猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因的克隆及表达

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增出PRRSV甘肃株的核衣壳蛋白(N)基因,将N基因克隆至pGEM-T easy载体上,获得含N基因的阳性重组质粒pGEM-T easy-N.对质粒中的插入片段进行测序,应用DNAStar分析所测序列与GenBank中已登录的PRRSV毒株的同源性,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,得到重组表达载体pGEX-4T-1-N,转化E.coliBL21(DE3)细胞,用SDS-PAGE检测表达产物,并对其进行纯化.结果表明:PRRSV甘肃株N基因核甘酸序列与PRRSV-VR2332株的同源性为93.3%,与欧洲LV株的同源性为66.1%;构建的重组表达载体在大肠杆菌中获得了成功表达,表达产物为40ku的可溶性融合蛋白.     

猪干扰素-γ基因的表达、纯化及活性分析

依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21(DE3),经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导表达,可溶性的表达产物分别经镍柱和Sephadex-G100纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化,然后进行SDS-PAGE、Western-blot分析,并用细胞病变抑制法进行重组猪IFN-γ活性测定.结果表明:试验得到了高纯度的重组pIFN-γ,且纯化的重组猪IFN-γ蛋白具有较高的干扰病毒复制的活性,对PRV的活性为2.0×103U.mg-1,而对标准O型口蹄疫病毒的活性为2.56×105U.mg-1.     

生物有机肥在蔬菜生产中的应用初报

在蔬菜生产上应用生物有机肥,可极显著地提高蔬菜的单产,在大白菜、瓜类、番茄、花椰菜、豇豆等多种蔬菜作物上试验表明,增产率达11.67%～34.22% 同时可提早成熟,延长蔬菜上市时间,改善蔬菜品质及商品性。     

架子牛育肥方法的研究报告

为了发展我国新兴的肉牛业,国家和黑龙江省在黑河投资开发草原,建设商品牛出口基地,目前这个计划方案正在顺利实施中。为了适应商品牛基地建设需要,我们进行了黑白花犍牛不同肥育方法的试验和屠宰测定。现将试验结果报告如下。     

对振兴我省奶牛业的四点建议

我省奶牛业近几年来取得了令人瞩目的成就。1989年末存栏奶牛49.2万头,比1988年增长4.7%,奶类产量88.2万吨,增长6.1%,人均占有奶类23.8千克,因此获得奶牛王国的美称。但奶业发展前景不乐观,特别值得一提的是在许多地方已经出现了奶牛滑坡现象。如何尽快摆脱目前的困境,除政策因素之外,根本出路在于走技术兴奶牛业之道。只有提高牛奶产量,降低成本,增强自身消化力,才能走出低谷,降中求稳,稳中求进。下面对振兴我省奶业提出四点不成熟的个人建议,与同志们商讨。     

甜瓜杂交制种使用坐瓜灵效果研究

<正> 坐瓜灵(KT—30,苯基脲类细胞分裂素,中国农科院郑州果树研究所生产)对提高西瓜坐果率有明显的效果。在大田生产中对提高甜瓜坐果率也有很好的作用。 甜瓜F_1制种,常因不能及时坐瓜而耗费大量杂交去雄、套袋的人力;且因坐瓜晚和坐瓜节位太高而影响制种产量。因此,能否在甜瓜杂交制种以及杂交育种中使用坐瓜灵,促进及时坐瓜,确保杂交成功是一个亟待研究的重要问题。但坐瓜灵在杂交制种甜瓜上应用,对种子数目及种子产量等各方面有何影响,国内外研究甚少。本试验在甜瓜制种上使用坐瓜灵,旨在摸清使用坐瓜灵后对种子数     

仔猪结肠水泥梗阻一例

猪肠梗阻较常见,但因吃入水泥导致肠梗阻较为罕见。本市苏溪镇齐山头村陈某于1991年4月12日从市场购入一头仔猪,体重31.5千克。购入后即精神沉郁、食欲差,体温38℃,无大便。时有呻吟、腹部触诊可摸到一硬块,仔猪日见消瘦。当地兽医认为肠梗阻,并进行保守疗法无效而死亡。剖检     

猪囊虫酸性核糖体磷蛋白基因P2重组杆状病毒的构建及鉴定

用O1igo(dT)软件设计了1对酸性核糖体磷蛋白P2(arpP2)基因特异引物，以pUCl8—P2为模板，经PCR扩增出366bP的猪囊虫arPP2片段，酶切回收后与经过相同处理的pFASTBAC供体质粒连接，转化DH5α感受态细胞；对重组质粒经酶切和PCR鉴定后再转化DHl0BAc感受态细胞，提取高分子BacmidDNA，用Lipofectin法转染Sf9单层昆虫细胞，待出现细胞病变后收集培养上清液，重新感染昆虫细胞，提取细胞DNA进行PCR鉴定，证明含有arPP2基因的重组杆状病毒成功地感染了昆虫细胞。     

布朗李在江西玉山引种的病虫害表现

近年来 ,江西省玉山县先后从浙江、山东、安徽等地引种了布朗李系列品种。这些果树现已进入丰产期 ,标志着玉山县引种布朗李已经获得初步成功。据 1999年统计 ,全县布朗李面积已达 2 96ｈｍ2 。由于地理位置和气候的差异 ,病虫害表现必然有所不同。笔者现将 1995～ 2 0 0 0年间 ,对玉山境内的布朗李所观察到的几种主要病虫害表现介绍如下。1　主要病害1 1　根癌病 (Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ)1997年 6月 ,笔者在玉山县六都乡、文成镇、冰溪镇的果园中 ,均发现此病害。症状是在树干基部或根部出现瘤状突起 ,表面粗糙…