黄颡鱼人工繁殖试验

试验表明,池塘培育的亲鱼催产效果优于水库现场捕捞的亲鱼,小水泥池的育苗效果优于池塘。     

猪IFN-γ基因的克隆与序列分析

猪IFN-γ具有强烈的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用，作为生物药荆和疫苗佐剂具有广阔的应用前景。通过对猪PBMC刺激诱导，提取总RNA，然后采用RT—PCR技术成功克隆了猪IFN-γ基因。序列分析表明，克隆到的基因序列与NCBI GenBank上登载的猪IFN-γ基因序列完全一致。该基因的成功克隆为IFN-γ的进一步研究和开发奠定了基础。     

小反刍兽疫的研究进展

概述了小反刍兽疫的易感动物、临床症状及病原的理化特征和基因组结构，重点阐述了病毒6种结构蛋白的大小和组成、小反刍兽疫病毒的分离培养、血清学及分子生物学诊断技术，并对其传统疫苗以及新型基因工程疫苗的研制进行了详细论述，以为该病的流行病学研究、诊断和免疫防制提供参考。     

当前国内外仔猪等孢球虫病的流行现状

猪等孢球虫病是由猪等孢球虫寄生于猪小肠上皮细胞而引起的一种寄生性原虫病,呈全球性分布,主要危害集约化猪场7～15日龄仔猪群,以腹泻（排淡黄色浆糊状稀粪）、脱水、体重下降和死亡为主要临床特征。在临床上易与仔猪黄白痢和轮状病毒、梭菌及肠炎等引起的仔猪腹泻混淆,常造成误诊,延误了治疗时机,影响仔猪群整齐度、断奶体重、断奶成活率、饲料成本、断奶时问等指标,     

羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达

结合文献报道并通过计算机软件分析筛选出羊痘病毒(SGPV) A4同源核蛋白和A27、A33、B5、L1同源膜蛋白基因的T、B细胞优势抗原表位共6段,采用人工合成的方法将各抗原表位以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头串联成一条全新的多表位嵌合基因E.将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pcDNA3.1-E质粒.用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;提取转染细胞总RNA,RT-PCR方法检测目的基因的转录.结果所构建的真核表达质粒在BHK-21细胞中能表达目的蛋白,RT-PCR方法检测到目的基因的转录;表明表达产物能与相应抗体特异性结合,具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗SGPV的核酸疫苗.     

多房棘球蚴诱导小鼠枯否氏细胞极化相关ceRNA调控网络的构建与分析

多房棘球蚴(Em)是一种危害严重的人畜共患寄生虫。为探索非编码RNA在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝枯否氏细胞(KCs)极化中的作用机制，本研究用多房棘球蚴原头蚴感染BALB/c小鼠，分离感染2月小鼠肝KCs，通过RNA测序分析，构建与多房棘球蚴感染引起的KCs M2型极化相关的竞争性内源RNA (competing endogenous RNAs,ceRNA)调控网络，并通过qPCR和miRNA过表达进行验证。结果表明，多房棘球蚴感染小鼠2月后，KCs M1型标志分子均显著下调，而M2型标志分子均显著上调。5个circRNA和9个miRNA参与M2型标志分子IL10、IL13、Arg1基因的表达调控，而且其表达趋势与测序结果及circRNA-miRNA-mRNA调节关系基本一致。另外，miR-466c-5p过表达导致了circ_0000372和IL13的表达下调，说明可能存在circ_0000372-miR-466c-5p-IL13轴的调节关系，并在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝KCs极化中发挥重要作用。本研究为进一步揭示多房棘球蚴调控宿主巨噬细胞极化的相关机制提供了重要理论依据。     

城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法

  目的  土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。  方法  通过筛选2种病原菌特异性引物，优化反应条件。  结果  初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测，其灵敏度分别达24×106和22×106拷贝·L?1，2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。  结论  建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性，可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。图2表5参29     

多房棘球蚴感染对小鼠肝脂质代谢的影响

旨在探讨多房棘球蚴感染早期对小鼠肝脂质代谢的影响。选取60只清洁级BALB/c小鼠(6周龄，雄性)随机分为试验组和对照组，每组30只。试验组小鼠每只腹腔接种600个原头蚴，对照组小鼠腹腔注射等体积的PBS缓冲液。采用原位两步循环灌流及多步低速差速离心分离纯化肝实质细胞。利用高通量测序分析感染3月小鼠肝实质细胞差异表达的mRNA,并对其进行KEGG、GO分析和qRT-PCR验证。制备多房棘球蚴感染2、3和6月小鼠的肝组织切片，分别进行油红O染色，并通过qRT-PCR检测多房棘球蚴感染不同感染时期肝实质细胞脂质代谢相关基因的表达水平。结果表明，与未感染对照组相比，小鼠感染多房棘球蚴后3、6月肝脂肪沉积明显增多；感染2月的肝实质细胞脂质合成相关基因Scd1、Fasn和Srebf1,以及脂质氧化分解相关基因Acox1和Cpt1α均明显上调；感染3月的肝实质细胞Scd1、Fasn、Srebf1及Cd36的表达水平均明显升高，而Acox1、Cpt1α、Pparγ和Pparα的表达水平明显降低。上述结果表明，多房棘球蚴感染早期可能通过促进肝实质细胞的脂质合成，抑制脂质氧化分解，从而导致肝脂质沉积。     

‘甜蜜蓝宝石’葡萄组培技术研究

以鲜食葡萄品种‘甜蜜蓝宝石’为试材，取当年生的半木质化茎段作为组织培养的外植体，通过探索外植体消毒、启动培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽环节的关键技术，建立适用于‘甜蜜蓝宝石’的组培快繁体系。结果表明，将当年生半木质化茎段，先用75%酒精消毒40 s、再用0.1%升汞消毒15 min，外植体成活率达到40%；最佳启动培养基为1/2 MS+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂，腋芽萌发率达到57.8%；利用1/2 MS培养基作为继代培养基，增殖效果最好，45 d增殖系数高达5.2；利用1/4 MS+IBA 0.1 mg/L培养基进行生根培养效果最好，生根率达到88.3%，新芽茎秆较为粗壮，生长正常；生根培养50 d以上，按程序炼苗过渡移栽，成活率高达90%。     

大兴安岭西麓黑土旱作农田不同地力水平土壤养分分析

为保护和培育黑土，通过田间随机取样和室内养分分析，调查大兴安岭西麓谢尔塔拉农牧场不同地力等级土壤肥力状况及养分差异。结果表明，有机质、有效磷和缓效钾含量与地力等级相关性较好，随着地力等级的升高，含量呈升高趋势；其中有机质含量变化最大，一等地平均含量为62.93 g·kg^-1,五等地为36.71 g·kg^-1,一等地是五等地的1.71倍，一至四等地有机质含量均属于国家土壤普查土壤养分分级标准很丰富的水平，五等地属于丰富的水平；有效磷和缓效钾一等地分别是五等地的1.36倍和1.31倍。pH、全氮、碱解氮、速效钾也随着地力等级的升高呈升高趋势，全磷和全钾未呈现规律性变化，不同等级地力间均未形成显著性差异。不同地力等级平均有效铜、有效硼、有效锌含量适中，有效锰、有效钼含量丰富，有效铁含量极丰富。