应用套入式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测蓝舌病病毒的研究

本实验建立了一种Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法。应用方法检测５株标准株蓝舌病病毒（Ｔ４、Ｔ１０、Ｔ１１、Ｔ１６、Ｔ２０）和５株国内蓝舌病病毒分离株（ＣＦ４、ＡＦ６、Ｚ１、Ｈ１、Ｇ１４）,检测结果均为阳性,而检测相关环状病毒（ＥＨＤ２、ＥＨＤ６、Ｉｂｒａｋｉ）,检测结果均生。研究证明,此方法可检测到３．５ｆｇ的ＢＴＶ－ＲＮＡ,灵敏度较高。该方法成功区分了蓝病病毒和相关环状病毒,比血清学方法更加优势,在临床     

仔猪渗出性皮炎的诊断与防治

正仔猪渗出性皮炎(EE)主要是由猪葡萄球菌感染皮肤引起的一种疾病,又称溢脂性皮炎。本病主要侵害刚出生的哺乳仔猪和刚断奶的仔猪[1]。作者于2017年4月20日,在山东农业大学动物保健医院接诊了一例来自于山东省泰安市岱岳区汶口镇北西遥村房某某带来的两头疑似猪葡萄球菌感染的病死仔猪,根据临床症状及主诉情况并结合实验室检查,最后确诊为仔猪渗出性皮炎。作者通过药敏试验又进一步给出了发病后的具体用药方向,     

多种鸡病血清抗体效价联合测定法的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)做为一种简便、快速、灵敏、特异的诊断方法在兽医界已得到广泛的应用。在此基础上,一些学者又建立了P/N—ET和OD-ET法,这种方法的特点在于将免疫学和统计学有机地结合起来,对血清抗体效价进行测定时,只要将血清样品做一个稀释度进行ELISA,测出结果(P/N或OD值)后代入已建立的标准直线     

中苜一号紫花苜蓿碳同化分配与转移速率的研究

对紫花苜蓿(Medicago sativa L.)(中苜一号)的生长条件进行控制,并在分枝期对其进行¹³C脉冲标记,收集标记后第6,12,18,24,30 d的叶、茎、根以及土壤样品,测定各样品中¹³C含量,以此来探讨苜蓿光合碳的吸收与转移。结果表明:苜蓿各组分光合产物的分配顺序为茎>叶>根;¹³C转移速率为叶>茎>根,随着时间的延长,苜蓿各组分¹³C含量逐渐减少,最终达到稳定状态;渗漏到土壤中的¹³C含量在0~10 cm土壤层显著高于10~20 cm,但10~20 cm的¹³C含量比较稳定。     

案例分析——美国西尼罗河热疫情的暴发与防控

自1999年美国报道首例人西尼罗河病毒(WNV)感染以来,已出现了41 000多例临床感染病例和1 700多例死亡病例。1999年至2012年间,美国因人感染WNV住院造成的花费累计约7.78亿美元。同时,马属动物的治疗和免疫接种及WNV的监控也给美国带来了更严重的经济负担。针对WNV感染,美国采取了一系列防控措施,如建立国家虫媒病毒监测系统(ArboNET)、控制流行地区蚊虫、开发新型诊断方法、实施疫苗免疫等。但是,由于美国至少有65种蚊子能够传播WNV,感染WNV的候鸟可长距离传播病毒,加之季节、气候、人类活动等因素,导致WNV在美国难以根除。本案例提示我国应注重完善国家外来人兽共患病监测系统和实验室诊断方法 ;加强公共卫生实验室能力建设;利用大数据,建立WNV长期预警模型;确定理想的哨兵动物;加强政府与企业的合作以及疫苗、驱蚊剂的研发;加强宣传,突出防控重点。     

日本脑炎病毒弱毒疫苗株全长cDNA的体外合成及恢复病毒的拯救

将病毒的全基因组分成3个重叠的区段分别扩增出来,把这3个片段连接到载体中。以这3个片段为模板,通过融合PCR方法,获得JEV的全长cDNA。以cDNA为体外转录的模板,体外转录获得病毒mRNA,转染BHK-21细胞,拯救JEV病毒。通过生物学特性、分子生物学、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定,并测定恢复病毒的生长曲线和LD50。结果显示,获得了全长cDNA,体外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞后,二代恢复病毒可引起明显的细胞病变,间接免疫荧光试验和RT-PCR均为阳性。空斑试验表明,拯救病毒与原病毒空斑表型类似;恢复病毒与亲本毒相比在BHK-21细胞上生长更快;恢复病毒的LD50与亲本毒类似。     

苜蓿草地土壤呼吸及其对环境响应的研究

采用LI-8100对河北沽源牧场地区3年生苜蓿(Medicago sativa L.)草地生长季土壤呼吸速率日动态以及季动态进行测定,分析了土壤呼吸速率与土壤温度、土壤湿度和大气辐射的相关性。结果表明:苜蓿草地的土壤呼吸日动态呈单峰曲线,各观测日的最小值分别为3.102,2.071,4.655,4.52,3.355μmol·m^-2·s^-1,出现在每天8:00-9:00和18:00-19:00之间,相对应的最大值分别是4.934,3.034,6.948,5.682,4.823μmol·m^-2·s^-1,出现在13:00-16:00之间。土壤呼吸速率日动态与5 cm土壤温度的相关性最大,R2的值为0.2722~0.8214(P<0.05),与10 cm土壤温度有一定的相关性,与20 cm土壤温度相关性不大。土壤呼吸季动态呈不规则单峰曲线,最小值是2.48μmol·m^-2·s^-1,出现在6月26日,最大值是5.79μmol·m^-2·s^-1,出现在7月24日。土壤呼吸季动态与5,10,20 cm深度的土壤温度均无相关性,与5,10,20 cm深度土壤湿度均有极相关关系(P<0.01),与太阳辐射无相关性。     

花生抗黄曲霉相关基因PnLOX2的原核表达及RNAi载体的构建与转化

本研究对利用基因芯片技术从抗、感黄曲霉花生品种中分离出的差异表达基因PnLOX2进行原核表达,得到分子量为121.5 kD的融合表达产物;构建了PnLOX2基因的3'端反向重复结构并转化花生,得到了转基因花生苗,为反向鉴定PnLOX2基因在花生抗黄曲霉侵染过程中的功能奠定基础。     

牛卵母细胞体外受精技术

牛卵母细胞体外受精技术是指卵母细胞在体外条件下与雄配子发生结合,完成受精,发育成胚胎,成完整个体的技术,是适应市场发展,提高国内自主育种水平的高科技手段.体外受精技术可以选择后代性别,加速育种进程,提高受精质量,在科学研究和良种选育中对牛体外受精技术都有很大的需求.因此,本文将从牛卵母细胞的获取、精子的体外获能、体外受精以及胚胎发育和移植四个方面对牛卵母细胞体外受精技术进行简单的介绍.