欧李增殖培养基的优化研究

【研究目的】筛选出适合欧李增殖的最适培养基,可以提高试管苗的质量和优化欧李无性繁殖体系。【方法】以欧李2号增殖培养阶段试管苗为试材,以不同培养基、不同激素浓度、不同蔗糖浓度、不同pH值为主要研究内容,进行了增殖效果研究。【结果】MS培养基最适宜欧李2号的增殖;NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+MS处理,其平均分化新梢数和大于2 cm新梢数最多;MS培养基中蔗糖浓度40 g/L处理,既可显著提高分化新梢数又可提高成苗率;pH6.0的MS培养基最适宜欧李2号生长。【结论】适于欧李2号的增殖培养基为MS培养基+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+6 g琼脂+40 g蔗糖,pH值为6.0。     

河北核桃ISSR反应体系的建立

以3个河北核桃样品为材料,对ISSR反应体系中的主要影响因子DNA模板浓度、引物浓度、DNA聚合酶用量、退火温度进行优化筛选。最后确定河北核桃ISSR-PCR反应体系为20 L体系中含10×PCR Buffer(Mg2+Plus)2 L,d NTPs(各2.5 m M)1.6 L,DNA聚合酶1.0 U,引物25 M,模板DNA 50 ng。反应的基本程序为:94℃预变性5 min(1个循环),然后94℃变性30 s,52℃退火60 s,72℃链延伸60 s(32个循环),72℃延伸10 min(1个循环),4℃保持。不同引物间适宜的退火温度不同。通过对影响ISSR反应体系的主要因子进行优化筛选,建立了适合河北核桃ISSR分析的反应体系,为进一步开展河北核桃指纹图谱、遗传多样性及品种鉴定等的研究奠定基础。     

核桃属植物休眠期的抗寒性鉴定

 以核桃属（Juglans）中的普通核桃、核桃楸、河北核桃和黑核桃4个种的18份种质休眠期的1年生枝条为试验材料,采用电解质渗出率法、组织褐变法及氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法并配合Logistic方程确定枝条的低温半致死温度（LT₅₀）;分析了LT₅₀与枝条解剖结构之间的相关性。结果表明：随着处理温度的降低,休眠期各核桃种质1年生枝条的相对电导率（REC）均呈上升趋势;供试种质间抗寒性差异大,LT₅₀在–38 ~–22 ℃之间;种间抗寒性差异明显,依次为黑核桃 > 核桃楸、河北核桃 > 普通核桃。电解质渗出率法、组织褐变法及TTC染色法均可用于休眠期核桃属植物的抗寒性鉴定,尤其以电解质渗出率法准确度高。用略高于大部分核桃种质LT₅₀的温度（–24 ℃）处理枝条,其相对电导率与LT₅₀之间达到极显著正相关,此温度处理下的相对电导率以及枝条的LT₅₀均可作为休眠期核桃属抗寒性鉴定的理化指标。核桃属4树种1年生茎粗大致相同的枝条中各组织的厚度差异显著,其中木栓层厚度及其在茎结构中所占的比率与枝条的LT₅₀之间达到极显著负相关,可作为休眠期核桃抗寒性鉴定的形态结构指标。     

基于AFLP分子标记的核桃核心种质的构建

【目的】构建核桃核心种质以便更好地保存、评价和利用丰富的核桃种质资源。【方法】利用AFLP分子标记,对131份核桃原始种质采用逐步聚类法建立候选核心种质,比较不同候选核心种质的多态性位点数、多态性位点百分率,结合形态学指标及地理来源,最终确定核桃核心种质,并进行评价。【结果】建立的核桃核心种质保留了原始种质10%的样品,分别为河北的天桥1号、陕西的西洛2号和西林1号、山西的晋龙1号、山东的丰辉、辽宁的辽宁8号和辽73013、新疆的温185、河南的绿波、北京的北京746、美国引进品种维纳、日本引进品种清香和朝鲜的品种安边1号。根据遗传多样性评价结果,与原始种质相比,核心种质的多态性位点保留率为75.4%。【结论】构建的核桃核心种质能较大程度地代表原始种质的遗传信息,符合核心种质要求。     

核桃属4 树种展叶期抗寒性鉴定

 以普通核桃（Juglans regia L.）、核桃楸（J. mandshurica Maxim.）、河北核桃（J. hopeiensis Hu）和黑核桃（J. nigra L.）4种核桃属植物的20份种质展叶期叶片为试验材料,采用电导法并配合Logistic方程确定其低温半致死温度（LT₅₀）;分析了LT₅₀与叶片解剖结构之间的相关性。结果表明,随着处理温度的降低,核桃叶片的相对电导率（REC）均呈上升趋势;供试核桃种质间的抗寒性差异较大,低温半致死温度在–8 ~ 2 ℃之间,在黑核桃、核桃楸及普通核桃中均有抗寒性强的种质资源。利用略高于大部分核桃种质LT₅₀的温度（0 ℃或–3 ℃）处理叶片,其相对电导率与低温半致死温度之间达到极显著正相关,而且相关系数高,此温度下处理12 h后叶片的相对电导率以及叶片的LT₅₀均可作为鉴定展叶期核桃种质抗寒性强弱的物理指标。核桃属不同种间的叶片结构类似,但各有特点。栅栏组织厚度和叶片总厚度与其LT₅₀之间均达到极显著负相关,可作为核桃叶片抗寒性鉴定的形态结构指标。     

核桃坚果硬壳结构与木质素和纤维素相关性研究

试验对核桃坚果硬壳结构(缝合线紧密度、厚度、机械强度)与坚果硬壳中的木质素、纤维素含量进行了比较,并分析了三者之间的相关性.结果表明,核桃硬壳结构指标之间存在显著的相关性,不同核桃品种(系)之间硬壳中木质素、纤维素含量存在着显著差异.硬壳木质素含量在31.09％～51.88％,纤维素含量在10.97％～ 16.00％,硬壳木质素含量与缝合线紧密度、机械强度之间呈显著的正相关关系,与硬壳厚度呈极显著的正相关关系.     

五叶爬山虎组织培养试验研究

对五叶爬山虎组织培养试验研究结果表明:外植体以顶芽以下3～6个节位上的腋芽为适宜,萌芽率高,植株粗壮;增殖阶段细胞分裂素的不同种类和浓度对其增殖有不同的影响,低浓度的6-BA和NAA配合使用,腋芽多有丛生芽,而低浓度的KT和NAA配合使用,根和茎同时生长,而且苗高,叶色绿,一次成苗;小苗在1/2MS+IBA0 4mg/L+IAA0 5mg/L+白砂糖20g/L+琼脂7 5g/L的培养基中生根好,20d后的生根率可达100%。     

核桃果实成熟期间主要营养成分的变化

 对核桃果实成熟过程中主要营养成分的变化进行了研究。发现成熟期间种仁中的脂肪和青皮中的钾均呈指数型积累, 且它们之间表现出极显著的正相关; 青皮中钾的含量明显高于青皮中其它矿质元素含量, 也明显高于种仁和硬壳中的钾含量。