家兔“流行性腹胀病”的病因和防治研究初报

对近3年四川发生的兔腹胀病的流行特点、临床症状、剖解病理变化、病因和防治进行了初步的研究。结果,该兔腹胀病主要引起断奶后至3月龄左右的兔发病,发病率一般在30％～60％,死亡率达90％以上．具有一定传染性和区域流行性。病兔出现明显腹胀,胃膨胀,胃内充满食物或水样稀薄的内容物,部分胃粘膜有黑色溃疡斑点,结肠内多充满白色胶冻样半透明状物。从69例病死兔中,分离到38株魏氏梭菌（55％）、13株大肠杆菌和2株沙门氏杆菌,大多数菌株都有致病力。添加霉菌毒素吸附剂或抗球虫药物不能有效控制该病。而使用恩拉霉素和蒽诺沙星可在1周内控制该病的发生。初步的研究结果表明：该病可能是一种细菌性传染病,其病原菌有可能是以魏氏梭菌为主,还有大肠杆菌、沙门氏茵等细菌,为单一或混合感染所致。     

猪细小病毒疫苗株NS1基因克隆及生物信息学分析

为进一步开展猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）NS1蛋白功能研究,根据GenBank登录的PPV参考株NADL-2（登录号：NC001718）的NS1基因序列设计1对特异性引物,采用PCR技术扩增PPV疫苗株NS1基因,将PCR扩增产物克隆入pTA2载体构建重组质粒pTA2-NS1,并进行测序鉴定。测序结果显示,构建的pTA2-NS1质粒含有一个开放阅读框（ORF）,全长1989 bp,共编码662个氨基酸,与GenBank登录的PPV参考株NADL-2、Kresse株的NS1基因的核苷酸同源性分别为99.85%和99.65%,氨基酸同源性分别为99.70%和99.70%。上述结果表明试验成功构建了含有PPV NS1基因的重组质粒pTA2-NS1。应用DNAStar软件及在线ProtScale、SignalP 4.1、TMHMM、Scansite、PSORTⅡ等生物信息学软件对NS1基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,结果显示NS1蛋白分子质量为75.7 ku,等电点PI为6.82,是弱酸性蛋白;NS1蛋白不含信号肽序列,无跨膜区,为可溶性蛋白,主要定位于细胞核内,T199、Y309、T338、T512、S631、T635为其潜在磷酸化位点。以上研究为进行PPV NS1蛋白表达,进一步开展NS1蛋白功能研究奠定了基础。     

四川地区兔波氏杆菌分离鉴定及耐药性分析

为研究四川地区兔波氏杆菌的分布状况及耐药性,采用微生物学方法对2020—2021年四川地区病死兔进行波氏杆菌的分离鉴定,并采用K-B纸片琼脂法对分离鉴定的兔波氏杆菌进行耐药性分析。结果表明：共分离出35株兔波氏杆菌,分离率为26.52%(35/132)。对10大类22种抗生素的耐药率为48.57%～85.71%,其中对替加环素、氟苯尼考、妥布霉素、庆大霉素、卡那霉素、四环素、多西环素较为敏感,而对头孢匹罗、头孢噻肟、头孢拉定、恩诺沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、青霉素、氨苄西林、阿莫西林、林可霉素、克林霉素、红霉素、麦迪霉素、磷霉素存在较高的耐药率,耐药率为48.57%～85.71%。反应了四川地区兔波氏杆菌存在较为严重的抗生素耐药,研究结果对兔波氏杆菌病的临床合理用药具有重要的指导意义。     

规模化鸡场种蛋蛋壳、蛋内容物的总菌数、大肠杆菌数、沙门氏菌数测定

用稀释滴种法对四川四个万只以上父母代种鸡场送检新鲜种鸡蛋，每个鸡场随机抽检20枚进行了蛋壳、蛋内容物总菌数、大肠杆菌数、沙门氏菌数的定量计数测定。结果表明：不同鸡场的不同种蛋的蛋壳、蛋内容物的总菌数、大肠杆菌、沙门氏菌检出率有较大变化范围，但不同鸡场间带菌对数值平均数和检出率差异都不显著（P＞0.05）。各规模化种鸡场的种蛋所带大肠杆菌在蛋壳上及蛋内容物中均为优势菌。     

一种适合检测养殖场环境中链球菌的PCR检测方法

根据溶菌酶释放蛋白的编码序列特点设计引物,以建立养殖场环境中链球菌的PCR快速检测方法。结果在链球菌参考株都扩增到885 bp特异性目的片段,而肠毒素性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等均不能检出;10倍系列稀释结果显示,本方法敏感性可达到检测单个菌株;对处理环境样品时,能检测到4×103CFU/g的环境链球菌。该方法具有简单、快速、准确的特点,大大缩短了检测环境中致病性猪链球菌的时间。     

规模化养猪的寄生虫病控制技术探讨

本次试验采用"漂浮法"和"廖氏法"等调查了10个养猪场的寄生虫病,结果有7个猪场的粪便虫卵呈阴性,1个猪场的结节虫病很轻微,1个猪场的蛔虫病有流行,1个猪场有4类寄生虫病,但10个猪场均有不同程度的疥螨病.据其结果,应将目前的传统"定期驱虫"改为"科学防虫",即母猪产前3周驱一次虫和商品仔猪购进时隔离驱一次虫,以后每2-4月检查一次粪便中虫卵或卵囊,根据结果确定是否驱虫.