白质序列分析及其意义

为了解猪Toll样受体5(TLR5)蛋白的结构特征和进化关系,本研究从肠系膜淋巴结组织总RNA中克隆出猪Toll样受体5基因的cDNA序列。序列全长2641bp,其中2571bp的开放阅读框编码856个氨基酸残基的猪TLR5,含17.4%的亮氨酸,并有一段19个氨基酸的信号肽序列;同源性分析结果显示,TLR5在进化过程中具有高度保守性,与人、牛、山羊、绵羊、小鼠和大鼠的氨基酸序列同源性分别为77.5%、79.6%、78.3%、81.0%、69.2%和68.9%。蛋白分子结构预测结果表明,该分子由胞外区(642个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(191个氨基酸)组成,胞外区具有LRR结构域,胞内区具有TIR结构域,表现出典型的TLR家族结构特征。表明猪TLR5分子具有病原分子模式识别和信号传导的作用,这为其结构与功能的进一步研究奠定了基础。