猪IFN-γ基因的克隆与序列分析

猪IFN-γ具有强烈的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用，作为生物药荆和疫苗佐剂具有广阔的应用前景。通过对猪PBMC刺激诱导，提取总RNA，然后采用RT—PCR技术成功克隆了猪IFN-γ基因。序列分析表明，克隆到的基因序列与NCBI GenBank上登载的猪IFN-γ基因序列完全一致。该基因的成功克隆为IFN-γ的进一步研究和开发奠定了基础。     

当前国内外仔猪等孢球虫病的流行现状

猪等孢球虫病是由猪等孢球虫寄生于猪小肠上皮细胞而引起的一种寄生性原虫病,呈全球性分布,主要危害集约化猪场7～15日龄仔猪群,以腹泻（排淡黄色浆糊状稀粪）、脱水、体重下降和死亡为主要临床特征。在临床上易与仔猪黄白痢和轮状病毒、梭菌及肠炎等引起的仔猪腹泻混淆,常造成误诊,延误了治疗时机,影响仔猪群整齐度、断奶体重、断奶成活率、饲料成本、断奶时问等指标,     

藜麦种植技术要点

<正>藜麦原产于南美洲安第斯山脉,是人类珍贵的生物多样性粮食资源之一,是植物界全蛋白谷物,蛋白质含量和牛肉相当,单体植物即可满足人类基本营养需求。藜麦适宜所有人群食用,为最适宜人类的全营养食品。藜麦耐寒、耐旱、耐盐。 2019年,齐河县种植的"山引1号""山引2号",种植面积800亩,测产平均亩产250公斤,首次在平原地区规模化试种藜麦成功。1.选用良种。藜麦生长气候条件要求无霜期大于120天,平均温度15～20℃,花期和灌浆期温度低     

多房棘球蚴诱导小鼠枯否氏细胞极化相关ceRNA调控网络的构建与分析

多房棘球蚴(Em)是一种危害严重的人畜共患寄生虫。为探索非编码RNA在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝枯否氏细胞(KCs)极化中的作用机制，本研究用多房棘球蚴原头蚴感染BALB/c小鼠，分离感染2月小鼠肝KCs，通过RNA测序分析，构建与多房棘球蚴感染引起的KCs M2型极化相关的竞争性内源RNA (competing endogenous RNAs,ceRNA)调控网络，并通过qPCR和miRNA过表达进行验证。结果表明，多房棘球蚴感染小鼠2月后，KCs M1型标志分子均显著下调，而M2型标志分子均显著上调。5个circRNA和9个miRNA参与M2型标志分子IL10、IL13、Arg1基因的表达调控，而且其表达趋势与测序结果及circRNA-miRNA-mRNA调节关系基本一致。另外，miR-466c-5p过表达导致了circ_0000372和IL13的表达下调，说明可能存在circ_0000372-miR-466c-5p-IL13轴的调节关系，并在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝KCs极化中发挥重要作用。本研究为进一步揭示多房棘球蚴调控宿主巨噬细胞极化的相关机制提供了重要理论依据。     

苦荞麦FtWRKY6基因的克隆及其在低磷与激素诱导下根中的表达分析

WRKY转录因子是植物非生物胁迫反应中的重要调节子。荞麦耐贫瘠，磷利用率较高。为了探究WRKY基因在荞麦磷饥饿反应中可能的调节作用，以苦荞麦为材料，采用逆转录PCR方法，从低磷处理的根RNA样品中获得了FtWRKY6基因的编码序列。FtWRKY6 cDNA长1 572 bp,编码524个氨基酸，含有2个典型的WRKY保守结构域，锌指类型为C₂H₂,归属于第Ⅰ类WRKY,与绿茶CsWRKY24在氨基酸水平上的同一性较高(55.5%)。拟南芥原生质体瞬时表达分析表明，FtWRKY6定位于细胞核中；酵母单杂交试验表明，FtWRKY6具有转录激活活性。实时荧光定量PCR分析表明，在根中FtWRKY6的表达受低磷和3种重要的低磷反应相关激素—吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)和细胞分裂素(CTK)显著诱导。上述结果提示，FtWRKY6具有转录因子的基本结构与生化特征，在根中可能通过IAA、GA、CTK信号通路的交互作用介导苦荞麦在低磷条件下的响应过程。     

城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法

  目的  土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。  方法  通过筛选2种病原菌特异性引物，优化反应条件。  结果  初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测，其灵敏度分别达24×106和22×106拷贝·L?1，2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。  结论  建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性，可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。图2表5参29     

猫肾脏淋巴瘤的病例报告

<正>猫肾脏淋巴瘤(Feline renal lymphoma)常发于老年猫，是猫肾脏最常发的肿瘤类型之一，常见的临床症状与急性肾功能不全类似，临床上需要结合血液学、影像学和细胞学等检查来确诊。本院于2020年7月接诊1例猫肾脏淋巴瘤病例，确诊后使用COP-19方案化疗，目前该患猫状态良好。由于猫肾脏淋巴瘤症状的特异性不强且鉴别诊断复杂，本文旨在结合国内外相关兽医临床进展对该病进行分析，对诊疗流程进行梳理，加深临床医生对猫肾脏淋巴瘤的认识，避免误诊和漏诊。     

多房棘球蚴感染对小鼠肝脂质代谢的影响

旨在探讨多房棘球蚴感染早期对小鼠肝脂质代谢的影响。选取60只清洁级BALB/c小鼠(6周龄，雄性)随机分为试验组和对照组，每组30只。试验组小鼠每只腹腔接种600个原头蚴，对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS缓冲液。采用原位两步循环灌流及多步低速差速离心分离纯化肝实质细胞。利用高通量测序分析感染3月小鼠肝实质细胞差异表达的mRNA,并对其进行KEGG、GO分析和qRT-PCR验证。制备多房棘球蚴感染2、3和6月小鼠的肝组织切片，分别进行油红O染色，并通过qRT-PCR检测多房棘球蚴感染不同感染时期肝实质细胞脂质代谢相关基因的表达水平。结果表明，与未感染对照组相比，小鼠感染多房棘球蚴后3、6月肝脂肪沉积明显增多；感染2月的肝实质细胞脂质合成相关基因Scd1、Fasn和Srebf1,以及脂质氧化分解相关基因Acox1和Cpt1α均明显上调；感染3月的肝实质细胞Scd1、Fasn、Srebf1及Cd36的表达水平均明显升高，而Acox1、Cpt1α、Pparγ和Pparα的表达水平明显降低。上述结果表明，多房棘球蚴感染早期可能通过促进肝实质细胞的脂质合成，抑制脂质氧化分解，从而导致肝脂质沉积。     

‘甜蜜蓝宝石’葡萄组培技术研究

以鲜食葡萄品种‘甜蜜蓝宝石’为试材，取当年生的半木质化茎段作为组织培养的外植体，通过探索外植体消毒、启动培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽环节的关键技术，建立适用于‘甜蜜蓝宝石’的组培快繁体系。结果表明，将当年生半木质化茎段，先用75%酒精消毒40 s、再用0.1%升汞消毒15 min，外植体成活率达到40%；最佳启动培养基为1/2 MS+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂，腋芽萌发率达到57.8%；利用1/2 MS培养基作为继代培养基，增殖效果最好，45 d增殖系数高达5.2；利用1/4 MS+IBA 0.1 mg/L培养基进行生根培养效果最好，生根率达到88.3%，新芽茎秆较为粗壮，生长正常；生根培养50 d以上，按程序炼苗过渡移栽，成活率高达90%。