甘肃黑猪H-FABP基因克隆、SNPs筛查及生物信息学分析

采用生物信息学方法从分子水平对甘肃黑猪H-FABP基因编码蛋白质的功能和性质进行分析。采用DNA池和直接测序技术对甘肃黑猪H-FABP基因进行SNPs快速筛查及其编码区蛋白质功能预测。结果表明,甘肃黑猪H-FABP基因编码区全长402 bp,编码133个氨基酸残基,共检测出4个SNPs,分别为C⁷³⁴T-Intron1、T¹⁵²C-Exon2、G³⁰A-Intron2、T¹²¹G-Intron2,其中T¹⁵²C-Exon2为错义突变,氨基酸由原来的异亮氨酸(Ile)转变为苏氨酸(Thr)。生物信息学预测发现,甘肃黑猪H-FABP蛋白是一种稳定的亲水蛋白,蛋白质二三级结构均以β-折叠为主的混合型蛋白。     

杂交籼稻中浙优8号移栽密度试验

进行了杂交籼稻中浙优8号作单季晚稻栽培的不同移栽密度试验,结果表明,中浙优8号在文成县作单季晚稻种植的最适宜移栽密度为8000～10000丛/亩。     

棉花种间BC_1群体偏分离的遗传剖析(英文)

偏分离是指观察到的基因型频率偏离预期的孟德尔频率的遗传分离方式,在大多数的遗传定位研究中非常普遍。在之前我们发表的遗传连锁图中,107个SSR标记在BC1作图群体[(Emian 22×3-79)×Emian22]中表现偏分离。为阐明这些偏分离标记的遗传机制及其在其它群体中的偏分离情况,将其中97个共显性标记在另外两个回交群体中进行验证。结果表明,原图谱中的61个偏分离标记在另外2个回交群体中都表现正常分离,说明杂交方式是导致偏分离的一个重要因素。36个偏分离标记至少在两个群体中仍表现偏分离,偏分离应该是配子选择的结果。偏分离标记分布于14条染色体上,其中D亚基因组上的分布多于A亚基因组。偏分离标记在在第2、第16和第18染色体上分布最多,暗示在这些染色体上存在偏分离位点,该结果有助于在棉花中鉴定偏分离位点。     

荷斯坦奶牛IFN-γ基因的克隆、序列分析及表达研究

利用RT-PCR技术从荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增IFN-γ(ccIFN-γ)基因,克隆至pMD18-T载体进行测序。测序结果表明,ccIFN-γ基因全长501bp,编码166个氨基酸,其中前23个氨基酸残基构成信号肽序列,后面147氨基酸残基构成成熟肽,其中含有2个潜在的N-链糖基化位点。二级和三级结构预测发现,ccIFN-γ蛋白分子中存在7个的α-螺旋,中间由无规卷曲连接,折叠成由α-螺旋包绕的中空状结构。将ccIFN-γ成熟肽编码区序列进一步克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。经SDS-PAGE分析,表达出与预期大小(20.6KDa)相符的重组蛋白,占菌体蛋白18.6%。Western blot检测证实表达的融合蛋白为牛IFN-γ,这为进一步开展重组ccIFN-γ生物学活性的研究奠定了基础。     

除草剂防除直播油菜田杂草的研究

选用75%二氯吡啶酸SG、10.8%高效氟吡甲禾灵EC、24%烯草酮EC等药剂对直播油菜田进行了田间药效试验,结果表明:75%二氯吡啶酸SG10g/667m2加10.8%高效氟吡甲禾灵EC45mL/667m2的总株防效最高,两次调查均超过90%,鲜重防效也都超过80%,与其他处理差异达到极显著水平,其对羊蹄、禾本科杂草以及其他杂草的防效明显优于其他处理。75%二氯吡啶酸SG6g/667m2加10.8%高效氟吡甲禾灵EC45mL/667m2的总株防效与对各种杂草的防效略低于处理75%二氯吡啶酸SG10g/667m2加10.8%高效氟吡甲禾灵EC45mL/667m2,但大大高于其他处理。试验各个处理对禾本科杂草的防效都较高,均超过93%,但对羊蹄和其他杂草的防除效果差异明显。10.8%高效氟吡甲禾灵EC45mL/667m2、24%烯草酮EC25mL/667m2等处理对羊蹄的防效甚微。浅(免)耕直播油菜田,特别是羊蹄较多的油菜田除草,可选用75%二氯吡啶酸SG6～10g/667m2加10.8%高效氟吡甲禾灵EC45ml/667m2进行防除,宜选在羊蹄1～2叶期施药。     

“三控”施肥技术对水稻生长发育和氮素吸收利用的影响

以两系杂交稻品种粤杂889为材料,设置三控施肥法和习惯施肥法2种处理,进行了早、晚两季试验,研究了“三控”施肥技术下水稻的生长发育和氮素吸收利用特性。结果表明：（1）与习惯施肥法相比,三控施肥法在减少氮肥10 %的情况下增产6 %~8 %,有效穗数、结实率和千粒重均有不同程度的提高。（2）三控施肥法具有明显的物质生产优势,其总干物质量比习惯施肥法高3.8 %~11.0 %。三控施肥法的中、后期叶绿素含量高,但叶面积指数相差不大。（3）三控施肥法的成穗率高,其最高茎蘖数比习惯施肥法减少5.9 %~10.6 %,但有效穗反而高于习惯施肥法,成穗率比习惯施肥法高5.5~11.8个百分点。（4）与习惯施肥法相比,三控施肥法在前期（幼穗分化前）的吸氮量低,但中、后期的吸氮量和全生育期总吸氮量明显高于习惯施肥法。三控施肥法的氮肥吸收利用率、农学利用率和氮肥偏生产力均高于习惯施肥法。     

夏季立体降温措施对猪舍内环境及肥育猪生产性能的影响

选取杜×长×大三元肥育猪120头作为试验动物,研究育肥舍内安装了喷雾降温和纵向通风降温措施后,对猪舍内环境和肥育猪生产性能的影响。结果表明:采取立体降温的猪舍内温度比对照组至少低2.25℃,湿度未见明显变化;肥育猪日增重提高13.91%,饲料转化率提高8.4%。由此可见,猪舍内采用了立体降温措施后,改善了舍内热循环的质量,给猪只创造了良好的生活环境,提高了肥育猪的生产性能。     

籼稻成熟胚愈伤组织继代培养过程中内源多胺含量的测定

采用高效液相色谱法对诱导产生的籼稻粤泰B(YTB)成熟胚愈伤组织继代培养过程中内源多胺组分和含量进行了测定。结果表明采用XDB-C18柱流动相梯度(从40%甲醇到80%甲醇)洗脱可以使Put、Spd和Spm3种多胺组分得到很好的分离。水稻粤泰B成熟胚愈伤组织继代培养5d后体内Put和Spd的含量明显增加,而Spm的含量基本不变。推测Put和Spd对水稻愈伤组织的生长发育可能有重要的作用,可为优化水稻愈伤组织培养基的组分提供参考。     

犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因免疫小鼠诱导抗体的研究

将犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)核衣壳蛋白基因(Nucleocapsid protein, N)的N蛋白基因克隆到pMD-18T载体,经酶切分析测序获得阳性重组质粒。采用EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后定向克隆进真核表达载体pcDNA中,电泳测序筛选阳性克隆pcDNA-N,转染COS-7细胞,IFA验证结果显示转染的COS-7细胞胞浆中表达了CDV的N蛋白。与弗氏佐剂乳化完全后将重组质粒pcDNA-N腹腔注射8周龄BABL/c小鼠,同时设pcDNA原载体做阴性对照,2周为间隔共免疫3次,三免两周后采血,ELISA检测效价。结果显示：pcDNA-N试验组抗体滴度为101.62±0.164,对照组为100.52±0.56。表明犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因免疫小鼠可诱导机体产生特异性体液免疫。     

水稻新抗源海选E32的纹枯病抗性研究

以广东海洋大学农学院分子育种研究室筛选的水稻新抗源"海选E32"、常规感病品种"湛A"不育系和"七丝软占"、中抗品种"特青"为试验材料,通过牙签接种法,在室内温室和室外大田对各水稻品系进行纹枯病抗性鉴定和统计分析,结果表明"海选E32"对纹枯病综合抗性达到中抗水平以上,但抗性表达受外界环境影响较大。