猪繁殖与呼吸综合征抗病育种研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus, PRRSV)引起的一种高度接触性传染病,严重危害我国乃至世界养猪业。然而由于PRRSV抗原的多变性,目前包括疫苗接种、药物治疗等在内的防治措施效果不佳。因此,随着现代分子生物学技术的不断发展,基于基因编辑技术对猪PRRS的抗病育种逐渐发展起来。本文简述了PRRS的临床症状,重点回顾了国内外PRRS抗病育种研究进展,通过分析PRRS的致病机制,重点阐述了PRRSV受体及针对不同受体进行编辑的体内及体外抗病毒效果,以期为未来深入研究PRRSV致病机制、开发PRRS抗病品种提供理论依据。     

通过线粒体DNA D-环序列多态性决定亚洲和欧洲猪品种间的系统发育关系

线粒体DNA－D环1036bp序列可以用来评估亚洲和欧洲猪的系统发育关系。以最大相似距离为基础构建了一种运用算术树的非平衡配对方法。计算遗传距离所用序列来源于3种南韩猪（Che ju）、11种中国猪、1种澳大利亚野猪（westran）、2种欧洲猪（波克夏和welsh），以及已经发表的序列：4种日本猪（包括2种野猪）、1种小型猪（yucatan）、5种欧洲猪（包括长白、杜洛克兰德瑞斯、swedish和野猪、2种梅山猪。同时测定了哥伦比亚颈圈野猪（tayassu tajacu）的序列并作为一个外围品种。应用最简化的搜寻方法确定bootstrap抽样，亚洲猪聚类在一起（引导程序支持33％），与欧洲猪截然分开（引导程序支持93％）。起源于南大洋洲kangaroo岛的野猪westran应归类于亚洲猪种，证明它们的线粒体与亚洲猪种同源。波克夏和长白归类于亚洲猪种，表明亚洲猪种参与了它们的选育过程。研究结果表明，中国、韩国、日本猪的地方品种只是最近才分开，它们明显的不同于欧洲猪种，欧洲猪由亚洲类和非亚洲类猪（依据线粒体分类）组成，其中一些品种是由母系亲缘关系相近或同一祖先演化而来。     

大蒜素诱导肿瘤细胞凋亡研究进展

近年来许多体外研究表明大蒜素能够诱导包括白血病、肝癌、卵巢癌、胃癌等多种肿瘤细胞的凋亡,并取得了很好的效果,其诱导肿瘤细胞凋亡的途径可能是通过影响细胞生长周期、相关凋亡基因、caspase蛋白表达、细胞端粒酶活性等方式来实现的。大蒜素作为大蒜的主要活性成分,其抗癌效果备受人们的关注。大蒜素诱导肿瘤细胞凋亡是一个比较复杂的生物学过程,论文对大蒜等诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制进行了综述。     

藏猪obese基因编码序列合成及obese基因的原核表达

基于对人类肥胖病的研究,推测肥胖基因可能是影响家畜脂肪沉积的一个重要候选基因。研究以藏猪为实验材料,利用重叠延伸PCR方法合成藏猪肥胖基因的CDS序列,并通过构建原核表达系统实现其高效表达。结果表明:用重叠延伸PCR方法获得504 bp肥胖基因CDS全长序列;SDS-PAGE检测显示,在0.075 mmol/LIPTG诱导5 h时,瘦素蛋白Leptin表达最为高效。藏猪肥胖基因的高效表达研究,对提高我国地方猪种瘦肉率具有重要的实践意义。     

中国畜禽品种资源网络数据库系统的构建

在规范化《中国畜禽品种志》和重新调查搜集到的大量畜禽种质资源信息后,利用TBF全文信息非结构数据库,构建了“中国畜禽品种资源网络数据库”,并通过Internet以http：／／www．cdad-is．org．cn／网址发布。在网站内系统提供了包括全文检索、组合检索、二次检索、字段检索和多库检索等功能,并指出了本网络数据库的今后发展目标是如何获取我国畜禽品种资源的动态信息,以及实现资源信息从内容管理到知识管理的逐步过渡。     

猪原癌基因JunB的电子克隆及比较基因组学分析

电子克隆了猪原癌基因JunB,并对其编码的蛋白基本理化性质、信号肽、疏水性、高级结构等进行了预测和分析。结果表明:猪JunB基因是一个cDNA全长为1 883 bp的单外显子基因,编码合成347个氨基酸的多肽;编码的蛋白分子量35 942.42 Da,属于亲水性蛋白,不含信号肽及跨膜结构,可剪切位点可能在第46个氨基酸残基处,可能是个非分泌性的蛋白,二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主;在成年关节囊、成年肾上腺、舌头、血液、小肠、肌肉等组织和细胞中表达。     

北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达

利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23 kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1.设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中.转染后24、48和72 h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%～53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中.随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状.结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求.     

普氏野马与两种新疆地方品种马的ELA-DRA*exon2的多态性分析

为了解普氏野马、哈萨克马与焉耆马的ELA-DRA*exon2的多态性以及等位基因频率分布。本研究采用PCR-SSCP技术对普氏野马、哈萨克马与焉耆马的ELA-DRA*exon2进行分型,并对不同等位基因进行核苷酸与氨基酸分析。结果显示:127匹马中共出现7种基因型,3种纯合子分别记为AA、BB、CC;4种杂合子分别记为AB、AC、BC、AD。AA基因型为哈萨克马与焉耆马的优势基因型,普氏野马以CC基因型为主。经χ2检验后,3种类型马的等位基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态。PIC值与He值分析表明,3种类型马均属于中度多态,且普氏野马的PIC值与He值比哈萨克马与焉耆马低。     

用基因工程技术提高羊毛生产

发展和应用重组 DNA 技术,提高绵羊羊毛生产效率及羊毛质量具有广阔前景。本文概括评述获得转基因绵羊、改良瘤胃细菌及饲料作物、提高饲料利用效率的可能性。澳大利亚的主要绵羊品种是以1799年从西班牙引进的美利奴培育成的澳洲美利奴为主的高产细毛羊,是通过选育获得具有高密度羊毛的绵羊,毛囊总数达10~3个。每个毛囊可生长出一根直径(20微米或更小)一致的毛纤维。绵羊育种的重要结果是使羊毛生长受到毛囊之     

太行黑山羊成纤维细胞系建立与生物学特性研究

以太行黑山羊耳缘组织为材料,采用组织块直接培养法和细胞冷冻技术构建了成纤维细胞系,并进行了细胞活力测定生长动力学观察、微生物污染间检测、染色体标本制备、同功酶分析及生物学研究。结果表明：细胞群体倍增时间（PDT）约为24h;细胞染色体中二倍体（2n=60）占主体,镜检细胞的百分比为98．2％;乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸（MDH）脱氢酶同工酶分析,没有其他物种污染;细菌、真菌、病毒、支原体检测阴性。该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。此项研究不仅在细胞水平上保存了这一重要畜禽品种的种质资源,而且亦为其基因组和后基因组及体细胞克隆等研究提供宝贵实验材料。同时,此技术平台的建立必将为其他畜禽遗传资源细胞水平的保存提供技术与理论支撑和保障。