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81.
为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒(BRV) VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段(342 bp)克隆于pMD 18-T载体中(pMD-VP7),作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法.经反应条件优化,结果表明该方法的最低检测量为8.03拷贝/μL.该方法对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、猪流行性腹泻病毒及牛结核分枝杆菌的检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性.批内和批间重复变异系数均小于3%.采用该方法对12份ELISA阳性样本检测出10份阳性,符合率83.33%.本研究建立的BVR VP7 qRT-PCR检测方法具有特异、灵敏、快速和对标本的检测能力较强等特点,可以用于临床诊断和流行病学调查. 相似文献
82.
腹泻是犊牛(尤其是奶牛犊)吮乳期死亡的主要原因,发病率高达50%~90%,死亡率达40%以上,即使治愈犊牛的生长发育也将受到影响。因此,对犊牛腹泻的病因学和治疗技术的研究成为世界范围内的热点课题之一。1犊牛腹泻的病因与症状犊牛腹泻病因复杂,除各种应激... 相似文献