先导编辑在鸡胚成纤维细胞系中的效率研究

为探究先导编辑在鸡细胞系中的基因编辑效率，研究通过点突变和重组连接的方式构建先导编辑的表达质粒，使用在线软件设计并化学合成靶向OVM、MSTN和NHE1基因的先导编辑引导RNA(pegRNA)质粒，脂质体转染上述质粒至鸡胚成纤维细胞系（DF-1）中并进行药物筛选，PCR产物TA克隆测序检测并统计各位点的编辑效率。结果显示：测序和PCR鉴定结果表明先导编辑表达质粒构建成功；DF-1中OVM基因经先导编辑后成功产生错义突变，其中精确编辑效率为41.10%、错误插入与缺失（indel）效率为6.67%，均显著优于对照组的常规基因编辑（P<0.05）;MSTN基因的先导编辑精确编辑效率为10.24%、indel效率为13.57%,NHE1基因的先导编辑精确编辑效率为24.88%、indel效率为7.18%。结果验证了先导编辑在鸡细胞系中的有效性和普适性，为其进一步应用于基因编辑鸡的制备奠定基础。     

基于KEGG千针万线草光合代谢通路分析

千针万线草是一种药用植物，光合作用是植物最基本的代谢途径。本研究通过千针万线草种子转录组测序及功能注释，分析KEGG数据库注释功能并挖掘光合代谢通路基因。结果表明：比对到KEGG中的6 262条Unigenes被归类为6个类别，其中注释到代谢相关通路的Unigene数量最多，有3 051条，占比48.72%；同时，在代谢通路中千针万线草光合代谢通路涉及光合作用、光合作用-天线蛋白和碳同化3个代谢途径，其中光合作用途径涉及光系统Ⅰ反应中心亚基1个、5种光系统Ⅱ蛋白、1种细胞色素b6复合物、2种细胞色素b6-f亚基、1种铁氧化还原蛋白、1种铁氧还蛋白-NADP⁺还原酶、5种F-型H⁺-ATP酶亚基，光合作用-天线蛋白途径包括2种光系统Ⅱ结合蛋白，碳同化途径包括卡尔文循环、C4、景天酸代谢3个途径，分别涉及12种、12种、5种酶。本研究为开展光合作用分子机制研究奠定了基础。     

不同措施下三江源区“黑土山”土壤治理效果分析

相对于“黑土滩”的研究，“黑土山”的研究尚处于初期。本研究以6种措施“微耕机翻耕一遍+人工撒播(MT1+MS)、微耕机翻耕两遍+人工撒播(MT2+MS)、旋耕机翻耕+撒播机播种(RT+SS)、挖掘机开沟+人工条播(ED+MS)、免耕播种(NT+S)、人工耙翻+人工撒播(MR+MS)”治理后的草地为研究对象，分析土壤的理化特征和微生物量的变化，以及6种措施对土壤的治理效果，为“黑土山”土壤快速治理提供理论依据。结果表明：土壤含水量、有机碳、全氮、全磷、微生物量碳氮磷含量随土层均呈下降趋势，并且0～20 cm土层土壤含水量和各土层土壤养分含量均在措施NT+S时最高；各土层的容重在措施ED+MS最大，且差异显著(P<0.05);0～10 cm土层，土壤水稳性团聚体质量百分数在措施NT+S最高且差异显著(P<0.05),10～20 cm、20～30 cm土层中各措施下差异不显著。因此，结合土壤理化性质和微生物量的变化，三江源区“黑土山”土壤的快速治理可选择免耕播种的措施。     

叶面喷施2，3-二巯基丁二酸降低水稻幼苗茎叶镉含量的机制

为探寻叶面喷施2，3-二巯基丁二酸（DMSA）降低水稻幼苗茎叶镉含量的潜在机制，在人工气候室内，采用水培实验方法研究了镉在幼苗不同部位的累积情况及喷施DMSA对镉胁迫的影响。结果表明：随着DMSA喷施浓度增加，茎基镉含量呈显著增加趋势，当DMSA喷施浓度达到1.0 mmol·L^-1时茎基镉含量与对照（不喷施DMSA）处理相比显著增加57.3%，同时镉由茎基向地上部的转移效率降低52.7%。在此基础上，探寻了镉在茎基细胞中的赋存形态及镉的亚细胞分布情况，结果表明茎基中难溶态镉含量与对照处理相比显著增加了80.8%，细胞壁中镉含量达到对照处理的2.1倍。进一步对细胞壁各组分镉含量进行测定发现，果胶组分中镉含量随着DMSA喷施浓度增加呈现出显著升高趋势，与对照处理相比最高增加99.5%。此外，喷施DMSA后茎基中总植物螯合素（PCs）和谷胱甘肽（GSH）含量均呈现出显著增加趋势，最高分别达到对照处理组的2.2倍和3.1倍。喷施DMSA显著缓解了镉胁迫，幼苗地上部超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性分别升至对照处理的3.0倍和2.7倍，荧光标记试验表明叶片中过氧化氢含量随DMSA喷施浓度增加呈现显著降低趋势。研究表明，喷施DMSA显著增加了水稻幼苗茎基巯基化合物含量，从而提高了对镉的拦截能力，降低了镉由茎基向幼苗地上部转运效率，使水稻幼苗地上部镉含量显著降低，同时喷施DMSA还可显著缓解幼苗镉胁迫。