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为了获得具有抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)能力的绵羊胎儿成纤维细胞,采用组织块和酶消化法分离培养绵羊胎儿成纤维细胞,利用脂质体转染法将shRNA转基因表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经抗性筛选获得抗性细胞克隆,利用PCR方法对获得的细胞克隆进行鉴定,用BVDV侵染转基因细胞,利用real-time PCR和病毒滴定测定法分析不同细胞克隆抑制BVDV复制的能力。结果显示:试验成功构建了靶向BVDV表达shRNA的转基因表达载体pNeo-2loxp-u6-sh BVDV,经抗性筛选共获得22个抗性细胞克隆;22个细胞克隆中12个细胞克隆含有目的基因,为转基因细胞,其中5个转基因细胞克隆具有明显的抗BVDV复制的能力,最高抗病毒效率达到90.7%。结论:在细胞水平能有效抑制BVDV病毒增殖的转基因绵羊胚胎成纤维细胞的获得,为进一步利用体细胞核移植技术制备转基因绵羊提供了合适的供体细胞。 相似文献
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马齐 《农产品加工.学刊》2007,(12):6-7
中国肉类产业是在政府的宏观指导下,自由养殖、自由购销,价格随行就市.所以,它的发展是在市场经济的成长中不断进行调整、组合.在肉类产业链中,肉类加工以它特有的联结作用对促进我国农牧业发展、繁荣市场经济起着极其重要作用.中国肉类工业的发展正处在新的转型期,其资本结构、技术装备、产品结构、产品质量、企业规模都在得到快速提升. 相似文献
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研究了11种酶稳定剂丙二醇、丙三醇、硼砂、硼酸、三乙醇胺、山梨醇、氯化钙、亚硫酸氢钠、海藻酸钠、聚乙烯醇、聚乙二醇-400对液体洗涤剂中去血渍复合酶活性的影响,稳定剂添加量设定为1%(质量百分比)。结果表明:去血渍专用酶的酶活保存率在无稳定剂的情况下,仅4个月酶活力就完全丧失。总体来说,室温下保存6个月,酶活力保存率大于70%的有单一稳定剂聚乙烯醇、三乙醇胺以及复合稳定剂1%三乙醇胺+1%氯化钙+1%聚乙烯醇,1%三乙醇胺+1%山梨醇+1%氯化钙,1%三乙醇胺+1%氯化钙,酶活保存率分别为85.6%、81.2%、80.1%、77.3%、72.9%。 相似文献
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文章研究了8种常见金属离子K+、Na+、Mg2+、Mn2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+对4PCA饲料复合酶中蛋白酶活性的影响,离子浓度设定为1×10-4mol·L-1、1×10-3mol·L-1以及1×10-2mol·L-1三个浓度梯度。结果表明:在实验特定金属离子浓度范围下,K+、Na+对酶活无特别影响,Mg2+有一定的激活作用,Mn2+的激活作用最大,Ca2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+对酶活有不同程度的抑制作用,其大小顺序依次为Cu2+>Fe2+>Zn2+>Ca2+。 相似文献
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