微量提取法提取茵陈总黄酮的工艺研究

以微量提取法提取茵陈中黄酮类化合物,用紫外-可见比色法和芦丁为标准品测定茵陈总黄酮的得率,在单因素试验的基础上,设计L9(34)正交试验。结果表明,影响微量提取法提取茵陈总黄酮类的主次因素为:料液比提取时间提取温度;最佳提取工艺条件为:料液比1∶30(g/mL),提取时间30 min,提取温度60℃,茵陈中总黄酮得率为4.20%。     

甘蓝型油菜与紫罗兰融合体培养的影响因素研究

对影响甘蓝型油菜与紫罗兰下胚轴原生质体融合后的融合体培养因素进行了研究。结果表明:采用液体浅层培养,以改良的KM8p为培养基附加2,4-D1.5 mg/L,NAA0.5 mg/L,6-BA0.5 ml/L,以蔗糖0.3 mol/L和葡萄糖0.1 mol/L作渗透稳定剂进行培养效果最好;原生质体培养3～6 d,细胞发生第1次分裂,第7天时分裂频率最高为13.8%;35天后形成大量的细胞团和肉眼可见的小愈伤组织,其植板率最高为6.5%。     

盐溶蛋白电泳检测玉米种子纯度的操作技术

介绍了玉米种子盐溶蛋白电泳鉴定真伪及纯度的操作技术,并对该方法在实际应用中应参照的国标及存在的问题进行了分析和探讨。     

紫罗兰下胚轴原生质体分离条件的研究*

 以紫罗兰（Matthiola incana）无菌苗下胚轴为材料，对光照条件、无菌苗日龄、酶液渗透压、酶液组合和酶解时间对其原生质体分离的影响进行了研究。结果表明，种子在20 ℃黑暗条件下萌发4 d后，转移到25 ℃，2 000 lx，14 h光照/日条件下约14日苗龄，用1.2%Celluase (Onozuka R-10)+0.8% Macerozyme(Onozuka R-10)+3 mmol/L MES+CPW-10 mol/L酶组合处理约12 h，可以高效分离出有活力的原生质体。这为有效从紫罗兰下胚轴原生质体再生植株和进行体细胞杂交奠定了基础。     

铜胁迫对苜蓿中华根瘤菌抗氧化酶系的影响

探讨铜胁迫对苜蓿中华根瘤菌抗氧化酶系的影响,揭示苜蓿中华根瘤菌对铜的生理抗性机制.以铜抗性菌株Sinorhizobium meliloti CCNWSX0020和铜敏感性S.meliloti CCNWSX 0018为材料,测定其对铜的最小抑制浓度(MIC)和最大耐受浓度(MTC)及不同铜浓度对其抗氧化保护酶活性的变化.结果表明:(1)在YMA固体培养基上,S.meliloti CCNWSX0020和S.melilotiCCNWSX 0018的MIC分别为0.5 mmol·L-1和0.2 mmol·L-1Cu2+,MTC分别为1.8 mmol·L-1和0.8 mmol·L-1Cu2+.(2)Cu2+浓度≤0.4mmol·L-1时,S.meliloti CCNWSX0020菌体内的SOD、CAT和GPX活性变化不显著;S.meliloti CCNWSX 0018菌体内的SOD、CAT和GPX活性显著升高;Cu2+浓度为0.6 mmol·-1和0.8 mmol·L-1时,前者SOD、CAT和GPX活性显著升高,后者保护酶活性开始降低.随着Cu2+浓度升高,S.meliloti CCNWSX0020的GR活性增强,与对照相比,Cu2+浓度为0.8 mmol·L-1时GR活性提高了110.51%;而S.meliloti CCNWSX 0018的GR活性则反之.(3)在Cu2+浓度≤0.8 mmol·L-1胁迫下,抗性菌株S.meliloti CCNWSX0020可通过提高SOD、CAT、GPX、GR的活性以降低Cu2+的毒害效应,为丰富根瘤菌抗铜机制提供了理论基础.     

镧对铜胁迫下玉米幼苗叶片抗氧化系统的影响

为探讨La促进作物生长、增强抗逆性的生理基础,以玉米(Zea maysL.)幼苗叶片为材料,研究了Cu2+胁迫下La3+对玉米幼苗抗氧化系统的影响.结果表明:0.5 mmol/L Cu2+处理促进了脯氨酸(Pro)、可溶性糖和丙二醛(MDA)的积累,显著提高了细胞质膜透性(RMP)及POD和CAT的活性;随着La3+浓度的升高,Pro、可溶性糖和MDA含量先下降后上升,保护酶POD和CAT活性呈下降-上升-下降趋势.说明适宜浓度的La3+降低了细胞内Cu2+胁迫诱导的膜脂过氧化产物和渗透物质的积累,延缓膜透性的增加,缓解了活性氧自由基的产生,从而缓解Cu2+对玉米幼苗的伤害,La3+最佳作用浓度为80 mg/L,La3+浓度160 mg/L及以上则与Cu2+协同作用加剧对玉米幼苗的伤害.     

甘蓝型油菜小孢子再生体系的优化研究*

 以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号为材料，优化了甘蓝型油菜小孢子再生胚状体的条件，建立起甘蓝型油菜小孢子的高效再生体系。在主花序第一朵花开后第4d从主花序上取4.0～4.5mm花蕾，每毫升NLN培养基接种1个花蕾的小孢子，在32℃起始热激培养36h，胚状体再生频率最高，花油3号达24.80个胚状体/花蕾，湘油15号达16.50个胚状体/花蕾。胚状体再生植株的频率为80.25%。     

中华枸杞叶片离体再生技术初探

为探索中华枸杞(Lycium chinense Mill.var.chinense)叶片离体再生技术,通过设置不同消毒时间梯度,研究了0.1%升汞溶液对中华枸杞叶片的消毒效果;以MS为基本培养基,添加6-BA、2,4-D、IAA等激素,研究了不同激素浓度配比对中华枸杞叶片离体再生的影响。结果表明,用0.1%升汞溶液消毒叶片8 min,污染率最低,是中华枸杞叶片的最佳消毒时间。基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L2,4-D是诱导愈伤组织的最佳激素浓度配比;基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化的最佳激素浓度配比;基本培养基中添加0.2 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA是诱导丛生芽生根的适宜激素浓度配比。利用组织培养技术可有效实现中华枸杞叶片离体再生和快速繁殖,为其工厂化育苗和优良品种的选育奠定基础。     

茵陈黄酮类化合物体外抗氧化性研究

用分光光度法测定黄酮类化合物对卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸（PUFA）体系所产生的ROO抑制能力,以及对Fe^2＋＋H2O2体系和邻苯三酚白氧化体系所产生的·OH和02^-·清除能力。结果表明,茵陈黄酮黄酮类化合物抑制脂质过氧化能力较强,其半抑制率IC50为155．77μg／mL,并对O2^-·、·OH均具有良好的清除作用,其IC50分别为20．23μg／mL和80．40μg／mL。     

4种核酸染料在实验教学中的应用研究

分别使用4种核酸染料对凝胶中质粒DNA进行染色,紫外凝胶成像仪下观察和记录结果,比较4种核酸染料对琼脂糖凝胶中DNA的染色效果,并对结果进行比较分析。结果表明,EB价格低廉,对含量为50ng以上的DNA着色效果最好,亮度较暗;而Gold view与EB相比染色效果无太大差别,但是亮度比EB稍亮;Sybrgreen在这4种核酸染料中亮度很明显,且对含量为10ng以上的DNA就有荧光呈现;Ultra power对含量为5ng以上的DNA染色效果明显,亮度最亮。由于EB有强致突变性,微毒,而后3种核酸染料基本无毒性,安全可靠,因此,本着经济、方便、可靠的原则,在实验室中用Gold view足以满足一般需要;经济允许且在做荧光定量PCR、即时PCR时,最好选用Sybr green。